摘要: 目的 观察6种常用实验动物心血管系统组织形态学结构的差异。方法 选取猕猴30只、昆明小鼠20只、SD大鼠20只、日本大耳白兔18只、比格犬16只、树鼩20只。除昆明小鼠采用颈椎脱臼致死外，其余动物经静脉麻醉后放血处死，行病理解剖完整取出心脏及部分血管，体积分数10%福尔马林固定，玻璃容器密闭保存。对心脏及血管进行病理大体检查和取材，常规病理HE制片及染色，同时行必要的特殊染色和免疫组化染色，显微镜下观察心脏及血管的组织结构和细胞结构异同。结果 (1)6种实验动物心脏结构无明显差异，唯有心肌细胞形态上有所差异;(2)6种实验动物心脏间质内胶原纤维沉积情况有差异;(3)6种实验动物的心肌纤维间营养血管分布情况有差异;(4)6种实验动物大动脉血管结构无明显差异，但中膜厚度及胶原纤维和弹性纤维含量有差异。结论 实验动物心血管系统的比较组织学研究结果为教学及科研工作提供参考;也为制定《实验动物病理检测标准》作基础并提供了相应的对照依据。

摘要: 在常规饲养5年的老龄雌性瑶山亚种树鼩中发现1例背腹部近髋关节处自发一大肿块。大体观察发现，该瘤体巨大，表面皮毛完整，未发生溃烂；该患病树鼩行动不便，精神状态尚可。异氟烷（2%～4%）吸入麻醉后，采血法安乐死，解剖剥离瘤体，肿瘤边界不清，向周围组织浸润。HE染色结果显示，肿瘤组织可见小灶多形性及大片脂肪母细胞，多形性肉瘤区域主要由异型的上皮样细胞组成，核分裂易见；脂肪母细胞大小显著不同，可见较多多形性脂肪母细胞，细胞体积大，核深染、畸形，边缘见压迹，胞质见多泡状脂滴。免疫组织化学染色结果显示，肿瘤细胞vimentin阳性，小灶多形性脂肪母细胞S-100阳性，Ki-67较高比例阳性。结合HE染色及免疫组织化学结果，综合诊断该例树鼩的自发肿瘤为多形性脂肪肉瘤。

摘要: 目的 观察实验动物树鼩的原发性肿瘤，为研究毛发上皮瘤的发生机制及防治措施提供基础。方法 将常规自然饲养过程中发现胸腹部长有肿块的1例树鼩麻醉后，手术摘除肿块，肿块组织经石蜡切片后行HE染色及免疫组织化学染色，并对肿瘤细胞进行分离和传代培养。分离获得的肿瘤细胞接种至健康树鼩及裸小鼠皮下。每天观察1次肿瘤细胞的体内成瘤情况，裸小鼠连续观察2个月，树鼩观察6个月以上。结果 HE染色显示发病树鼩腹部肿块组织中真皮内基底样细胞整体排列似串花瓣样，形成巢状及条索状且边缘界限清晰的肿瘤；进一步放大倍数后观察发现肿瘤细胞呈栅栏状、基底状排列，核染色深，细胞质少。免疫组织化学染色显示，肿瘤细胞中CK蛋白强阳性表达，ki-67蛋白呈低比例阳性表达；肿瘤细胞间质中Vimentin强阳性表达，Bcl2和CD10呈低比例阳性表达。分离获得的肿瘤细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养液中生长良好，可传代培养。健康树鼩及裸小鼠皮下接种肿瘤细胞后，均未见肿瘤形成。结论 结合肿瘤发生部位、大体形态结构、病理切片HE染色及免疫组织化学结果，综合诊断该例树鼩胸腹部肿块为毛发上皮细胞瘤。

摘要: 目的建立树鼩脊髓来源的微血管内皮细胞体外分离培养技术,用7 1型肠道病毒(enterovirus 71,EV71)感染该细胞,探讨其感染特性,为EV71损伤中枢神经系统机制的研究提供基础。方法采用Ⅱ型胶原酶、分散酶、DNaseⅠ三酶联合两次消化树鼩脊髓组织后,获取微血管内皮细胞,并进行纯化和鉴定。用E V 7 1感染树鼩脊髓微血管内皮细胞,测定感染不同时间点的细胞及其培养上清液中病毒载量。采用间接免疫荧光法检测细胞中E V 7 1标志蛋白的表达,以确定EV71对树鼩脊髓微血管内皮细胞的感染性。结果分离培养获得的树鼩脊髓微血管内皮细胞呈典型的分支状和串珠状,经过嘌呤霉素纯化培养后的传代细胞主要是不规则的多角状细胞;细胞免疫荧光鉴定结果显示,微血管内皮细胞标志蛋白CD31和血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)表达都呈阳性。用感染复数为1的EV71感染树鼩脊髓微血管内皮细胞,可见典型的细胞病变,且病毒滴度可达3.2×106 TCID50/mL,表明EV71可成功感染树鼩脊髓微血管内皮细胞并有效增殖;而且在4 8 h内,细胞培养上清液中病毒载量呈线性升高,而细胞中病毒载量在12 h到达顶峰。间接免疫荧光法在EV71感染后12 h的树鼩脊髓微血管内皮细胞质中可检测到病毒颗粒。结论成功建立了树鼩脊髓微血管内皮细胞体外分离培养方法,确定了EV71对树鼩脊髓微血管内皮细胞的感染性和病毒增殖特性,为开展EV71入侵中枢神经系统的机制研究提供了一定基础。

摘要: 目的获取树鼩连接黏附分子A(junctional adhesion molecule A,JAM-A)的全长编码序列并进行分子特征分析,探讨JAM-A作为呼肠孤病毒受体入侵树鼩原代肺细胞的作用机制。方法提取健康树鼩组织总RNA,采用反转录PCR和cDNA末端快速克隆技术获取JAM-A基因;Unipro UGENE分析编码氨基酸,使用MEGA 6.0软件最大似然法构建系统发育树;实时荧光定量PCR检测JAM-A在树鼩25个组织和血液中的表达分布情况;于树鼩原代肺上皮细胞上进行受体的特异性抗体阻断处理,然后采用免疫荧光法观察病毒抗原对呼肠孤病毒感染的影响。结果获取了JAM-A基因cDNA全长序列,2 962 bp;系统发育树进化分析显示JAM-A基因与人的亲缘关系较啮齿类更近;JAM-A分子广泛表达于树鼩的外周组织,而在呼吸道和消化道表达水平更高。特异性抗体作用于细胞显著降低病毒抗原的免疫荧光积分吸光度值(P<0.000 1)。结论首次克隆并分析了JAM-A的基因序列,验证JAM-A分子是呼肠孤病毒入侵树鼩的主要受体,提示树鼩可作为一种新的呼肠孤病毒动物模型。