摘要: 为了探索研究柑橘木虱Diaphorina citri与柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)病原菌的相互作用蛋白,本研究运用RNA转录中5'末端转换机制(Switching Mechanism at 5'End of the RNA Transcript,SMART)技术构建了柑橘木虱的酵母双杂交cDNA文库。以实验室饲养的柑橘木虱为材料,提取总RNA,经反转录后合成ds cDNA,两端添加同源重组序列,并用层析柱纯化;ds cDNA与文库质粒pGADT7-Rec在酵母Y187感受态细胞内发生同源重组,柑橘木虱cDNA重组到文库质粒上,完成酵母双杂交cDNA文库的构建。结果表明,文库容量达到106,扩增文库滴度为2.23×107cfu/mL,cDNA插入片段的平均长度大于750bp,达到试剂盒建库要求。另外,我们利用构建的酵母双杂交文库,以HLB病原菌Candidatus Liberibacter asiaticus(CLas)的两个膜蛋白ORF420和ORF3420作为诱饵进行筛选试验,但是并没有得到阳性克隆。柑橘木虱酵母cDNA文库的构建为开展柑橘木虱与柑橘黄龙病病原菌互作机制的研究奠定了基础。

摘要: 柑橘黄龙病(Huanglongbing,HLB)是经柑橘木虱Diaphorina citri传播的最主要柑橘病害之一,危害严重时能对柑橘产业造成毁灭性的破坏。为了鉴定福建和海南2个地理种群柑橘木虱的内共生菌群落组成,本研究对16SrRNA部分保守序列进行PCR扩增,并利用特异性引物对不同内共生菌进行了感染率检测;另外,还通过人工接虫的方法,探索柑橘木虱成虫在带黄龙病菌蕉柑Citrus reticulata cv.Tankan上的获菌能力,以及带菌柑橘木虱成虫对黄岩蜜橘C.reticulata cv.Subcompress的传菌能力。研究发现,这2个地理种群的柑橘木虱含有相同的内共生菌组成,包括α-Proteobacteria,Wolbachia spp.,γ-Proteobacteria,mycetocyte symbionts,β-Proteobacteria,Oxalobacter和β-Proteobacteria,Herbaspirillum,而且这2个地理种群柑橘木虱的4种内共生菌的携带率均在95%以上。柑橘木虱成虫在带菌蕉柑上饲菌28d后,带菌率可达到82%,而带菌柑橘木虱成虫在黄岩蜜橘上传菌75d后,可导致橘树整体带菌。本研究为柑橘木虱的进一步研究和防虫治病途径提供了一些理论依据。

摘要: 在新种柑橘园中栽种柑橘无毒苗,定期监测和防治果园内柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama,防治时期为各新梢萌芽期,重点防治期为早夏梢期和早秋梢期;与此同时,调查柑橘园周围柑橘木虱寄主植物,每年2月下旬、5月上旬、8月下旬和11月下旬定期喷药,清除柑橘园周围寄主植物上的柑橘木虱。结果表明,果园内柑橘木虱和黄龙病均得到有效的控制,果园内柑橘木虱种群数量控制在很低的水平,最高为2.25头/公顷,最低为0;黄龙病发病率也很低,2008年为8‰,实施该技术后,发病率逐年下降,2012年降低到0.1‰。

摘要: 利用刺探电位技术(electrical penetration graph,EPG),比较测定了柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama成虫在经番石榴精油处理和对照柑橘叶片上的剌吸取食行为。结果表明,在正常(对照)叶片上,柑橘木虱成虫的剌吸取食有8种不同波形,表现为迅速进入取食过程,非剌探活动时间和唾液分泌较少,为韧皮部取食,没有木质部取食。而柑橘叶片经1μg/mL番石榴精油处理后,柑橘木虱成虫剌吸取食行为显著改变,表现为非剌探活动和唾液分泌增加,韧皮部取食时间极显著下降,下降率为62.12%,并出现木质部取食。不同时段柑橘木虱的有效取食时间动态结果显示,番石榴精油在第1h使柑橘木虱完全进入木质部取食,但随后逐步恢复韧皮部取食。

摘要: 柑橘是我国重要的岭南特色水果,种植面积广,产量大。在生产过程中,柑橘容易受到各类病虫害的危害。因为害虫抗药性的产生以及化学农药使用带来的负面影响,害虫生物防治成为今后柑橘害虫可持续防控的重要策略。本文以桔小实蝇、柑橘木虱、介壳虫以及柑橘潜叶蛾、柑橘卷叶蛾、柑橘凤蝶等柑橘重要害虫及其寄生蜂为研究对象,对近年来国内外在柑橘害虫生物防治领域,尤其是寄生蜂的研究与利用等方面取得的最新进展进行了综述,以期不断推进我国柑橘害虫生物防治技术的研究与应用,保障我国柑橘产业的健康发展。