摘要: RNAi技术已在昆虫基因功能研究中取得了广泛的应用。本文主要从dsRNA的设计、导入方法及RNAi结果分析方面作了概述,并对实验过程中存在的一些关键问题如RNAi特异性沉默,dsRNA导入方法的选择及不同昆虫RNAi多样性方面进行了讨论。

摘要: 本文以褐飞虱Nilaparvata lugens(Stl)为实例介绍了利用Trizol略法作改进用于提取昆虫总RNA的方法,抽提的总RNA利用甲醛变性凝胶电泳、NanoDrop核酸蛋白仪和Agilent 2100 Bioanalyzer分析表明其质量高和完整性好。同时讨论了应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行昆虫时空表达研究中选择参考基因应注意的问题,为相关研究提供参考。

摘要: BrdU(5-bromo-2'-deoxyuridine)是一种人工合成的核苷酸类似物,常用于标记活体组织的增殖细胞。它的结构类似于胸腺嘧啶,在细胞分裂的S期,可以取代胸腺嘧啶而插入正在复制的细胞DNA中。通过免疫组化手段,用BrdU抗体检测整合在细胞DNA中的BrdU分子,可以反映出细胞周期的活力,即细胞增殖的速率。本文介绍一种优化的BrdU染色流程,用来标记昆虫小器官的细胞增殖速率。通过这种技术,我们重新评估了Dpp信号通路中的转录抑制因子Brinker在翅芽发育过程中调控细胞增殖的作用,发现它并不是以前所认为的在翅囊区是一种生长抑制因子。

摘要: 运用透射电子显微镜技术,可以对昆虫的不同器官上的感受器进行切片观察,以揭示感受器内部的清晰构造,为分析感受器功能提供依据。但目前在切片技术中,准确定位不同类型的感受器存在困难。通过将莱卡md2500荧光显微镜与日立S-3400N扫描电镜结合,确定透射电镜树脂包埋块中的昆虫感受器位置,提高运用透射电镜观察昆虫感受器超微结构时切片的准确性。

摘要: 一般认为,景观斑块面积和破碎化对物种丰富度和分布格局有重要的影响。在宁夏中部荒漠地区,天然柠条林和人工柠条林地交错排列,形成点、片、带状等大小不等的斑块性分布,表现为典型的破碎化斑块格局生境特征。本文采用巴氏罐诱法调查了在小尺度下荒漠景观人工柠条林破碎化生境不同斑块内地表甲虫的物种多样性。结果共获得10科20属29种地表甲虫,其中拟步甲科昆虫占绝对优势,阿小鳖甲Microdera kraatzi alashanica Skopin、克小鳖甲Microdera kraatzi kraatzi(Reitter)为优势种。Rarefaction曲线显示较大面积的斑块有较多的物种多样性,但群落多样性指数各斑间块差异不显著。利用斑块面积对物种数-个体数进行回归分析表明,地表甲虫的物种多样性受斑块面积的影响,生境破碎化会导致地表甲虫多样性下降。