摘要: 熊蜂是蜜蜂科熊蜂属昆虫的统称，在维护自然生态系统的稳定与促进农业生产等方面发挥着重要的作用。为了掌握四川贡嘎山国家级自然保护区中熊蜂物种多样性的现状与历史变化情况、评估它们的生态服务功能、鉴定出濒危蜂种进而进行保护，本研究在2022-2023年间，分3次在保护区中的23块采样地采用网捕的方式共采集了919头熊蜂样本，并在采样的同时记录了熊蜂取食植物的种类。同时采用形态特征与分子条形码技术相结合的方法对采集到的熊蜂标本进行了物种鉴定、计算了其多度及均匀度指数、分析了其海拔分布特点。研究结果显示，保护区中现有熊蜂21种，隶属于7个亚属，Shannon-Wiener多样性指数为2.2093。这21种熊蜂中有8种为稀有种，其中的灰熊蜂Bombus grahami、卧龙熊蜂B. wolongensis、拉达克熊蜂B. ladakhensis、稳纹熊蜂B. waltoni等4种熊蜂，不仅数量少、而且分布范围也非常狭窄，是保护区中亟需高度关注的蜂种，应尽早采取保护措施。随着海拔的升高保护区中熊蜂的数量和物种丰富度都逐渐增加，并且在海拔3 000～4 000 m的区间二者均达到峰值。熊蜂在保护区中为超过43种野生、经济植物提供授粉服务。与40年前的调查结果相比，拟熊蜂亚属的两种熊蜂（牛拟熊蜂B. bohemicus与探索拟熊蜂B. expolitus）均没有在保护区中被发现，大概率已经发生了局地灭绝，本研究的这一调查结果也证实了前人的猜测：由于其社会性寄生的生活方式，拟熊蜂亚属的熊蜂应该更容易濒危或灭绝。综上所述，本研究掌握了保护区中熊蜂种质资源的现状及历史变化情况，鉴定出亟需高度关注的蜂种，这为保护区中熊蜂种群的动态监测与保护奠定了重要基础。

摘要: 白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor, LIF)是一种调节细胞生长、增殖和分化的重要因子。骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)在组织损伤修复、自身免疫疾病治疗中具有广阔的应用前景，对大熊猫等濒危动物的疾病治疗和遗传保护方面有着巨大的潜力。本研究旨在构建大熊猫LIF过表达载体，应用脂质体转染大熊猫骨髓间充质干细胞(Panda bone marrow mesenchymal stem cells, PDBM-MSCs)，研究LIF对PDBM-MSCs生长的影响。本研究从PDBM-MSCscDNA中扩增LIF基因CDS区，无缝克隆连接至pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+puro过表达载体上，构建LIF过表达重组质粒，利用Lipo3000转染重组质粒至PDBM-MSCs中。研究结果显示，转染48 h后PDBM-MSCs表达绿色荧光，转染72 h后分别提取细胞总RNA，反转录成cDNA，经q-PCR检测发现，转染后LIF过表达组相比阴性对照组LIF的mRNA表达水平显著提高。同时，LIF过表达后能够显著上调细胞周期调控基因CCNB2、CDK7在mRNA水平上的表达，显著下调凋亡基因caspase3、 P53、 P16、 P21在mRNA水平上的表达；转染72h后流式检测显示转染LIF过表达重组质粒的PDBM-MSCs细胞活率显著高于阴性对照组。本研究成功构建大熊猫LIF过表达载体并转染至PDBM-MSCs中，显著提高细胞活率、抑制凋亡，表明LIF对PDBM-MSCs起到促进生长抑制凋亡的作用，为LIF在大熊猫中的作用机制研究奠定了基础。

摘要: 为了解大熊猫栖息地内土壤-食物-粪便中矿物元素分布特征，本研究于2022年3月和8月，在陕西佛坪国家级自然保护区核心区内采集大熊猫栖息地土壤、食物和粪便样本。对样本中的钙(Ca)、镁(Mg)、磷(P)、钠(Na)、钾(K)、铁(Fe)、锰(Mn)、锌(Zn)、铜(Cu) 9种动物必需矿物元素绝对含量进行检测，并对各元素在食物和粪便中的相对含量进行比较分析。结果显示：土壤中绝对含量高的元素，在食物和粪便中的绝对含量不一定高；土壤中绝对含量低的元素，在食物和粪便中绝对含量不一定低。土壤和竹叶中，各矿物元素之间存在广泛的正相关或负相关关系，粪便中各矿物元素呈现显著正相关。竹叶经大熊猫消化利用之后，各个元素的相对含量在粪便中发生变化。当大熊猫采食巴山木竹(Bashania fargesii)叶时，P和Na的相对含量表现为粪便低于食物，Ca、Mg、K、Mn、Cu和Zn在食物和粪便中的相对含量无显著差异，而Fe在粪便中的相对含量显著高于食物；当主食秦岭箭竹(Fargesia qinlingensis)叶时，Mn在食物和粪便中的相对含量无显著差异，Fe的相对含量表现为粪便高于食物，其他7种元素在粪便中的相对含量均显著低于食物。矿物元素在土壤-食物-粪便中的绝对含量不完全一致；大熊猫采食不同主食竹竹叶时，对不同矿物元素的利用率不同，在9种元素中对Fe的吸收率均最低。这些结果阐明了野外大熊猫栖息地土壤-食物-粪便中矿物元素含量和分布特征，以及大熊猫对必需矿物元素的利用存在差异，有助于进一步理解野生大熊猫的营养对策，并为圈养大熊猫矿物质营养调控提供参考。

摘要: 估算大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)取食竹地上生物量对评估大熊猫食物资源和栖息地质量有重要意义。本研究利用样方法和收获法对大熊猫国家公园荥经片区不同森林类型下各竹种的地上生物量进行调查，初步估算荥经片区大熊猫取食竹地上生物量。结果表明：(1)不同森林类型下的大熊猫取食竹地上生物量差异不显著，不同竹种的地上生物量差异极显著，但大多表现出枝<叶<秆的规律；(2)大熊猫国家公园荥经片区八月竹(Chimonobambusa szechuanensis)、短锥玉山竹(Yushania brevipaniculata)、冷箭竹(Bashania faberi)和泥巴山筇竹(Qiongzhuea multigemmia)的分布面积分别为20 770.44 hm2、31 549.34 hm2、30 714.25 hm2和23 340.65 hm2，总的地上生物量分别为640 543.67 t、 177 086.42 t、 344 601.63 t和152 888.26 t，每平方米秆和叶分别可提供能量16 246.17 kJ、3 157.89 kJ、7 786.47 kJ和2 814.41 kJ;(3)从取食竹地上生物量角度来看，在特定空间与时间范围内，该研究区域大熊猫食物资源暂不存在食源竹类供给不足的问题。本研究结果能够为更好地制定大熊猫及其栖息地科学保护管理措施提供一定的参考价值。

摘要: 大熊猫栖息地土壤含有丰富的微生物资源，这些微生物不仅是大熊猫共生微生物的直接来源，还可通过影响土壤理化性质和主食竹的生长发育来间接影响大熊猫的健康。因此，以陕西佛坪国家级自然保护区内的大熊猫核心分布区内巴山木竹Bashania fargesii林为研究地点，采集冬春两季的土壤样品，通过细菌16S rRNA和真菌ITS基因测序，解析栖息地土壤微生物群落组成和多样性，以及群落内微生物间的互作关系。结果表明：（1）土壤中的细菌以变形菌门Proteobacteria、酸杆菌门Acidobacteria和放线菌门Actinobacteria为主；真菌则主要为子囊菌门Ascomycota、担子菌门Basidiomycota和罗兹菌门Rozellomycota;(2)细菌和真菌的α多样性均为冬季显著大于春季（P<0.05）,β多样性无显著差异（P>0.05）;(3)共现网络分析结果显示，微生物群落间的互作关系均以正相关关系为主，共鉴定出21个关键菌群。研究结果表明大熊猫栖息地土壤中微生物组成和多样性存在季节性差异，同时揭示微生物间的互作信息，为大熊猫栖息地微生态系统功能的提升提供了科学依据。