摘要: 采用体外暴露染毒法,研究了不同浓度与时间条件下,镉诱导河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)金属硫蛋白(metallothionein,MT)在肝胰腺、肌肉、鳃和卵巢中的表达差异。镉浓度分别为0、14·5mg/L、29mg/L和58mg/L;处理时间依次为1d、3d和5d。利用镉血红蛋白饱和法和火焰原子吸收分光光度法(AAS)测定MT的蛋白含量。结果显示,用不同的染毒浓度和处理时间,镉在组织中诱导产生MT的含量有较大差异,其中肝胰腺MT的诱导量最大,变化规律也最明显;肌肉中也有较大量MT的表达;而鳃和卵巢MT的诱导量均较低。此外,本文分析了镉的浓度与时间梯度对诱导MT表达的影响与毒性效应机制。结论:组织不同,染毒浓度及时间不同,镉诱导MT的表达也不同,具有一定的组织差异性和规律性。

摘要: 随着现代工业化的发展,重金属对水生生物的毒性影响已经引起了广泛的关注[1,2]。其中,镉作为一种广泛存在的重金属污染物,具有一定的生殖毒性。研究发现,雄性生殖系统是其作用的重要靶器官,镉对精巢[3]、精子的运动能力、成活率和受精能力[4]均能产生影响。副性腺是溪蟹雄性生殖系统的重要组成部分[5]。关于副性腺的研究主要集中在昆虫[6,7]和哺乳动物类[8—10]。关于甲壳动物中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)副性腺的研究结果表

摘要: 为了探究镉对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)的卵子发生的影响,通过凝胶过滤层析法纯化了成熟卵巢中的卵黄磷蛋白(Vitellin,Vn),采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳确定了Vn亚基数量及分子量,以纯化的Vn为抗原制备了Vn多克隆抗血清并建立了可靠的Vn含量测定的ELISA方法。采用氯化镉体外亚慢性染毒的方法,运用Vn-ELISA方法检测镉暴露对卵巢组织中Vn含量的影响。实验设对照组和5.8 mg/L镉处理组,处理时间分别为10、15和20d。结果显示,(1)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明该蛋白由分子量为102、84和70 k D的3个亚基组成,同时Western-blotting检测表明,抗血清对该蛋白具有较强的免疫特异性;(2)在Vn-ELISA中,Vn抗体最佳稀释倍数为1︰100000,该方法的工作浓度范围为125—2000 ng/m L,定性检测的灵敏度可达到15.62 ng/m L;卵巢中Vn含量测定的结果中各批次间没有显著差异,且平均变异系数分别仅为7.81%,表示该法具有较高的稳定性和重复性;(3)镉引起卵巢组织中Vn含量的显著降低,与镉处理时间具有时间-效应关系,说明了镉暴露可影响河南华溪蟹卵母细胞的成熟并对卵子发生产生抑制作用,进而影响卵巢的正常发育。

摘要: C型凝集素是一类可以和糖类结合的蛋白质,是先天性免疫系统中重要的模式识别受体。其中,经典C型凝集素依赖Ca~(2+)对糖类进行识别。Ca~(2+)可作为细胞内第二信使,参与多种信息传递。而重金属镉可导致细胞钙稳态失调,干扰细胞内与Ca~(2+)相关的信息传递。研究旨在探明镉胁迫对河南华溪蟹(Sinopotamonhenanense) ShLec21和ShLec23两种C型凝集素免疫应答的影响。利用RACE方法,克隆了ShLec21和ShLec23,并进行了系统进化分析;利用实时荧光定量PCR的方法,研究了ShLec21和ShLec23的组织表达模式和镉联合嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)胁迫后肝胰腺和血淋巴中ShLec21和ShLec23表达模式。结果显示:ShLec21 cDNA全长863 bp,编码152个氨基酸残基;ShLec23 cDNA全长681 bp,编码164个氨基酸残基。ShLec21和ShLec23分别聚类为无脊椎动物的两个分支。ShLec21和ShLec23在血淋巴、鳃、肝胰腺、肠道、肌肉、卵巢和精巢中表达广泛,但二者均主要在肝胰腺中表达。在胁迫条件下,单独镉胁迫对肝胰腺和血淋巴中ShLec21和ShLec23表达量无显著影响;在单独嗜水气单胞菌感染后,肝胰腺中ShLec21和ShLec23表达量分别显著(P<0.05)与极显著(P<0.01)下调,血淋巴中ShLec23表达量显著(P<0.05)下调;而在镉胁迫后嗜水气单胞菌感染过程中,ShLec21和ShLec23表达量在肝胰腺和血淋巴中显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调。研究结果表明,河南华溪蟹ShLec21和ShLec23在响应嗜水气单胞菌感染过程中的表达,在一定程度上能够被镉胁迫所上调。

摘要: 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法,研究了5种浓度的镉(Cd:7.25,14.5,29,58,116mg/L)对河南华溪蟹(Sinopotamonhenanense)肝胰腺、鳃和心脏中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)同工酶的影响。结果显示,在实验剂量范围内,随着Cd浓度的增加,肝胰腺和鳃中SOD同工酶和POD同工酶有显著的变化,包括新酶带的出现和酶带强度的变化.Cd对肝胰腺和鳃中SOD同工酶具有明显的激活效应,但是对POD同工酶却有抑制作用.Cd对心脏中SOD同工酶的影响不明显,基本没有变化,但却可以抑制POD同工酶的相对活性,包括酶带数和酶带强度的变化.表明SOD和POD同工酶的变化可以灵敏地反映Cd对河南华溪蟹的胁迫程度及毒性大小.