摘要: 为探究海马齿高盐环境耐受性的分子机制,根据海马齿c DNA文库序列设计引物,采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术克隆得到海马齿小分子热激蛋白Sp Hsp18.1基因序列.Blast分析表明,该c DNA序列(968 bp)含完整开放阅读框(ORF)全长为489 bp,编码162个氨基酸.等电点(p I)为6.19,分子量(Mr)大小为1860 5.90.Sp HSP18.1编码氨基酸序列具有分子伴侣蛋白特有的ACD保守区域(Alpha crystallin domain),与拟南芥、西瓜等植物的细胞质I型小热激蛋白具较高同源性(>75%).将Sp Hsp18.1基因克隆到PUCm-T原核表达载体上,得到重组菌株,通过过量表达探究其耐热胁迫能力.结果表明,在37℃下重组菌株与野生型菌株的生长曲线基本相似,但在高温(45℃)下,重组菌株较对照组菌株存活率有显著提高.荧光实时定量PCR分析表明,在不同浓度海水培养条件下,海马齿根部均表达Sp Hsp18.1基因,且随着海水浓度的增加,该基因的表达量呈现上升的趋势.说明Sp Hsp18.1基因在海马齿应答高盐胁迫过程中起到一定的作用.

摘要: 许多证据表明早期生活应激会影响动物成年后的行为和神经化学改变,然而该过程的机制还不完全清楚。脑源性神经营养因子(BDNF)、催产素(OT)和糖皮质激素受体(GR)参与对应激的神经适应性反应。本实验将出生3 d后的雌性ICR小鼠幼仔每日隔离3 h直至出生21 d,在60日龄时检测其焦虑水平、社会行为及血清中皮质酮(CORT)和OT的水平,同时检测了中枢BDNF、OT和GR的阳性神经元表达。结果表明,与对照组相比,早期隔离组小鼠的焦虑水平增加,运动性和社会行为减少,同时血清中CORT水平上升、海马CA1和CA2/3区的BDNF及GR的阳性神经元表达下降,下丘脑室旁核和视上核的OT阳性神经元表达减少。这些结果表明,早期社会隔离下调了BDNF、OT和GR的水平,并通过调制应激系统影响雌性ICR小鼠的情绪与社会行为。

摘要: 为探明高温胁迫对膨腹海马（Hippocampus abdominalis）幼苗的影响，对20日龄幼苗进行24 h急性高温胁迫，测定其在不同温度和时间下的存活率及抗氧化酶活性。将幼苗从18℃直接转移到22、24、25、26、27、28和30℃，每隔2 h观察死亡数和行为状态，构建时间-温度-存活率模型。通过Probit回归分析，得出高起始致死温度（24 h-UILT50）。根据高起始致死温度结果，将幼苗从18℃直接转移到21、24和27℃，持续胁迫24 h，分别在应激0、3、6、12和24 h取样，用生化试剂盒测定不同温度和不同时间点的抗氧化酶活性。结果显示，膨腹海马幼苗的存活率随水温的升高不断降低，其高起始致死温度为27.53℃。在24 h急性高温胁迫过程中，21℃和24℃下超氧化物歧化酶（SOD）及过氧化氢酶（CAT）活性随着时间呈现先降后升的趋势；27℃下，超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性均呈升高趋势，24 h时显著高于对照组（18℃组）（P <0.05）。各温度组总抗氧化能力（T-AOC）的活性随时间均表现出升高-降低-升高的变化，且活性在12h时均降至最低。所有处理组丙二醛（MDA）的含量随时间均呈现升高的趋势，但24℃处理组于胁迫6 h后开始降低。实验表明，急性高温胁迫使膨腹海马幼苗抗氧化酶活性产生了显著变化，其体内抗氧化酶活性被激活用于消除高温应激产生的活性氧自由基（ROS），幼苗体内丙二醛含量显著增加，表明膨腹海马幼苗仍处于氧化应激状态。27℃处理组抗氧化酶活性变化趋势与其余温度处理组间均存在明显差异，表明膨腹海马幼苗无法适应27℃的高温。

摘要: 文章以大海马(Hippocampus kuda)为研究对象,分别设置2个光周期(L﹕D=16﹕8、L﹕D=12﹕12)和2个投饵时间策略(开灯后2h、关灯前2h),分析大海马的生物钟系统之间及生物钟与脂类代谢之间的关系,探究大海马人工养殖的适宜环境条件及其体内重要脂类物质的合成代谢条件。结果表明:在所有组别中,检测的7个钟基因中有6个基因(Clock、Bmal1、Per1、Per2、Per3和Cry1)在大海马的脑和肝脏中都有明显的节律性表达,说明生物钟基因表达与光有较密切的关系。其中,大海马在长光亮期(16﹕8)及开灯后2h投喂的条件下,其脑中的中枢钟基因与肝脏中的外周钟基因间的协同性最佳,表明该条件对大海马生长较为有利。此外,大海马肝脏中8个脂类代谢相关基因(Hmgcr、Mvk、Mvd、Lss、Fdps、Cetp、Scap、Srebp1)在开灯后2h投喂的2个组别中都呈现了节律性表达,而在关灯前2h投喂的2个组别中仅Hmgcr、Mvk、Scap、Srebp1等4个基因(L﹕D=16﹕8)和Hmgcr、Mvk、Scap、Mvd、Srebp1等5个基因(L﹕D=12﹕12)有明显节律性表达,说明脂类代谢相关基因的表达与光影响并不非常密切,大部分基因的表达受到了投喂时间的影响。总之,实验证实了大海马中存在有完整的生物钟系统,该生物钟系统与脂类代谢间存在紧密的联系。通过光和投喂时间的综合分析,初步推断大海马养殖的适宜条件为长光亮周期及在有光时及时给饵(开灯后2h内),该条件下能促使大海马的钟基因与代谢基因都呈现稳定的节律性表达,且中枢钟系统与外周钟系统间的协同性达到最佳。同时,也能较好地促进脂类物质的代谢合成和积累。

摘要: 目的研究两种常用麻醉剂戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯对小鼠海马CA1区神经元电活动的影响,探讨在麻醉剂作用前后,小鼠海马脑区场电位和神经元放电变化的活动规律。方法运用多通道在体记录技术,分别在5只雄性C57BL小鼠双侧海马CA1区植入12组金属电极,并记录麻醉过程中海马CA1区单个神经元的放电活动以及相应脑区场电位的活动状况,并加以分析。结果(1)戊巴比妥钠和氨基甲酸乙酯麻醉作用过程中,小鼠海马CA1区脑电场电位变化有明显特征。(2)海马CA1区神经元在不同麻醉剂作用下放电频率变化具有规律性。结论小鼠海马CA1区脑电场电位在不同麻醉剂作用下有不同的变化规律,不同类型的神经元在不同麻醉剂的作用下其放电频率的变化也有所不同,提示不同麻醉剂对海马神经元的电活动有不同的作用机制。