摘要: 烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是一个物种复合体,包括31个以上形态上无法区分的隐种,其中少数隐种是世界性入侵害虫。目前,在中国境内分布有2个入侵隐种和13个土著隐种。快速、高效的鉴别方法对掌握烟粉虱田间发生规律及制定相关防控策略具有重要意义。然而到目前为止,除了mtCOI基因测序比对外,尚未有一种简便的方法可以有效地区分多个烟粉虱隐种。本研究采用mtCOI PCR-RFLP技术,单独或组合使用TaqI,VspI,Van91I,NcoI和FokI这5种限制性内切酶,酶切烟粉虱mtCOI的PCR扩增片段,鉴别分布在中国境内的9个烟粉虱隐种。结果表明,单独使用TaqI酶切,可鉴别出MEAM1和China1两个隐种,使用TaqI+NcoI分步酶切可鉴定出MED和Asia1两个隐种,使用TaqI+Van91I分步酶切可鉴定出Asia II3和Asia II9两个隐种,使用TaqI+VspI+FokI分步酶切可鉴定出Asia II1,Asia II6和Asia II73个隐种。本研究为高效鉴别中国境内的多个烟粉虱隐种提供了方法。

摘要: 为深入理解杀虫剂胁迫对烟粉虱Bemisia tabaci适应逆境能力的影响,本研究运用实时荧光定量PCR技术测定了LC25,LC50和LC753种浓度的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯分别处理对烟粉虱地中海隐种B.tabaci Mediterranean成虫体内热激蛋白hsp70表达水平的影响。结果表明:在低温(15℃)条件下,LC50和LC75的烯啶虫胺、毒死蜱、高效氯氰菊酯可显著诱导烟粉虱地中海隐种hsp70的表达量增加,此后随时间延长hsp70表达量逐渐下降,到72h时恢复到对照水平,但LC25的3种杀虫剂对hsp70的表达无明显影响;在常温(25℃)下,较高浓度(LC50和LC75)的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯处理24h同样可促进hsp70表达量的增加,然后hsp70表达量逐渐下降,到72h时恢复至正常水平,但低浓度(LC25)的3种药剂处理后hsp70表达量随时间延长而增加,到72h时达到最高;在高温(32℃)条件下,LC25和LC50的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯处理24h可显著增强hsp70的表达水平,此后随时间的延长hsp70表达恢复至正常水平。杀虫药剂诱导的hsp70表达量增加增强了烟粉虱地中海隐种对杀虫药剂和高温的耐受能力,这可能是导致其在我国快速扩张的原因之一。

摘要: MEAM1和MED是烟粉虱Bemisia tabaci两种重要的外来入侵隐种,在我国部分地区常混合发生,对我国农业生产造成了不同程度的危害和损失。尤其是MED隐种危害寄主范围更广,对多种杀虫剂具有较高抗性,防治上更为困难。因此,如何快速鉴定烟粉虱MEAM1和MED隐种,对于烟粉虱防治策略的选择具有十分重要的意义。本研究选择线粒体细胞色素氧化酶I(mitochondrial cytochrome oxidaseI,mtDNACOI)基因保守区域内的单核苷酸多态性(SNP)为靶标,应用等位基因聚合酶链式反应技术,借助TaqMan-MGB荧光染色标记探针,建立了一种鉴定烟粉虱MEAM1和MED隐种的等位基因选择性PCR方法,并对北京11个区县的14个烟粉虱种群进行了隐种鉴定。结果表明,北京地区14个烟粉虱种群样本与已知烟粉虱MED隐种种群在荧光值分布上聚为一簇,为MED隐种。该鉴定方法具备SNP基因分型的优点,可快速、可靠、高通量地鉴定烟粉虱MEAM1和MED,为烟粉虱隐种鉴定及遗传分化研究提供了新的可选途径。

摘要: 2003年首次在云南昆明发现Q型烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)传入中国。随后几年时间内,它在许多省份逐年取代了B型烟粉虱种群。2008年后,Q型烟粉虱基本上成为了中国多数省份农区的优势生物型。为了进一步揭示Q型烟粉虱在中国快速扩散以及取代B型烟粉虱的遗传学基础,本研究利用11个微卫星位点分析并比较了2003年中国云南昆明Q型烟粉虱入侵种群及其他地点的11个B型入侵种群,西班牙2个Q型土著种群,以色列1个Q型入侵种群,以色列1个B型土著种群,以及西班牙、美国与澳大利亚的5个B型入侵种群的遗传结构。结果表明,中国Q型烟粉虱早期种群(云南昆明种群)可能来自于西部地中海地区。中国B型烟粉虱种群遗传多样性高于西班牙、澳大利亚、美国B型种群,中国B型可能存在多次传入或某个混合种群的再次传入。相对于原产地种群,中国Q型烟粉虱早期入侵种群与B型烟粉虱种群遗传多样性并没有明显降低,表明Q型与B型烟粉虱种群可能经历了较小的瓶颈效应或奠基者效应。中国Q型烟粉虱早期入侵种群遗传多样性高于B型烟粉虱种群,Q型烟粉虱这种较高的遗传多样性可能为其较强的生态适应性提供了遗传基础,有利于Q型烟粉虱在新的环境下快速扩散并取代B型烟粉虱。

摘要: 丽蚜小蜂Encarsia formosa Gahan作为温室粉虱Trialeurodes vaporariorum Westwood和烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)等粉虱类害虫的优势寄生蜂而备受关注。针对丽蚜小蜂体型微小,难以与其他同域近缘种寄生蜂快速、准确区别的问题,本研究采用SCAR(sequence characterized amplified region,特异性扩增区域)标记技术,筛选出一对丽蚜小蜂特征片段扩增引物(EFZZF/EFZZR),其扩增片段的大小为287bp。种特异性检验结果表明,该对引物只对丽蚜小蜂的基因组DNA具有扩增能力,对其近缘种属寄生蜂如浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia(Girault & Dodd)、海氏桨角蚜小蜂Eretmocerus hayati Zolnerowich & Rose、本地未知种桨角蚜小蜂Eretmocerus sp.、蒙氏桨角蚜小蜂Eretmocerus mundus Mercet、刺粉虱黑蜂Amitus hesperidum Silvertri不具有扩增效果,对丽蚜小蜂的寄主包括不同生物型(B型、Q型、ZHJ-1型和ZHJ-2型)的烟粉虱、温室粉虱以及我国最常见的黑刺粉虱Aleurocanthus spiniferus(Quaintanca)等亦不具有扩增能力。同时,该检测技术灵敏度高,对成虫的最低检出阈值为7.812ng/μL(相当于1/1600头成虫)。研究结果对丽蚜小蜂的种类识别、寄主谱的确定及其有效利用具有重要意义。