摘要: 【目的】检验现有的无菌和悉菌黑腹果蝇Drosophila melanogaster操作技术在昆虫中应用的广普性，并通过此技术解析共生菌对黑腹果蝇和黑水虻Hermetia illucens生长发育的促进作用。【方法】利用Walch-次氯酸-乙醇改进型无菌操作技术，用黑水虻、亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis和东方粘虫Mythimna separata卵进行可行性验证，并优化黑水虻无菌操作技术；使用LB固体培养基分离黑腹果蝇肠道细菌；利用16S rRNA基因测序鉴定黑腹果蝇肠道细菌；体内定殖和世代传递实验验证黑腹果蝇肠道细菌与黑腹果蝇的共生关系；建立悉生黑腹果蝇和黑水虻模型，记录黑腹果蝇的发育历期和生长速率来验证黑腹果蝇肠道细菌对黑腹果蝇和黑水虻生长的促进作用；利用qRT-PCR检测黑腹果蝇2和3龄幼虫体内蜕皮激素信号通路相关基因(PTTH和E74B)的表达量。【结果】与传统的无菌操作技术比较，改进型无菌操作技术提高了建立无菌昆虫的效率；通过改变次氯酸处理时间优化无菌黑水虻操作技术，可将该方法推广到卵粘性低和卵壳较厚的昆虫中。从黑腹果蝇肠道中分离出的细菌经鉴定为拉恩氏布鲁奇菌Rahnella bruchi,该细菌能在黑腹果蝇肠道内稳定定殖，并能在世代间垂直传递。拉恩氏布鲁奇菌显著缩短黑腹果蝇的发育历期，提高黑腹果蝇羽化率和生长速率。肠道共生菌拉恩氏布鲁奇菌能显著缩短黑水虻的发育历期。在分子水平上，拉恩氏布鲁奇菌能显著提高黑腹果蝇2和3龄幼虫体内PTTH和E74B的表达量。【结论】优化后的无菌操作技术对卵壳较厚、卵粘性低的昆虫效果相对较好。拉恩氏布鲁奇菌是黑腹果蝇的有益共生菌，可以因果性地促进黑腹果蝇生长和发育。拉恩氏布鲁奇菌能够促进黑水虻的生长发育。

摘要: 【目的】沃尔巴克氏体Wolbachia是一类母系遗传的革兰氏阴性菌，是昆虫中最常见的胞内共生菌之一，可通过多种方式影响宿主的生殖和行为，但其影响机制还不甚清楚。本研究旨在探讨一种毒力较强的Wolbachia菌株wMelPop侵染对雄性黑腹果蝇Drosophila melanogaster肠道细菌的影响。【方法】解剖感染wMelPop的黑腹果蝇(Pop+)和未感染的黑腹果蝇(Pop-)雄成虫完整肠道，提取总DNA,利用Illumina NovaSeq平台对肠道细菌16S rDNA基因的V3-V4区进行测序，比较分析Pop+和Pop-肠道细菌的物种组成、丰度及α多样性，并通过qPCR验证表达量具有显著差异的3个属的6种肠道微生物高通量测序数据的有效性。【结果】α多样性分析显示，wMelPop侵染提高了雄性黑腹果蝇肠道细菌丰度，降低了肠道菌的多样性。Pop-肠道中，优势菌属是不动杆菌属Acinetobacter、假单胞菌属Pseudomonas、醋杆菌属Acetobacter和嗜盐单胞菌属Halomonas。与Pop-相比，Pop+肠道中假单胞菌属的相对丰度显著下调，而醋杆菌属和乳杆菌属Lactobacillus的相对丰度显著上调。qPCR验证结果显示，与Pop-相比，Pop+肠道中总细菌16S rDNA基因表达量极显著上调，Pop+肠道中番茄醋酸杆菌A.pomorum的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.7倍，Pop+肠道中热带醋酸杆菌A.tropicalis的16S rDNA基因表达量比Pop-的上调约3 700倍，果状乳杆菌L.frutivorans、植物乳杆菌L.plantarum和短乳杆菌L.brevis的16S rDNA基因表达量均显著上调，其中果状乳杆菌16S rDNA基因表达量上调的倍数最高，约为Pop-的23 000倍，产碱假单胞菌P.alcaligenes的16S rDNA基因表达量下调至Pop-的0.6倍，这些结果与16S rDNA测序结果的趋势基本一致。【结论】wMelPop的侵染显著影响了雄性黑腹果蝇肠道细菌的相对丰度。其中，醋杆菌属和乳杆菌属的肠道菌载量显著升高，这可能是wMelPop感染影响昆虫宿主生殖和行为的机制之一。

摘要: 【目的】在高温或低温环境中，昆虫的神经和肌肉系统会暂时丧失功能进入可逆的昏迷状态，超过引发昏迷状态阈值的极端温度以及过长时间的昏迷状态会导致昆虫死亡。本研究旨在探究两种寄生蜂毛锤角细蜂Trichopria drosophilae和蝇蛹金小蜂Pachycrepoideus vindemiae的冷、热昏迷状态，以更全面地理解气候变化对寄生蜂的影响。【方法】观察羽化24 h内的毛锤角细蜂和蝇蛹金小蜂成蜂在4℃低温及38和42℃高温环境中进入昏迷状态的时间、从昏迷状态恢复的时间，以及昏迷处理60和120 min后转移到25℃环境中恢复运动能力的个体的比例，并统计了存活个体的寿命。【结果】在4℃低温环境下，毛锤角细蜂成蜂比蝇蛹金小蜂成蜂在更短的时间内进入昏迷状态，并且它们需要更长的时间从冷昏迷状态中恢复过来。38和42℃高温环境中，毛锤角细蜂成蜂全部丧失运动能力，在38℃昏迷60和120 min后均约有27%的个体死亡；而在42℃昏迷60和120 min后分别约有15%和38%的个体死亡；38℃高温不会致蝇蛹金小蜂成蜂出现昏迷，42℃高温导致约35%蝇蛹金小蜂成蜂丧失运动能力，且丧失运动能力60和120 min的个体在解除高温胁迫后全部死亡，这表明蝇蛹金小蜂成蜂没有像毛锤角细蜂成蜂一样通过昏迷度过高温胁迫。我们还发现，从冷昏迷状态恢复后的两种寄生蜂成蜂的寿命未受影响，但从热昏迷恢复的两种寄生蜂成蜂的寿命显著变短，并且毛锤角细蜂成蜂的寿命受影响程度更大。【结论】这些结果说明在极端温度环境中，蝇蛹金小蜂成蜂比毛锤角细蜂成蜂保持更长时间的活动状态，并且高温对蝇蛹金小蜂的寿命等影响较小。研究结果为气候变化背景下利用这两种寄生蜂开展果蝇类害虫的生物防治提供了参考。

摘要: 【目的】首次报道一种为害灵芝Ganoderma lucidum的新害虫——白头白果蝇Leucophenga albiceps。明确其为害情况、形态特征及分子鉴定依据，助力林下灵芝栽培产业健康发展。【方法】采用五点取样法调查该害虫在林下灵芝栽培过程中的为害情况。在显微镜下对该害虫进行形态学观察和解剖，描述其外观形态及雄性外生殖器特征。利用DNA条形码技术扩增该虫线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（Mitochondrial DNA cytochrome oxidase subunitⅠ，mtDNA-COⅠ）基因进行分子鉴定，并构建系统发育树。【结果】该害虫春季开始活动，7-8月进入为害盛期，一年发生数代，世代重叠严重。一般在新开辟的林地为害较轻，第二年开始逐年加重，是重庆地区林下灵芝栽培过程中影响灵芝产量和质量的主要虫害。该害虫外观形态及雄性生殖器特征与白果蝇属Leucophenga昆虫相符，分子鉴定结果显示该虫与白头白果蝇L.albicepsCOⅠ序列（登录号：KP697095.1）的相似度达97.5%，在系统发育树上两者聚为一支，种内平均遗传距离为0.012，确定其为白头白果蝇。【结论】本研究报道的白头白果蝇为重庆新纪录种，也是首次发现其在重庆林下灵芝栽培过程中为害严重，此研究结果为深入研究其发生规律和防控技术奠定了基础。

摘要: 为了解冈田绕眼果蝇Phortica okadai触角中气味结合蛋白（OBPs）的多样性、进化关系、功能特征以及在嗅觉功能中可能发挥的作用，本研究基于冈田绕眼果蝇触角转录组测序数据进行了生物信息学分析，对转录组中的OBPs家族基因进行了鉴定和序列分析，并重点对该家族中的PoOBP83a基因进行了克隆、蛋白质理化性质、基因表达量检测以及分子对接模拟。结果表明：触角转录组中存在15个具有OBP保守结构域的PoOBPs基因，大部分PoOBPs蛋白为亲水性蛋白。PoOBPs家族的系统发育分析表明，可以将15个PoOBPs共分为5个亚家族；蛋白结构预测表明，PoOBPs均含有PBP-GOBP结构域，PoOBP83a基因编码区全长501 bp，编码166个氨基酸，蛋白分子量约19 kDa，理论等电点（pI）为6.15。PoOBP83a氨基酸序列中有6个保守半胱氨酸位点，属于Classic-C OBP家族蛋白；PoOBP83a在每个阶段均有表达，PoOBP83a在雌雄成虫触角中的相对表达量最高，其次为翅、口器和头部，在足、腹部和胸部的表达量最低。分子对接表明PoOBP83a与芳樟醇、苯甲酸乙酯、月桂酸乙酯、苯乙醇及吲哚具有较好的结合能力。本研究结果可为进一步研究冈田绕眼果蝇的嗅觉功能提供理论基础。