摘要: 目的探讨肠道病毒71型(EV71)对树鼩肾细胞的感染特性。方法通过组织块贴壁法分离培养树鼩原代肾细胞,观察细胞形态并进行传代培养,利用细胞角蛋白18对树鼩肾细胞进行间接免疫荧光鉴定。用EV71感染树鼩肾细胞,通过倒置显微镜观察细胞病变情况,结合间接免疫荧光实验观察细胞中病毒蛋白的表达情况,采用实时荧光定量PCR技术检测病毒载量,以Vero细胞为对照,研究EV71对树鼩肾细胞的感染情况。结果通过组织块贴壁法可以快速获得树鼢原代肾细胞,并可进行多次传代培养,细胞为梭形,贴壁呈铺路石状,免疫荧光鉴定为肾上皮细胞。EV71可以感染树鼩肾细胞,使之出现明显的细胞变圆、脱落或解体等病变,免疫荧光实验可以观察到病毒蛋白的分布,实时荧光定量PCR检测病毒载量最高可达10～5拷贝/mL,病变情况和增殖趋势与Vero细胞相似。结论 EV71可以体外感染树鼩肾细胞,该细胞模型可为EV71药物筛选和感染机制研究提供平台。

摘要: 目的 调查腹泻树鼩肠道中阿米巴原虫携带情况，查找可能导致树鼩腹泻的寄生虫类病原，为实验树鼩的寄生虫质量控制提供依据。方法 采集78只腹泻树鼩新鲜粪便和全血，分离血清，其中野生来源样本45份，人工繁育样本33份。分别采用生理盐水涂片法、碘液染色法进行阿米巴原虫形态学检测，采用ELISA方法进行粪便中阿米巴抗原和血清中IgG抗体检测。结果 形态学镜检结果显示，野生来源和人工繁育腹泻树鼩肠道中阿米巴原虫携带率分别为42.22%(19/45)、33.33%(11/33);经ELISA检测粪便中阿米巴抗原，阿米巴原虫携带率分别为64.44%(29/45)、42.42%(14/33)。采用ELISA粪便抗原检出率高于形态学镜检法。经ELISA检测血清IgG抗体阳性率分别为66.67%(30/45)、63.63%(21/33)。结论 腹泻树鼩对阿米巴原虫的携带率较高，该原虫可能是导致树鼩腹泻的病原之一。日常饲养过程中应加强阿米巴病的监测和防治，防止肠道寄生虫病的传播。

摘要: 目的 原核表达、纯化树鼩CD4蛋白并制备多克隆抗体，检测树鼩体内的CD4蛋白。方法 克隆树鼩CD4基因并连接到表达载体，构建重组质粒pET30a（+）-CD4和pGEX-5X-1-CD4，表达并纯化重组蛋白 His-CD4 和 GST-CD4，用不同佐剂[弗氏佐剂、MF59 和 Al（OH）₃]制备多抗，用Western blot法检测血清抗体特异性。 结果 蛋白表达产物His-CD4和GST-CD4的相对分子质量分别约为53.5×10～3和70.0×10～3, 纯化后蛋白浓度分别为600 μg/mL和1 mg/mL; 三组佐剂均能诱导产生抗体，抗体几何平均滴度（Geometric Mean Titer, GMT）的比较结果为: 弗氏佐剂组（GMT:97 420）>Al（OH）₃佐剂组（GMT: 67 202）>MF59佐剂组（GMT: 55 128）; 其中弗氏佐剂组显著高于原蛋白组（P<0.001）; Al（OH）₃组显著高于原蛋白组（P<0.01）; 而MF59组显著高于原蛋白组（P<0.05）。结论 制备了特异性良好的小鼠抗血清，能够特异性地结合树鼩的CD4蛋白。为下一步本实验室制备 CD4 单克隆抗体、CD4蛋白分子的功能研究以及树鼩的病毒感染模型等免疫相关实验的进行提供了基础。

摘要: 目的 了解树鼩主要消化腺的组织学结构特征，建立树鼩正常的消化腺组织学图谱。方法 采用常规组织处理、制片、HE染色及显微镜技术对人工驯养繁殖仔一代树鼩腮腺、颌下腺、舌下腺、胰腺和肝脏进行了组织学观察。结果 (1)腮腺为纯浆液性腺泡，闰管明显，管壁由单层低立方形上皮细胞组成，官腔充满分泌物。(2)颌下腺为混合性腺体，以浆液性腺泡为主,分泌管较长。(3)舌下腺是以黏液性腺泡为主的混合腺，含有少量闰管。(4)肝脏表面为一薄层致密结缔组织被膜，肝实质为多个分界不明显的肝小叶，肝小叶中央为中央静脉。肝细胞呈多边形，核大而圆，位于细胞中央，多数为单核，少数为双核，细胞质呈红色，胞质内有空泡和小腔隙。汇管区小叶间动脉、小叶间静脉及小叶间胆管结构较为明显。(5)胰腺表面为一层疏松结缔组织被膜，胰腺实质由外分泌部和内分泌部组成。外分泌部包含腺泡和导管，腺泡由浆液性腺细胞组成，导管由闰管、小叶内导管、小叶间导管、叶间导管和胰管组成。内分泌部又称为胰岛，是一些大小不等的细胞团和细胞索，不规则地散布于外分泌部的腺泡之间，胞质染色较外分泌部浅。结论 树鼩消化腺在组织形态学上接近于灵长类动物，可以为研究树鼩消化腺的功能和病变，以及建立人类相关疾病的动物模型提供组织学依据。

摘要: 目的 对六种实验动物的消化腺进行比较组织学研究，并观察其自发性病变，为实验动物病理学检测标准及以它们为基础的科学研究提供理论依据。方法 选取按照现行实验动物质量国家检测标准检测合格的猕猴30只、比格犬16只、树鼩20只、日本大耳白兔18只、SD大鼠20只及昆明小鼠20只,经麻醉后处死并剖检。选取消化腺组织体积分数10%甲醛固定,常规石蜡切片,HE染色、免疫组化染色及特殊染色,光镜观察,比较它们在组织学结构方面的异同及有无自发性病变。结果 (1)腮腺、颌下腺、舌下腺的组织学差异主要是腺泡的组成、腺泡内脂肪组织的含量、黏液性腺泡AB/PAS染色的情况及导管系统的组织学结构;(2)作为一种独有的唾液腺,比格犬有一对颧腺,日本大耳白兔有一对眶下腺;(3)肝脏的组织学差异主要是肝小叶的组织学结构、门管区的组织学结构及肝细胞的形态;(4)胰腺的组织学差异主要是胰腺小叶内有无淋巴组织以及胰腺导管系统的组织学结构;(5)胆囊的组织学差异主要是表面上皮的形态、黏膜窦是否明显;(6)炎症是肝脏普通存在的自发性病变,在部分实验动物的颌下腺及胰腺也可观察到炎细胞浸润。结论 获得了六种实验动物宝贵的组织学资料并分别揭示了各自的组织学特点。研究人员在制定病理学检测标准、实验研究、药物安全性评价时应充分考虑各种动物的组织学结构差异及自发性病变的存在。