摘要: 目的观察有氧运动、丰富环境及二者结合对孤独症谱系障碍(ASD)大鼠认知功能和海马组织中ASD易感基因NRXN1、NL3和Shank3表达的影响,探讨其纠正自闭症异常行为的效果及其可能机制。方法采用向Wistar孕鼠腹腔注射丙戊酸钠建立ASD大鼠模型,选取40只成功建模的子代大鼠随机分为有氧运动组、丰富环境组、有氧+环境组以及ASD模型组,每组10只;在常规饲养的母鼠所产子代中随机挑选10只作为空白对照组。有氧运动组大鼠接受持续8周、6次/周、每次在同一时间段、持续90 min的游泳运动干预;丰富环境组大鼠饲养于内有各种玩具、可供大鼠嬉戏玩耍的丰富环境饲养笼;运动+环境组接受运动干预,同时在丰富环境中饲养; ASD模型组和空白对照组不予干预。干预后,采用旷场实验和Morris水迷宫实验观察其行为学表现与改变;采用Western blot检测大鼠海马组织中NRXN1、NL3和Shank3蛋白表达情况;采用RT-PCR检测大鼠海马组织中NRXN1、NL3和Shank3的mRNA表达水平。结果与空白组比较,ASD模型组、有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组的穿格次数少(P<0.05)、逃避潜伏期长(P<0.05)、原平台象限活动时间缩短(P<0.05),NL3、NRXN1和Shank3蛋白的mRNA表达均明显降低(P<0.05);与ASD模型组比较,有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组的穿格次数明显增加(P<0.05)、逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)、原平台象限活动时间延长(P<0.05),大鼠海马组织中NL3、NRXN1、Shank3蛋白的mRNA表达均明显升高(P<0.05,有氧+环境组P<0.01);有氧运动组、丰富环境组及有氧+环境组相互比较,其穿格次数、逃避潜伏期、原平台象限活动时间与NL3、NRXN1和Shank3蛋白的mRNA表达均无显著性差异(P>0.05)。结论有氧运动、丰富环境及二者结合均可提高丙戊酸钠诱导的ASD模型大鼠的认知能力,一定程度纠正其异常行为,有氧运动结合丰富环境的干预效果优于单纯的有氧运动、单纯的有氧运动优于单纯的丰富环境。其作用机制可能与NRXN-NLGN-SHANK通路有关。

摘要: 目的探讨脑蛋白水解液(CHI)对七氟醚麻醉导致的大鼠学习记忆障碍的影响,并分析其可能作用机制。方法将32只大鼠随机分为七氟醚组、CHI高剂量组、CHI低剂量组和对照组,每组8只。七氟醚组吸入2%七氟醚,每天2 h,连续7 d,CHI高剂量组每天吸入七氟醚之前,尾静脉注射脑蛋白水解液1 200μL,CHI低剂量组每天吸入七氟醚之前,尾静脉注射脑蛋白水解液300μL。对照组不吸入七氟醚,尾静脉注射生理盐水。通过水迷宫实验记录大鼠学习记忆能力; HE染色法观察各组大鼠海马组织病理学改变; ELISA检测各组大鼠海马组织中MDA、SOD水平; TUNEL检测各组大鼠海马神经元细胞凋亡情况; RT-qPCR检测各组海马组织中SYT1 mRNA表达情况;Western blot检测各组大鼠海马组织中SYT1、Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase3蛋白表达情况。结果与对照组相比,七氟醚组大鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.05),穿越平台次数显著减少(P<0.05),平台停留时间显著缩短(P<0.05),海马组织神经元细胞排列散乱,边界不清,细胞核固缩,出现空泡,着色较深,海马组织神经元细胞凋亡率显著升高(P<0.05),MDA、Bax、cleaved-Caspase3蛋白含量显著升高(P<0.05),SOD、Bcl-2、SYT1 mRNA和蛋白含量显著下降(P<0.05);与七氟醚组比,CHI高剂量组大鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),穿越平台次数显著增加(P<0.05),平台停留时间显著延长(P<0.05),海马组织神经元细胞排列相对紧密,胞核固缩和空泡现象得到改善,海马组织神经元细胞凋亡率显著下降(P<0.05),MDA、Bax、cleaved-Caspase3蛋白含量显著下降(P<0.05),SOD、Bcl-2、SYT1mRNA和蛋白含量显著升高(P <0.05);而CHI低剂量组大鼠各项指标与模型组比并无显著改善(P> 0.05)。结论七氟醚吸入前预先给予高剂量CHI能够改善七氟醚麻醉导致的大鼠学习记忆障碍,其机制可能与降低氧化应激损伤,抑制海马神经元细胞凋亡和增加SYT1表达有关。

摘要: 目的 比较不同固定液对光镜下金黄地鼠海马体神经元的影响，为金黄地鼠海马体神经元固定液的选择提供参考。方法 将21只11周龄雄性SPF级金黄地鼠随机分为7组，分别使用4%多聚甲醛、10%中性甲醛、Bouin’s、Carnoy、Davidson’s、Zenker、Helly溶液进行心脏灌注，剥离脑壳取出完整大脑，在对应的固定液中固定48 h,并制作成石蜡切片，经HE染色后在光镜下观察海马体神经元的形态特征。通过匈牙利3DHISTECH公司数字切片扫描系统测量尺测量神经元细胞直径，比较固定液对细胞收缩的影响。结果 4%多聚甲醛、10%中性甲醛、Bouin’s溶液展现了良好的固定效果，固定后的大脑硬度适中，HE染色后的切片着色适中、色泽鲜艳、神经元各种细胞形态对比清晰，4%多聚甲醛因固定后切片无龟裂而更为理想。不同固定液固定后的海马体神经元存在细胞收缩方面的极显著差异(P<0.01),使用Carnoy、Davidson’s固定后的神经元各种细胞收缩最严重。结论 4%多聚甲醛、10%中性甲醛、Bouin’s溶液是金黄地鼠海马体神经元较为理想的固定液，4%多聚甲醛溶液建议作为首选。