摘要: 【目的】近年来,熊蜂作为温室作物的理想授粉者在国外已被广泛利用,并且获得很好的经济效益和生态效益,所以国外熊蜂经常被进口用于设施农业。熊蜂短膜虫Crithidia bombi是熊蜂的一种重要寄生虫病,一旦随进口熊蜂传入,将给国内熊蜂蜂群带来严重危害,因此迫切需要建立一种熊蜂短膜虫检测方法。【方法】基于熊蜂短膜虫基因内转录间隔区(internal transcribed space,ITS)基因序列设计了一对引物(Cri-F/R),建立了熊蜂短膜虫的PCR检测方法,并对退火温度、引物浓度和循环个数等反应条件进行了优化,同时验证了该PCR方法的灵敏性、特异性和稳定性。【结果】以熊蜂短膜虫ITS基因保守区设计特异性引物建立的熊蜂短膜虫PCR检测方法是可行的。优化的PCR反应条件为:退火温度59℃,引物浓度0.5μmol/L,扩增循环数35次。对感染熊蜂短膜虫的熊蜂总DNA的灵敏度达到13.24×10-5ng/μL,并具有良好的特异性和稳定性。将该方法应用于熊蜂短膜虫的检测,整个检测过程不超过4 h,具有良好的适用性。【结论】研究建立了熊蜂短膜虫检测方法,能用于疫情监测和进境熊蜂的检验检疫。

摘要: ＴＨＥＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＢＥＴＷＥＥＮＤＩＦＦＥＲＥＮＴＳＴＲＡＩＮＳＯＦＣＲＩＴＨＩＤＩＡＢＯＭＢＩＡＮＤＴＨＥＳＵＲＶＩＶＡＬＯＦＴＨＥＩＲＨＯＳＴＢＵＭＢＬＥＢＥＥＳ不同株的熊蜂短膜虫与宿主生存的关系ＫｅｙｗｏｒｄｓＣｒｉｔｈｉｄｉａｂｏ...

摘要: 对宿主来源的寄生原虫直接克隆,为调查自然界寄生原虫克隆的流行病学、生态学、遗传学及其宿主的关系等研究提供更准确的实验材料。为此我们对来源于宿主肠道的熊蜂短膜虫(Crithidiabombi)进行了直接克隆的实验。结果报道如下。

摘要: 利用自然界多重感染来源的两株熊蜂短膜虫（Ｃｒｉｔｈｉｄｉａｂｏｍｂｉ）对熊蜂宿主（Ｂｏｍｂｕｓｔｅｒｅｓｔｒｉｓ）进行了感染实验。经过对宿主排泄物中熊蜂短膜虫Ａ、Ｂ两株及ＡＢ混合株的细胞计数和分析，发现宿主排泄物中熊蜂短膜虫、Ａ、Ｂ两株的细胞数具有明显差异。熊蜂短膜虫能在自然界中为区域性流行，不需媒介传播，增殖数量株间的差异将导致其在宿主体内的竞争和传播率的不同。虽然两株的增殖数量具有明显差异，但在自然界却普遍存在着两株共存的现象。结果提示，两株熊蜂短膜虫在同一宿主体内，它们的一些生物性指标可能发生交换，使两株熊蜂短膜虫在同一宿主体内共存

摘要: 从苏黎世和巴塞尔两个地理区域来源的熊蜂宿主（Ｂｏｍｂｕｓｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）中分离了４７个熊蜂短膜虫克隆。利用ＧＰＩ、ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧＤ和ＰＧＭ五种等位基因酶电泳对这４７个熊蜂短膜虫克隆的检测结果发现，熊蜂短膜虫克隆间缺乏理论基因型，说明熊蜂短膜虫的自然群体存在着克隆结构。两个地理群体的熊蜂短膜虫的克隆结构也具差别。根据等位基因酶推测熊蜂短膜虫的染色体为双倍体。利用脉冲场梯度凝胶电泳，清楚地分离了熊蜂短膜虫的九条染色体规模ＤＮＡ带，其长度在不同地理群体的熊蜂短膜虫间都明显具有差别。实验证明，熊蜂短膜虫是由于地理区域宿主的隔离从古老的群体长期进化而来。