摘要: 【目的】明确棉铃虫Helicoverpa armigera感染棉铃虫核型多角体病毒H. armigera nucleopolyhedrovirus(HearNPV)后显著上调表达的肠粘蛋白基因HaIIM5AC在抵御病毒侵染过程中的功能。【方法】基于本实验室前期测定的健康及感病棉铃虫幼虫转录组数据，筛选出HearNPV感染后棉铃虫幼虫中显著上调表达的HaIIM基因，通过实时荧光定量PCR(qPCR)技术分析其在健康和感病24、48、72和96 h幼虫中肠的表达水平，利用dsRNA注射法干扰感病幼虫的HaIIM5AC基因，统计感病幼虫的死亡速率并利用qPCR技术检测病毒量，利用石蜡切片和苏木素伊红染色观察围食膜形态，探究该基因在抵御HearNPV病毒侵染过程中的功能。【结果】比较健康和感病棉铃虫幼虫肠道转录组差异基因，筛选出感病后24及48 h表达量均显著上调（P<0.001）的肠粘蛋白HaIIM5AC基因。qPCR结果表明，与健康幼虫相比，感病幼虫中肠HaIIM5AC表达量在所有时间点均显著上调（24 hpi:P<0.001; 48 hpi:P<0.001; 72 hpi:P<0.01; 96 hpi:P<0.001）。RNAi实验结果表明，注射ds HaIIM5AC 24和48 h后，HaIIM5AC的表达量分别下调54.72%和43.48%。在幼虫中沉默HaIIM5AC后，感病幼虫的死亡速率显著加快（P<0.05），病毒复制量显著增多（P<0.001），中肠围食膜结构明显破损。【结论】HaIIM5AC基因通过维持围食膜完整性来抵御HearNPV的侵染，其在棉铃虫抗病毒感染的物理免疫方面发挥重要作用。

摘要: 【目的】玉米耕作模式的转变使得伏马毒素B₁在玉米组织中积累，棉铃虫Helicoverpa armigera在取食玉米时便会摄入伏马毒素B₁，但这对棉铃虫的抗药性有何影响未见报道。近年来，棉铃虫对高效氯氟氰菊酯的抗药性逐年升高，这是否与棉铃虫取食伏马毒素B₁有关尚不得知。本研究将以此为目的展开探讨，明确棉铃虫对高效氯氟氰菊酯抗药性升高的原因，为害虫抗药性产生提供新思路。【方法】在棉铃虫饲料中添加伏马毒素B₁，测定了伏马毒素B₁对棉铃虫抗药性的影响，通过转录组测序和RNAi技术鉴定了关键解毒基因，利用RT-qPCR验证了伏马毒素B₁和高效氯氟氰菊酯对解毒基因表达量的影响。【结果】取食0.01和0.1 mg/kg伏马毒素B₁后，高效氯氟氰菊酯对棉铃虫的LC₅₀值分别为对照组的1.31和1.43倍；转录组测序鉴定到关键解毒基因HaCYP6AE19，在沉默HaCYP6AE19后，高效氯氟氰菊酯对棉铃虫的LC₅₀值为对照组的2.59倍；在伏马毒素B₁和高效氯氟氰菊酯胁迫下，1 d后，HaCYP6AE19表达量无明显变化（P>0.05）,2 d后，表达量分别为对照组的4.44（P<0.01）和2.39倍（P<0.05）,3 d后，表达量分别为对照组的5.27（P<0.01）和6.25倍（P<0.01）。【结论】摄入伏马毒素B₁后，棉铃虫解毒基因HaCYP6AE19过度表达，进而增强了棉铃虫对高效氯氟氰菊酯的抗药性。

摘要: 【目的】探究圆褐固氮菌Azotobacter chroococcum调控转Bt棉花的靶标抗虫效果。【方法】采用浸种包衣法，对Bt棉（Bt）和非抗虫亲本（Yu）进行圆褐固氮菌处理（AC）和固氮菌培养液对照处理（CK），测定不同处理棉花叶片的Bt蛋白表达量和氮代谢生理，以及取食不同处理棉花叶片后靶标害虫棉铃虫Helicoverpaarmigera的生长发育、繁殖和营养利用等变化。【结果】相较于固氮菌培养液对照处理，圆褐固氮菌处理的棉花叶片中Bt蛋白表达（Bt:+26.73%）、可溶性蛋白含量（Bt:+17.69%;Yu:+6.16%）和谷氨酸丙酮酸转氨酶活性（Bt:+72.64%;Yu:+60.27%）均显著增加（P <0.01），游离氨基酸含量（Bt：﹣0.90%;Yu：﹣5.80%）和蛋白酶活性显著降低（Bt：﹣1.83%;Yu：﹣4.06%）(P≤0.001)。相较于固氮菌培养液对照处理，圆褐固氮菌处理的Bt棉叶棉铃虫的幼虫历期（+11.57%）、蛹期（+1.03%）、相对消耗率（+6.07%）和近似消化率（+4.17%）呈现显著增加（P<0.05），其成虫寿命（﹣4.09%）、化蛹率（﹣46.09%）、蛹重（﹣21.09%）、单雌产卵量（-59.86%）、内禀增长率（﹣9.31%）、相对生长率（﹣4.26%）、净转化率（﹣5.82%）和毛转化率（﹣5.51%）有显著下降（P<0.05），而取食圆褐固氮菌处理非抗虫亲本棉叶的棉铃虫生长发育、繁殖及取食营养利用则呈现相反规律性。【结论】接种圆褐固氮菌可提高棉花的氮素利用效率和Bt棉毒蛋白的表达，进而提升其对靶标害虫棉铃虫的抗虫能力。

摘要: 【目的】明确棉铃虫Helicoverpa armigera人工饲料中不同防腐剂对其生长发育和繁殖的影响，为实验室大规模饲养棉铃虫提供依据。【方法】将田间采集的棉铃虫成虫所产子代，分别用含有防腐剂0.16%山梨酸（饲料1）、0.16%山梨酸和0.09%甲醛（饲料2）、0.16%山梨酸和0.25%尼泊金甲酯（饲料3）的人工饲料连续饲养3代，测定不同世代棉铃虫的幼虫发育历期、蛹期、蛹重、化蛹率、成虫寿命和产卵量等发育指标。【结果】3种不同防腐剂配方的人工饲料对棉铃虫幼虫发育历期、化蛹率和蛹重影响显著，其中F₁代取食饲料2的幼虫发育历期为14.50 d，显著短于饲喂饲料3（15.31 d）(F_2,337=4.354,P<0.05),F₂、F₃代不同饲料间幼虫发育历期差异均不显著（P>0.05）；饲料2饲养的3个世代棉铃虫幼虫化蛹率分别为83.33%、82.67%、90.67%，均显著高于饲料1和饲料3(F₁代：F_2,6=40.923,P<0.05,F₂代：F_2,6=6.454,P<0.05,F₃代：F_2,6=66.20,P<0.05)；在F₂、F₃代，棉铃虫取食不同饲料对雌蛹重影响显著(F₂代：F_2,163=13.146,P<0.05,F₃代：F_2,163=7.207,P<0.05)，而对羽化率、产卵量和子代卵孵化率等无显著影响（P>0.05）。【结论】饲料2使用山梨酸和甲醛作为人工饲料防腐剂，能显著降低棉铃虫幼虫死亡率，获得成虫数量最多，且成虫繁殖力高，更适合棉铃虫的大量饲养。

摘要: 【目的】胡椒属植物具有拒绝多食性棉铃虫Helicoverpa armigera取食的共性特征。多食性昆虫味觉系统的可塑性比狭食性种类的更强，本研究以前者为靶标筛选拒食剂，有望兼治同域并发的其他狭食性害虫种类。【方法】采用生物测定追踪的柱层析分离和气相色谱-质谱联用技术，鉴定了黑胡椒和花椒活性柱层析馏分中的主要物质，并测试了来源于黑胡椒和花椒的2种酰胺类生物碱对夏玉米上生态位不同的4种鳞翅目幼虫（棉铃虫、甜菜夜蛾Spodoptera exigua、粘虫Mythimna separata及二点委夜蛾Athetis lepigone）的拒食活性。【结果】黑胡椒活性柱层析馏分中的酰胺类生物碱主要是胡椒碱（6.22%）；花椒活性柱层析馏分中的酰胺类生物碱主要是山椒醇的各种异构体，共占8.32%。胡椒碱对4种鳞翅目幼虫的拒食活性普遍比山椒醇更强(胡椒碱对棉铃虫：t₂₇=4.92,P?0.000 1；胡椒碱对甜菜夜蛾t₁₉=6.11,P?0.000 1；胡椒碱对粘虫：t₁₅=9.15,P?0.000 1；胡椒碱对二点委夜蛾：t₁₄=6.06,P?0.000 1)。就种间比较来看，粘虫和二点委夜蛾对胡椒碱反应最敏感，棉铃虫反应最不敏感，山椒醇仅对甜菜夜蛾幼虫有拒食活性。【结论】胡椒碱有望成为夏玉米田鳞翅目害虫幼虫广谱性拒食剂研发的基本母核结构，结合研究结果讨论了胡椒属植物酰胺类生物碱的生态学意义和作用机制。