摘要: 为探明纳米载体介导的RNA干扰乙酰胆碱酯酶（ace）基因表达对朱砂叶螨的影响，通过NCBI上获取朱砂叶螨的ace 1基因，利用RT-qPCR技术对ace 1基因在朱砂叶螨各个时期的表达水平进行检测，并利用纳米递呈dsRNA-ace 1的RNAi技术，检测其对朱砂叶螨的影响.结果显示，乙酰胆碱酯酶基因在朱砂叶螨4个时期均有表达，其中以成螨期表达量最高，其次是卵、若螨和幼螨.通过叶碟饲喂dsRNA-ace 1能够有效抑制朱砂叶螨ace 1的表达，ace 1基因表达水平下降57%,72 h致死率达到41.77%，同时对朱砂叶螨的产卵、孵育造成显著的影响.通过纳米递呈dsRNA-ace 1能够显著提高对乙酰胆碱酯酶基因表达的抑制，抑制率同比未纳米递呈dsRNA-ace 1提高24%，致死率同比增幅32.08%，产卵率与孵化率也均有显著降低.同时进行微滴法施用dsRNA-ace 1/SPc复合物，对朱砂叶螨ace 1的RNA干扰效果，和叶碟饲喂法差异不显著.本研究表明纳米载体递呈dsRNA-ace 1能够提高对ace 1基因表达的抑制，提高对朱砂叶螨的致死效果，结果可为后期以纳米载体介导的RNAi技术对害虫开展生物防治提供理论基础.（图7参27）

摘要: 【目的】探索纳米载体星形阳离子聚合物(star polycation, SPc)介导V-ATP酶H亚基基因TcV-ATPase-H的RNAi对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus雌成螨的毒效。【方法】通过PCR克隆朱砂叶螨TcV-ATPase-H;利用RT-qPCR检测TcV-ATPase-H在朱砂叶螨不同发育阶段(卵、幼螨、若螨和雌成螨)的表达量；分别通过叶碟法和纳米载体介导对朱砂叶螨雌成螨的TcV-ATPase-H进行RNAi,检测校正死亡率；通过草莓盆栽实验，检测dsTcV-ATPase-H/SPc和苦参碱联合施用对草莓叶片上朱砂叶螨雌成螨的毒效，测定草莓顶端新叶叶绿素含量和草莓植株地上部位干重，同时以玻片浸渍法测定dsTcV-ATPase-H/SPc和苦参碱联合施用对非靶标生物加州新小绥螨Neoseiulus californicus的毒力。【结果】克隆获得朱砂叶螨TcV-ATPase-H cDNA序列；TcV-ATPase-H在朱砂叶螨卵、幼螨、若螨和雌成螨中均表达，其中以在雌成螨中表达量最高，在幼螨中表达量最低。叶碟法对朱砂叶螨饲喂dsTcV-ATPase-H能够有效降低TcV-ATPase-H的表达量59%, 72 h时引起的朱砂叶螨雌成螨的校正死亡率达到37.99%,与对照组dsEGFP相比有显著提高；纳米载体介导比非纳米载体介导TcV-ATPase-H的RNAi能够显著降低TcV-ATPase-H的表达量20%,同时使校正死亡率显著提高了28.25%。纳米载体介导dsTcV-ATPase-H和苦参碱的联合施用能显著降低朱砂叶螨雌成螨的存活数，对朱砂叶螨种群生长有明显抑制效果，但对草莓植株叶绿素含量及草莓植株地上部位干重和加州新小绥螨的死亡率均不产生显著影响。【结论】纳米载体介导dsTcV-ATPase-H能够提高对TcV-ATPase-H表达的抑制，提高对朱砂叶螨的致死效果，该研究为后期研发纳米材料包裹dsV-ATPase-H的RNA农药提供了实验基础。