摘要: 日本鳗鲡(Anguilla japonica)是一种具有重要经济价值的降海洄游鱼类,产卵场位于西马里亚纳海脊南部[1,2],孵化的柳叶鳗仔鱼随北赤道流和黑潮输送至中国、朝鲜及日本的大陆架变态为玻璃鳗,并在河口水域变态为线鳗[3]。柳叶鳗-玻璃鳗-线鳗的变态,伴随着多个形态发育和生理调节过程。其中,表皮和内部器官上渐进沉积的黑色素是最清晰的可视标志[4]。Tesch和White[3]根据色素发育特征,将变态过程划分为I-VI色素发育时相。已有研究表明,幼鳗色素发育过程中个体体长、体重、体型、丰满度以及存活率等指标发生显著变化[5—13]。

摘要: 研究以日本鳗鲡(Anguilla japonica Temminck et Schlegel)为研究对象,根据其基因组数据库,预测并扩增出2类,共5个溶菌酶基因,包括1个C-型溶菌酶和4个G-型溶菌酶,分别命名为AJLys C、AJLysG1、AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4。它们的cDNA全长分别为811、749、1352、1175和733 bp,编码143、193、185、185和187个氨基酸。Signal P预测表明,AJLys C和AJLysG1的N-端分别包括15和19氨基酸的信号肽,另外3种溶菌酶没有信号肽。基因组分析显示,AJLys C、AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4的基因结构与其他鱼类的同类溶菌酶的基因结构相似,C-型溶菌酶具有4个外显子,G-型则具有5个。但是,AJLysG1的基因结构与其他鱼类G-型溶菌酶不同,具有6个外显子,与其他鱼类溶菌酶的蛋白序列比较,发现AJLysG1缺失其他G-型溶菌酶存在的第2个酶活性位点氨基酸,即天冬氨酸Asp。AJLys C与其他很多物种的C-型溶菌酶具有较高的同一性,如与牙鲆的同一性为72.7%。G-型溶菌酶中AJLysG2、AJLysG3、AJLysG4彼此之间以及与其他物种G-型溶菌酶的同一性相对较高;而AJLysG1与其他物种以及与其他3种G-型溶菌酶的同一性均不高,且都在50%以下。组织表达分析显示,所有5个溶菌酶基因在12种检测的组织中均有表达。C-型溶菌酶在胃及免疫相关组织的表达量较高;G-型溶菌酶在各组织/器官中的表达则差异较大,AJLysG1在皮肤和肌肉中的表达量最高,AJLysG2在免疫组织/器官如血液、头肾、体肾和鳃中表达量较高。经迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)刺激48h后,这5个溶菌酶基因在组织/器官中的表达量均有上调,其中在血液、肠道和头肾等的上调较为显著。此外,研究尝试重组表达这些抗菌肽,获得了AJLysG2、AJLysG3和AJLysG4基因在鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)细胞中的表达,重组蛋白表现出对溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)生长的明显抑制作用。文章较全面地研究了日本鳗鲡溶菌酶基因的组成和类型及其表达变化,并重组表达了部分基因,这为进一步研究这些溶菌酶的功能,特别是对病原微生物的作用奠定了基础。

摘要: 为揭示鱼类IFN-γ的生物学功能,研究从日本鳗鲡(Anguilla japonica)中克隆获得了IFN-γ基因,命名为Aj IFN-γ。Aj IFN-γ具有脊椎动物IFN-γ的典型特征:包括4外显子/3内含子的基因结构、C端的IFN-γ特征性氨基酸基序和1个核定位信号,以及6个α-螺旋反向平行构成的二级结构。Aj IFN-γ在日本鳗鲡所有组织中均低水平转录表达,其中肝脏中表达量最高,其次是皮肤和头肾。Poly I:C刺激和迟缓爱德华氏菌感染均可显著诱导Aj IFN-γ在鳃、头肾、体肾和(或)脾脏中的转录表达,表明Aj IFN-γ能够参与日本鳗鲡抗菌和抗病毒的免疫过程。此外,研究还克隆了Aj IFN-γ基因的5′调控区序列共1536 bp,并构建了一系列Aj IFN-γ5′调控区删节突变体,分析其启动子活性,结果表明,上游–240/+136区域中含有起始Aj IFN-γ转录的关键启动子调控元件,–1062/–814区域存在转录的正调控元件,而–1252/–1062区域存在转录的负调控元件。上述结果进一步丰富了鱼类IFN-γ的基础知识。

摘要: 为研究TLR21(Toll like receptor 21)在低等脊椎动物中的功能及表达调控机制,我们扩增获得了日本鳗鲡TLR21(Aj TLR21)c DNA序列,其编码的蛋白具有TLR家族的共同特征。Aj TLR21基因结构与其他鱼类和两栖类TLR21相同,由单个外显子编码。荧光定量结果显示,Aj TLR21在血液、鳃、脾脏、中肾等11个组织/器官中转录表达,其中在血液中表达量最高。经Poly I:C诱导后8h,Aj TLR21在脾脏和中肾中的表达量显著性上调;诱导后16h,Aj TLR21在血液、鳃、肠和脾脏中的表达量显著性上调(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果显示,在Aj TLR21 5′上游调控序列–1179 bp到+117 bp存在Poly I:C调节的正调控元件。经Edwardsiella tarda诱导后16h和72h,Aj TLR21分别在血液和中肾组织的表达量显著性上调,表明Aj TLR21同时也参与了抗细菌免疫应答,其在机体免疫系统中的功能具有多样性。研究对于理解日本鳗鲡Aj TLR21的免疫学功能具有重要的理论意义和应用价值。

摘要: 研究于2015—2017年对珠江流域12个站位的日本鳗鲡(Anguilla japonica)及花鳗鲡(Anguilla marmorata)种群资源量与洄游路线等进行了初步调查,并对其资源量状况、空间分布特征与环境影响因素等进行了分析。结果显示在近3年的调查时间里,共采集到日本鳗鲡41尾,平均年龄为(4.2±1.3)龄, 93%的个体未性成熟;采集到花鳗鲡12尾,平均年龄为(4.3±1.0)龄, 83%的个体未性成熟。日本鳗鲡在珠江水系最远能分布到红水河的合山江段,其在渔获物中的数量百分比与重量百分比均低于百分之一;花鳗鲡最远能分布到西江的石龙江段,其在渔获物中的出现率低于两百分之一。珠江水系鳗鲡野生资源极度匮乏,保护形势十分严峻。同时发现日本鳗鲡空间分布主要受河流分维和河流宽度的影响;花鳗鲡的空间分布主要受河流宽度和水深的影响。该研究是珠江水系野生渔业资源长期调查的一部分,研究结果将对鳗鲡资源的保护和可持续利用具有指导意义。