摘要: Sharpe-Schoolfield-Ikemoto(SSI)模型是用来描述温度对昆虫发育速率影响的一个重要数学方程,它既能够很好地拟合温发育速率的数据,又能提供若干个重要温参数,特别是内禀最适发育温度(TΦ)。此温度反映了昆虫生存的最佳温环境。然而,由于SSI模型的参数过多,结构显得较为复杂,给实际的数据拟合带来了困难。一个基于R平台的软件包已经被开发出来,专门用于执行SSI模型的参数拟合。但目前由于国内许多研究者青睐于使用SAS统计软件,所以本文提供了一个基于SAS统计软件的程序,用以快速拟合SSI模型的参数。通过拟合棉铃虫Helicoverpa armigera Hübner蛹期的温发育速率数据,发现此SAS程序具有很好的拟合效果,同时进一步证明了SSI模型对描述温度对昆虫发育速率影响的有效性。

摘要: 【目的】以抗性棉铃虫Helicoverpa armigera体内发现的一种基因重组导致的嵌合型P450酶CYP337B3作为研究对象,通过基因克隆、体外重组表达、蛋白质结晶等技术手段,获得CYP337B3(△23)的晶体结构,为深入了解棉铃虫P450酶CYP337B3的结构与功能奠定基础。【方法】对CYP337B3编码基因进行了密码子优化,通过基因重组,将其转化至BL21(DE3)感受态细胞中进行原核表达尝试,通过亲和层析及RESOURCETM Q离子交换层析对CYP337B3(△23)进行体外纯化,利用气相悬滴结晶方法对CYP337B3(△23)进行结晶条件的筛选及X射线晶体衍射。【结果】通过密码子优化,实现了CYP337B3(△23)在大肠杆菌原核表达系统内的大量表达,经过体外纯化及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,CYP337B3(△23)蛋白纯度可达到95%左右,我们对CYP337B3(△23)进行了蛋白结晶条件的筛选,最终获得了CYP337B3(△23)的结晶条件和蛋白晶体。【结论】本文利用气相悬滴结晶方法获得了CYP337B3(△23)的蛋白晶体,为今后CYP337B3的三维结构解析、功能研究以及最终阐述该种新型的棉铃虫抗药机制奠定了良好的基础。

摘要: 【目的】鳞翅目昆虫具有较强的飞行能力,远距离迁飞是其区域性灾变的生物学基础。翅的力学性能决定昆虫的飞行效率和迁飞距离,由于翅型、尺寸和组成结构等因素的限制,对昆虫翅膀力学参数的测试一直缺乏行之有效的技术手段。【方法】本研究采用纳米压入技术测试了棉铃虫Helicoverpa armigera、小地老虎Agrotis ypsilon和黄地老虎Agrotis segetum成虫翅膀的力学参数。【结果】动态压入和准静态压入两种测试方法均具有空间分辨率高、数据可靠性强等优点,且具有较好的可操作性和可重复性。【结论】纳米压入技术可准确测量鳞翅目昆虫翅膀的各项力学性能参数,为深入研究昆虫远距离迁飞的空气动力学机制提供了技术支撑。

摘要: 比较了棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)围食膜不同处理方法,不同围食膜数量,在不同电泳下的分离效果,筛选最佳的围食膜蛋白分离技术。结果表明:冷冻干燥与非冷冻干燥处理围食膜后进行SDS-PAGE电泳分离效果基本相同,建议使用冷冻干燥后处理较好。取1、3、5条围食膜进行SDS-PAGE电泳,都能将围食膜蛋白分离,且分离效果基本一致,建议5条围食膜最合适,具有可靠性和代表性。浓缩胶为5%、分离胶分别为8%、10%和12%时棉铃虫围食膜的SDS-PAGE电泳分离效果差异不大,而分离胶为12%时效果较好。无水三氟利克酸处理围食膜后进行NuPAGE电泳,分离出的围食膜蛋白大约30多种,远远超过上述方法分离的1620种,且需要的围食膜材料少,分离效果最佳,但费用高。

摘要: 为研究羧酸酯酶(carboxylesterase,COE)在棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)触角中的生理功能,采用RT-PCR、RACE方法从棉铃虫雄蛾触角中克隆得到一条COE基因全长序列(GenBank No.JX306730),命名为HaCXE6。HaCXE6基因读码框1 623 bp,编码540个氨基酸,预测蛋白质分子量61.02 ku,等电点8.06。氨基酸序列比对分析表明,HaCXE6与海灰翅夜蛾Spodoptera littoralis触角羧酸酯酶CXE6一致性最高,为68%;棉铃虫不同功能羧酸酯酶聚类分析显示HaCXE6与气味降解酶CCE006a最相近。与其它昆虫触角羧酸酯酶多序列比对分析发现,HaCXE6具有酯酶活性必须的催化残基Ser199,Glu323,His434,也保持着α/β-酯酶家族的特征基序Gly-xSer-x-Gly。不同组织和发育时期该基因荧光定量PCR分析结果表明,HaCXE6在雌、雄蛾各个部位均有表达,雌蛾腹部与雄蛾足中表达量最高;卵至成虫各个时期均有表达,蛹中表达量最高。