摘要: 本文主要研究了急性冷应激对牦牛乳腺上皮细胞热休克蛋白70(Heat stress protein,HSP70)表达量的影响。采用实时荧光定量PCR技术,以急性冷刺激10℃为典型研究环境,分析了HSP70 mRNA表达的变化规律。结果显示,乳腺上皮细胞在10℃分别冷处理2 h、4 h、6 h和8 h,其HSP70 mRNA的表达量变化均不显著(P>0.05);分别在10℃冷处理2 h、4 h、6 h和8 h,再复温培养4 h,HSP70 mRNA的表达量均极显著增加(P<0.01),于6 h达到峰值;在10℃先冷处理4 h,然后分别复温2 h、4 h、6 h和8 h,HSP70 mRNA的表达量亦均显著增加(P<0.01),并于4 h达到峰值。结论:急性冷应激诱导牦牛乳腺上皮细胞HSP70表达量的增加不是发生在冷处理过程中,而是发生在复温过程中,并且在一定范围内随冷处理时间的增长表达量增高。

摘要: 在西藏羌塘国家级自然保护区发现有种群数量约200头的全身被毛为金色的野牦牛。为探究该种金丝野牦牛与普通野牦牛(Bos grunniens mutus)和家牦牛(Bos grunniens)的遗传差异,本研究通过分析金丝野牦牛线粒体DNA中的细胞色素b(Cyt b)和D-loop区基因序列差异,初步探讨了金丝野牦牛遗传分类地位。结果表明:金丝野牦牛的这两个基因片段的序列结构特征、长度、核苷酸组成与其他牦牛相似;金丝野牦牛与普通野牦牛的遗传距离最小,在系统树中,它们聚集为一支,说明金丝野牦牛与普通野牦牛亲缘关系最近;但金丝野牦牛与普通野牦牛的遗传距离较普通野牦牛个体间平均遗传距离大,加上毛色等形态区别,我们认为金丝野牦牛为野牦牛的一个亚种或者重要保护单元。但由于样本数量有限,仍需进一步深入研究确定。

摘要: 为从分子水平上探究西藏牦牛类群的遗传多样性、亲缘关系,本研究测定了日多牦牛、类乌齐牦牛、丁青牦牛、错那牦牛、隆子牦牛、仲巴牦牛、聂荣牦牛、申札牦牛等8个西藏牦牛类群共328头牦牛mt DNA D-loop区序列,分析其多态性,构建系统进化树。结果表明:本次测定的西藏牦牛mt DNA D-loop区序列长度为887-895 bp,共检测到135个变异位点,其中单态突变位点52个,简约信息位点83个。在328个个体中共检测出91种单倍型,平均单倍型多样性(Hd)、平均核苷酸多样性(π)分别为0.884、0.010 27,显示西藏牦牛具有丰富的遗传多样性。8个类群间平均遗传距离为0.011;日多牦牛与错那牦牛间遗传距离最小(0.006);类乌齐牦牛与隆子牦牛间遗传距离最大(0.015)。系统进化分析显示西藏牦牛可分为两大类,错那牦牛是较纯的牦牛类群,其它牦牛类群在进化过程中出现相互交流的情况。

摘要: 白血病抑制因子受体(LIFR)与白血病抑制因子(LIF)结合,在排卵、胚胎发育及胚胎附植等过程中起重要的调节作用,与哺乳动物生殖过程密切相关。为进一步研究白血病抑制因子受体(LIFR)基因在卵巢中的表达,本研究对牦牛LIFR基因进行克隆和序列分析,并利用RT-PCR技术研究其在繁殖周期卵巢中的表达情况。本研究克隆得到牦牛3 329 bp的LIFR基因c DNA序列,内含3 288 bp开放阅读框序列。与家牛的相应序列具有很高的同源性(99.5%),表明LIFR基因在进化过程中较为保守。实时定量RT-PCR检测LIFR基因在繁殖周期卵巢中的表达,结果显示卵巢中LIFR基因在妊娠期表达最强。表明LIFR基因在牦牛繁殖周期中具有不可忽视的作用。

摘要: 心脏作为血液循环最重要的器官在动物环境适应中发挥着重要的作用。心肌细胞是心脏主要的功能细胞，然而高海拔地区牦牛心肌细胞基因表达变化及细胞间通讯关系尚不清楚。为此，本研究以高海拔地区牦牛(青海祁连，海拔4 000 m)和低海拔地区牦牛(青海循化，海拔2 600 m)为研究对象，基于心脏组织10×单细胞转录组测序数据，对心肌细胞和心脏其他细胞进行细胞通讯及配体-靶基因调控预测，同时对高、低海拔牦牛心肌细胞差异表达基因进行功能注释分析，以期探究心肌细胞在牦牛适应高原环境过程中的作用。结果显示，牦牛心肌细胞与内皮细胞、上皮细胞的关联最强，心肌细胞-树突状细胞及心肌细胞-巨噬细胞两个“细胞对”中CD74＿COAP和CD74＿APP配受体表达量相对较高；配受体活力在TNF信号通路中相对较强；在免疫相关通路发挥重要作用的配体PTPRC、PECAM1、ITGB2、ANXA1、BDNF等对所有“细胞对”影响明显，且PI3K-Akt信号通路在配体-靶基因调控中潜力分值最高；高、低海拔牦牛心肌细胞中差异表达基因功能主要富集在代谢途径，其中氧化磷酸化、糖酵解代谢通路相关的基因表达明显增强。本研究结果提示，牦牛可通过加强心肌细胞与其他细胞之间的联系及调节免疫作用相关过程维持自身稳态；同时高海拔牦牛可通过增强心肌细胞有氧代谢和无氧代谢进而获取更多能量以适应高海拔严酷环境。