摘要: 【目的】暗黑鳃金龟Holotrichia parallela通过气味结合蛋白(odorant binding protein,OBP)识别性信息素和植物挥发物准确而迅速地定位配偶、寄主植物。本研究通过克隆暗黑鳃金龟气味结合蛋白15a(Hpar OBP15a)基因,解析该基因的编码蛋白特征、组织表达模式及与寄主植物气味等化合物的结合特性方面的研究,为阐明暗黑鳃金龟基于嗅觉识别的寄主植物选择机理奠定理论基础。【方法】根据暗黑鳃金龟成虫触角转录组测序的结果,利用RT-PCR克隆了Hpar OBP15a基因;Real-time PCR方法分析了该基因在成虫不同部位的表达量差异;荧光竞争结合测定了Hpar OBP15a蛋白和58种候选化合物的结合特征。【结果】暗黑鳃金龟Hpar OBP15a基因全长534 bp,编码147个氨基酸,Gen Bank登录号为AK1834747。Hpar OBP15a在触角中特异表达,且在雌虫触角中表达量显著高于雄虫。在被测的58种化合物中,Hpar OBP15a与46种气味化合物具有较好的亲和性,其中与十二烷、十二醇结合能力最强,其解离常数分别为8.5和11.3μmol/L;同时,对性信息素(L-异亮氨酸甲酯和R-芳樟醇)也有一定的结合能力(解离常数分别为21.0和18.5μmol/L)。【结论】Hpar OBP15a具有广泛的气味结合谱,其中对榆树挥发物十二烷的结合能力最强,因此该蛋白可能在暗黑鳃金龟对榆树的定位过程中具有重要作用。

摘要: 【目的】探究昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫沧州品系Heterorhabditis bacteriophora strain Cangzhou侵染对蛴螬脂肪体和中肠的影响,进一步明确其对蛴螬的致病机理。【方法】采用透射电镜技术,观察暗黑鳃金龟Hololtrichia oblita(Faldermann)和大黑鳃金龟H.parallela Motschulsky 2龄幼虫被嗜菌异小杆线虫沧州品系侵染后其脂肪体和中肠组织的病理变化。【结果】血腔注射感染期病原线虫嗜菌异小杆线虫沧州品系悬浮液24和48 h后,观察发现暗黑鳃金龟和大黑鳃金龟2龄幼虫脂肪体和中肠的组织结构均按时序逐渐发生变化,起初表现为脂肪球变形或变小,颜色变浅,脂肪体细胞和中肠细胞内质网、线粒体肿胀,中肠微绒毛变形脱落等现象,48 h后包裹脂肪球的膜结构破裂,脂肪体细胞和中肠细胞线粒体破裂,内质网数量减少,中肠微绒毛大量脱落,同时核内染色质大量解离,核膜破裂。【结论】经昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫沧州品系处理后,暗黑鳃金龟和大黑鳃金龟两种金龟甲2龄幼虫脂肪体和中肠细胞均出现明显的病理变化过程,这是嗜菌异小杆线虫高效致死蛴螬的原因之一。本研究可为昆虫病原线虫作为一种生物防治手段在蛴螬的综合防治中更好地发挥作用提供理论依据。

摘要: 为了分离鉴定暗黑鳃金龟的性信息素成分并对其功能进行验证,本研究对比摸索了3种触角的处理方法,并进行同一浓度(30 ng·μL(-1))二元混合物、不同配比的触角EAG测试。结果包括:建立了一种鳃叶状触角的触角电位(EAG)测定方法,即将暗黑鳃金龟Holotrichia parallela触角的各鳃叶用针分离开后进行测定,这种方法测得的触角电位反应值较高。雄虫触角对L-异亮氨酸甲酯和(R)-(-)-芳樟醇为7:1的二元混合物的反应值最高,和暗黑鳃金龟雌虫性信息素25个腺体提取液的EAG反应相当;对同一配比(7:1)不同剂量刺激液的EAC测试表明,雄虫对浓度为30 ng·μL(-1)的二元混合物刺激液的反应值最高。嗅觉反应结果进一步证实,试虫对L-异亮氨酸甲酯和(R)-(-)-芳樟醇7:1的选择最高,选择系数达93.3%。研究结果为利用性信息素防治暗黑鳃金龟技术的开发提供了基础。

摘要: 【目的】为了探讨国内外已经报道的金龟甲性信息素或植物源引诱剂对河南花生产区金龟甲的诱捕效果,以便实现"地下害虫地上治理"的目标。【方法】作者于2016年6月2日至8月31日,在驻马店和许昌两个地区,比较了10种候选引诱剂的诱捕效果。【结果】暗黑鳃金龟是两个地区占绝对优势的种类。暗黑鳃金龟性信息素二元成分R-(-)-芳樟醇与L-异亮氨酸甲酯组成的3个配方(1︰4、1︰5、1︰7),平均累计诱捕量显著大于其他候选引诱剂及对照空白诱捕器,但3种不同配比的捕获量之间没有显著性差异。【结论】在以暗黑鳃金龟为优势种的花生产区,我们推荐采用1︰4的R-(-)-芳樟醇︰L-异亮氨酸甲酯作为活性成分,以500?L的总剂量混入0.5%的琼脂胶载体中,于6月13日至7月23日之间即该金龟甲成虫的发生盛期实施大田诱捕。

摘要: 在室内研究了榆树、樱桃树、核桃树、板栗树、苹果树、柿树、红叶碧桃树、花生叶片对暗黑鳃金龟Ho-lotrichia parallela Motschulsky和铜绿丽金龟Anomqla corpulenta Motschulsky成虫寿命和繁殖力的影响。结果表明,不同食料对两种金龟甲成虫的寿命、产卵期、产卵量有显著影响。取食后使暗黒鳃金龟产生后代由高至低的食料顺序是:榆树叶(碧桃叶(板栗叶(樱桃叶(花生叶(核桃叶(柿叶(苹果叶,使铜绿丽金龟产生后代由高至低的食料是:核桃叶(板栗叶(樱桃叶(榆叶。在供试的8种食料中,榆树叶片是暗黑鳃金龟成虫的最适宜食料,取食后的寿命、产卵期和产卵量分别为41.5d、43.0d和6.2粒/♀;在供试的4种食料中,铜绿丽金龟成虫的最适宜食料是核桃叶片,取食后的寿命、产卵期和产卵量分别为20.9d、25.0d和46.8粒/♀。