摘要: 应用SDS PAGE、电渗、透析等方法 ,分离纯化SIEA Gp10 1分子抗原。采用多途径免疫法制备单特异性抗血清 ,琼脂扩散试验和ELISA测定抗体的效价 ,SDS PAGE和ELIB检测抗体的特异性。结果表明纯化的SIEA Gp10 1为单一抗原分子 ,对SIEA Gp10 1的抗血清进行ELIB分析 ,证明其仅识别SIEA Gp10 1抗原 ,说明SIEA Gp10 1分子具有抗原性。

摘要: 本研究对日本血吸虫感染小鼠脾细胞体外在SEA与ConA诱导下产生的IL 5和IL 10 2种细胞因子从mRNA转录水平进行研究 ,以探索这 2种细胞因子mRNA转录水平的动态变化与肉芽肿形成与调节的可能性。日本血吸虫尾蚴感染雄性BALB C小鼠后 ,分别于感染后 3周、 5周、 8周、 10周和 12周取小鼠脾脏 ,制备脾细胞单细胞悬液并于含ConA或SEA的培养基中培养后提取脾细胞总RNA。RT PCR及凝胶分析法被用来分析总RNA样品中IL 5及IL 10mRNA转录水平。研究结果显示 ,未感染和感染 3周小鼠脾细胞均无IL 5和IL 10的表达 ,感染后第 5周的小鼠脾细胞出现IL 5特异性条带 ,感染后第 8周IL 5表达明显增强 ,感染后第 10周IL 5mRNA转录水平下降 ,感染后第 12周未能检测到IL 5表达 ,表明IL 5表达的动态变化与肉芽肿的形成、发展及调节相平行。IL 10mRNA转录也于感染后第 5周出现 ,但感染后第 8周、第 10周、第 12周与第 5周相比 ,IL 10的表达水平并无明显改变 ,显示IL 10mRNA转录水平并未随着肉芽肿的调节而变化。本研究结果提示IL 5可能在肉芽肿形成和调节过程中可能起重要作用 ;而IL 10可能并未直接参与肉芽肿的调节 ,但其转录可能与防止宿主过度肉芽肿炎症反应有关。

摘要: 为了进一步了解东方田鼠抗日本血吸虫病的机理 ,我们对东方田鼠抗体依赖细胞介导细胞毒 (AD CC)体外杀伤日本血吸虫童虫效果进行了观察。用来源于东方田鼠和昆明鼠腹腔细胞的巨噬细胞 (M)、嗜酸性粒细胞 (Eos)作为效应细胞 ,分别以东方田鼠阳性 阴性血清、昆明鼠阳性 阴性血清进行ADCC试验。在培养 3～ 6h时 ,所有东方田鼠M和Eos样本孔中均有大量细胞粘附于童虫 ,而昆明鼠M和Eos样本孔中几乎没有细胞粘附 ;培养 2 0～ 2 4h、 44～ 48h的童虫死亡率显示 :1 东方田鼠阳性 阴性血清的杀伤力明显高于相应的昆明鼠阳性 阴性血清的杀伤力 ;2 东方田鼠 昆明鼠的阳性血清诱导的童虫死亡率高于相应的东方田鼠 昆明鼠的阴性血清诱导的童虫死亡率 ;3,4种效应细胞样本孔以及细胞空白对照孔中的童虫死亡率基本相似。上述结果提示 ,东方田鼠血清具有明显的杀伤日本血吸虫童虫的作用 ,可能是东方田鼠抗日本血吸虫病机理中起决定作用的因子 ;东方田鼠M和Eos对日本血吸虫童虫具有天然粘附能力

摘要: 龙江血居吸虫 ( Sangunicola lungensis)和日本血吸虫 ( Schistosoma japonicum)依次为冷血动物和温血动物血吸虫的重要代表种类。分别对日本血吸虫与龙江血居吸虫成虫和尾蚴全基因组进行 RAPD标记研究 ,筛选出 1 4种随机引物对 4种材料扩增得到 1 50条多态片段 ,其中日本血吸虫成虫和尾蚴之间的同源性为0 .60 9;龙江血居吸虫成虫和尾蚴之间的同源性为 0 .61 7,两种血吸虫成虫之间的同源性为 0 .1 4 8,尾蚴之间为 0 .1 4 5。说明了冷血和温血动物血吸虫 ,它们具有相近的遗传背景 ,同时揭示了同一种血吸虫 ,其成虫和尾蚴阶段存在一定的多态性 ,反映出在虫体发育过程中 ,基因组的结构可能发生变化。根据 2 8S r RNA特定基因片段的 RAPD分析 ,筛选出对两种血吸虫不同发育阶段具有特异性的扩增引物 ,进一步说明同一种血吸虫在不同发育阶段 2 8S r RNA基因片段存在的差异。

摘要: 为获取有效的日本血吸虫病早期诊断靶抗原分子。以感染前和感染后2周、4周、6周兔混合血清以及急性、慢性日本血吸虫病人和正常人血清,用Westernblot对日本血吸虫成虫可溶性抗原(AWA)和虫卵可溶性抗原(SEA)进行了全面的分析与筛选。SEA140kDa和AWA54kDa、21kDa、20kDa分子出现最早,能被感染后2周兔血清所识别;SEA69kDa、50kDa、45kDa、38kDa和AWA72kDa、45kDa、34kDa、15kDa相继能被感染后4周兔血清所识别;其中SEA140kDa、50kDa、45kDa、38kDa和AWA34kDa、21kDa、54kDa、15kDa与病人血清反应同6周兔血清反应效果相仿,均为免疫反应主带,且在SDS-PAGE上有对应的蛋白主带,具有潜在的早期诊断价值。进一步对SEA进行抗体类型的分析,发现SEA能刺激机体产生IgG、IgM和IgA反应,其中SEA50kDa、45kDa、38kDa三个抗原分子均能被IgG、IgM、IgA三种抗体所识别,且均为反应主带;SEA140kDa以IgM反应带最深;SEA100kDa反应带仅出现于病人血清,以IgM反应最强,且其与IgM反应带在急性病人血清明显深于慢性病人血清,表明针对IgM的SEA100kDa分子也具有一定的早期诊断和区分病程的价值。SEA140kDa、50kDa、45kDa、38kDa和AWA34kDa、21kDa、54kDa、15kDa和针对IgM的SEA100kDa分子是具有潜在早期诊断价值的优势靶抗原分子。