摘要: 【目的】筛选适合我国梨小食心虫Grapholita molesta种群遗传学研究的微卫星位点,并依据所筛选的微卫星位点进行梨小食心虫地理种群的遗传多样性分析。【方法】利用欧洲梨小食心虫和苹果蠹蛾Cydia pomonella种群中已报道的11个微卫星位点,分析各位点在我国12个种群257头梨小食心虫样本中的扩增稳定性,再进行其多态性分析,筛选适合的位点,然后进行种群遗传多态性分析。【结果】在分析的11个微卫星位点中,位点Gm01,Gm03,Gm04和Cyd15无法稳定扩增;位点Gm05扩增成功率较低,位点Gm07遗传多态性较低;而位点Gm02,Gm06,Gm08,Gm09和Gm10等扩增效果稳定且遗传多态性丰富。这5个稳定扩增的微卫星位点平均等位基因数量(NA)为7.41712.500,平均观察杂合度(Ho)为0.3660.655,平均期望杂合度(He)为0.6420.846,多态信息含量(PIC)为0.8000.935。【结论】本研究成功筛选出位点Gm02,Gm06,Gm08,Gm09和Gm10等5个微卫星位点。基于这5个微卫星位点标记的结果显示,山东和陕西不同梨小食心虫地理种群均具有丰富的遗传多样性。这5个位点可以适用于我国梨小食心虫种群的进一步遗传分析研究。

摘要: 【目的】探明梨小食心虫Grapholita molesta(Busck)在果园中的越冬场所及越冬幼虫与越冬代成虫发生的关系,为更好地防治梨小食心虫提供科学依据。【方法】选取山东省不同地区(济南、泰安、肥城、广饶、莱芜)6个代表性的果园进行系统调查,刮树皮调查记录梨小食心虫越冬幼虫在树体上的分布和存活情况,利用封闭纱网调查土壤中梨小食心虫越冬幼虫数量,同时利用性诱集和糖醋液对越冬代成虫发生量进行监测,分析同园越冬幼虫与成虫发生的关系。【结果】梨小食心虫幼虫平均越冬成活率高达62.99%;不同果园间梨小食心虫的越冬幼虫数量差异显著(P<0.001)。越冬场所选择更倾向于树体下部(45.10%)和中部(46.28%)以及相应的主干(28.48%)和主枝(44.24%),而位于树体上部(8.62%)及相应的侧枝(27.28%)的相对较少;对树枝方位的选择没有显著差异(P>0.05)(东27.57%,西26.13%,南23.76%,北22.54%)。同园越冬幼虫数量与越冬代成虫诱集数量无显著相关性。【结论】梨小食心虫以老熟幼虫在果树中、下部主干和主枝及树干周围的土壤中越冬。梨小食心虫在果园调查获得的越冬幼虫数量不能作为该果园翌年越冬代成虫发生和防治的依据,发生危害情况还需根据周围环境情况做综合考虑。

摘要: 【目的】梨小食心虫Grapholita molesta(Busck)(鳞翅目:卷蛾科)是一种世界性的害虫,能使蔷薇科的果树严重减产。本研究旨在评估此害虫的耐热性及适应性。【方法】将梨小食心虫成虫暴露在不同温度(36,38,40,42,44和46℃)和不同暴露时间(0.5,1,2,4和8 h)下,测定其存活率以及短期高温(38或40℃热驯化1 h)对其热耐受力、寿命、生殖力及卵孵化率的影响。【结果】随着高温暴露时间的延长,梨小食心虫成虫存活率下降。在38或40℃热驯化1 h后,能显著提高梨小食心虫成虫在42℃下2 h的存活率(P<0.05)。在41℃处理1 h,梨小食心虫出现热休克现象,其寿命显著延长,但产卵量显著下降。进一步的试验证明雄虫受高温影响较大,导致与其配对后的雌虫产卵量降低。然而,不论亲代受到怎样的热刺激,其后代的孵化率均不受影响。【结论】结果说明,超过41℃,1 h的高温能对梨小食心虫带来负面影响,但梨小食心虫成虫有适应高温的潜力。

摘要: 【目的】为了更好地了解昆虫气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在梨小食心虫Grapholita molesta(Busck)嗅觉识别中的作用,并明确其与寄主挥发物的结合特性。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆梨小食心虫OBP基因;采用RT-PCR和实时定量PCR对该基因在成虫不同组织和羽化后不同日龄成虫中的表达情况进行了测定;以N-phenyl-1-naphthylamine(1-NPN)为荧光探针,采用荧光竞争结合试验对GmolOBP3蛋白的结合特性进行了分析。【结果】得到梨小食心虫一个新的气味结合蛋白基因,命名为GmolOBP3(GenBank登录号:KF395363)。GmolOBP3开放阅读框全长492 bp,编码163个氨基酸残基,预测分子量和等电点分别为18.72 kDa和4.93,呈酸性,具有典型的6个半胱氨酸位点。GmolOBP3在雌、雄成虫触角和腹部均有表达,成虫在羽化后5 d内,雌蛾触角中GmolOBP3表达量随羽化后日龄而增加,但雄蛾在羽化后第5天触角中GmolOBP3表达量显著降低。通过构建GmolOBP3原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中诱导表达并获得了GmolOBP3重组蛋白。荧光竞争结合实验对GmolOBP3蛋白与16种寄主挥发物及4种性信息素类似物的结合力发现,在供试的4种梨小食心虫性信息素类似物中,GmolOBP3蛋白与反-8-十二碳烯醋酸酯和十二烷-1-醇不结合,而与顺-8-十二碳烯醋酸酯和顺-8-十二碳烯醇结合,但结合力较弱,结合常数分别为83.00和103.70μmol/L;与16种寄主挥发物结合能力也不强,其中结合最强的是β-紫罗酮,结合常数为49.36μmol/L。【结论】由此推断,GmolOBP3具有选择性识别和结合各种配基的特性。

摘要: 【目的】为明确梨小食心虫Grapholita molesta自然种群与室内继代饲养种群生物学特性的差异,以期为梨小食心虫的人工饲养以及测报与防治提供理论依据。【方法】本研究对室内继代饲养的和从田间采集的梨小食心虫,在室内同等条件下饲养,较系统地观察两者的生物学特性并对其主要生命表参数进行了比较。【结果】在本试验条件下,梨小食心虫室内继代饲养种群的蛹期极显著长于自然种群(t=-10.78,df=4,P=0.0004);卵期、幼虫期以及预蛹期均稍长于自然种群,但无显著差异。室内继代饲养种群的幼虫存活率、化蛹率、羽化率极显著高于自然种群(存活率:t=-7.61,df=4,P=0.0016;化蛹率:t=-24.32,df=4,P=0.0017;羽化率:t=-6.96,df=4,P=0.0022);两个种群的卵孵化率、蛹重、成虫寿命、产卵前期、产卵期及单雌产卵量均无显著差异。自然种群蛀果率高于室内继代饲养种群,但差异不显著。生命表分析表明,梨小食心虫室内继代饲养种群的种群趋势指数I、净增殖率R0、内禀增长率rm、平均世代周期T、周限增长率λ均极显著高于自然种群(I:t=-12.20,df=4,P=0.0003;R0:t=-11.72,df=4,P=0.0003;rm:t=-9.77,df=4,P=0.0006;T:t=-12.05,df=4,P=0.0003;λ:t=-9.79,df=4,P=0.0006),种群加倍时间Dt极显著低于自然种群(t=7.17,df=4,P=0.0020)。【结论】室内继代饲养种群在室内连续饲养50多代后,与自然种群比较,不仅各生命表参数和钻蛀危害果实的能力没有下降,反而在与自然种群同等的室内饲养条件下,表现了更好的适应性,在本供试条件下,后代具有更大的种群增长潜力。所以,利用室内继代饲养种群进行的相关试验研究结果可以作为梨小食心虫预测预报与防治实践的依据。