摘要: 为探究中国林蛙（Rana chensinensis）早期胚胎发育特征，2022年3月收集其在河南省济源市太行山区野外自然抱对产出的受精卵，在室内水温（22.63±2.09）℃的条件下进行连续观察。结果显示，中国林蛙卵径（1.57±0.01）mm(n=5)；早期胚胎发育分为25个时期，从受精卵到鳃盖完成期历时158.83 h；卵裂方式为不均等全裂；大约70%的胚胎在鳃血循环期出膜。中国林蛙早期胚胎发育的卵裂特征、出膜方式及出膜时期与近缘种相似，速度较慢；与其他无尾两栖类相比，卵裂特征、出膜方式和发育速度均呈现种属特异性。中国林蛙较小的卵径、较快的早期胚胎发育速度反映了其对静水产卵环境的适应。

摘要: 为了探索东北林蛙在越冬期内生殖器官的生理变化,本研究自2013年10月至翌年3月,每月采集雌、雄成体林蛙各10只,测定雄蛙的体重、睾丸重、脂肪体重;雌蛙的体重、输卵管重和卵巢重,并进行测定器官的系数计算和相关性分析。结果表明:雄性林蛙睾丸的重量和系数在越冬期里无显著变化（P>0.05）,而脂肪体的重量和系数自1月之后显著降低（P<0.01）。雌性林蛙卵巢的重量和系数自1月开始显著增加（P<0.01）;而输卵管系数在越冬的第1个阶段（11月¹2月间）显著上升（P<0.01）。相关性分析证明脂肪体是雄蛙的主要越冬能量来源,而输卵管则是卵巢中卵子发育的主要营养物质来源。本研究揭示了林蛙越冬期生殖生理基本规律,并为林蛙养殖提供科学依据。

摘要: 由于环境、气候的恶化以及疾病的侵害,全球两栖动物种群数量呈现出整体衰退的趋势,其中虹彩病毒属蛙病毒科的蛙病毒是不可忽略的原因之一。环介导等温扩增技术(loop-mediated-isothermal-amplification,LAMP)是一种新型的核酸扩增技术,具有特异性强、快速、简便等特点,本研究利用LAMP技术,开发了针对中国东北林蛙种蛙蛙病毒的快速检测方法,针对蛙病毒MCP基因设计出能特异识别靶序列上6个位点的4条特异性引物,在链置换聚合酶(Bst酶)的作用下,62℃扩增30 min。通过对实验参数的优化,扩增后病毒的最低检出数可达到10～2个拷贝。该方法可用于东北林蛙养殖厂种蛙蛙病毒的临床快速检测,保证种蛙的存活质量和数量。

摘要: TBK1是IKKs蛋白激酶家族中的一员,也是免疫应答的重要调节因子之一,在Toll样受体通路等多条信号通路中均能发挥作用。Toll受体作为先天免疫中最为重要的一类模式识别受体,能够特异性地识别病原微生物的保守结构。为了探究东北林蛙在LPS和嗜水气单胞菌刺激下TBK1表达量变化的规律,本研究运用荧光定量PCR检测东北林蛙在嗜水气单胞菌和LPS两种不同的刺激源刺激下肾脏、肺脏、脾脏和肝脏中TBK1的表达水平。结果表明:在嗜水气单胞菌和LPS处理下,肾脏、肺脏、脾脏和肝脏中的TBK1表达量变化显著(P <0. 01),但在不同组织中,LPS和嗜水气单胞菌刺激下TBK1的表达量变化趋势并不完全一致。推测在不同的组织中不同的刺激源产生免疫应答的时间不尽相同。和不同物种的实验数据对比分析,发现各物种TBK1分子的表达量变化关系的规律不显著,推测在不同物种的不同器官中,受到外源微生物侵染时会有选择的激活不同的信号转导通路完成免疫应答。

摘要: 调查吉林省地区中国林蛙的生存环境以及中国林蛙各部位重金属含量,同时分析中国林蛙体内重金属含量与生态环境重金属之间的相关关系,评价中国林蛙生存环境重金属含量对中国林蛙体内重金属含量的影响。随机选择6个监测点,采集并检测中国林蛙生存环境中土壤、流动水、池中水和中国林蛙体内蛤蟆油、肝、骨、籽中的重金属含量。采用原子吸收法和原子荧光法检测林蛙各部位重金属总量以及铅、镉、铜、汞、砷元素的含量;以土壤环境质量标准GB15618-1995及地表水环境质量标准GB3838-20判断各种重金属元素含量超标情况。应用偏最小二乘方法分析林蛙体内重金属与生存环境中重金属之间的相关关系。结果表明林蛙体内骨、籽中的铜含量与其生存的池中水和流动水中的铜含量有显著的相关关系(P<0.05)。中国林蛙体内重金属含量与其生存环境中的重金属含量相关,应严控环境中的重金属污染以利于中国林蛙的用药安全。