摘要: 研究了闹羊花素Ⅲ对斜纹夜蛾Spodoptera litura离体培养细胞(SL细胞)的活性,并测定了对SL细胞Na+、K+和葡萄糖吸收以及对4龄幼虫血细胞数量的影响。结果表明:以400μg/mL和200μg/mL闹羊花素Ⅲ处理SL细胞,24h后细胞的相对死亡率为79.00%和56.69%,处理后8h,16h,24h和48h的LC50分别为240.09μg/mL,173.45μg/mL,113.56μg/mL和73.40μg/mL;闹羊花素Ⅲ处理SL细胞后10min,细胞对离子的吸收迅速增加,30min后吸收作用逐渐减弱;处理后3天内细胞对葡萄糖的吸收迅速增加,45天后,细胞对葡萄糖的吸收基本停止。以叶碟法和注射法处理4龄幼虫,8h后幼虫血细胞数量显著降低,随处理时间增加,幼虫血细胞数量又逐渐增加。

摘要: 通过研究血啉甲醚(hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)对斜纹夜蛾Spodoptera litura(SL)细胞的增殖抑制率IC50、处理后细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)的生成量、细胞内还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平和细胞器超微结构的变化,明确血啉甲醚对SL细胞的氧化损伤,并探讨将血啉甲醚及其衍生物拓展应用到农业害虫防治领域的可行性。用MTT法测定血啉甲醚光照处理下对SL细胞24h和48h的IC50值分别为8.35μg/mL和7.66μg/mL。硫代巴比妥酸(TBA)法测定表明,血啉甲醚光活化后能导致胞内MDA含量明显升高,且MDA的生成量与其浓度呈正相关;当血啉甲醚浓度为50.000μg/mL,光照处理48h时,细胞内MDA生成量达到173.08±3.51nmol/L。5,5′-二硫代双-(2-硝基)苯甲酸(DTNB)法对处理后细胞内GSH水平测定结果表明,光活化后的血啉甲醚处理SL细胞能导致细胞内还原型GSH相对含量随血啉甲醚浓度升高而显著降低;当血啉甲醚浓度为50.000μg/mL,处理48h时,光照处理组细胞内GSH相对含量较之同浓度黑暗处理下降了39.59%。扫描电镜观察显示,6.250μg/mL的HMME处理细胞并光照后,细胞膜表面出现了明显的孔洞,有的细胞出现了花样皱褶和内陷。这些结果表明在血啉甲醚的试验剂量下,SL细胞受到了氧化损伤。

摘要: 天蚕素是昆虫抵御病菌入侵的一类抗菌肽家族。根据斜纹夜蛾Spodoptera litura天蚕素B基因设计特异引物,通过PCR扩增得到2个新的天蚕素基因部分序列,分别命名为cecD1和cecD2(GenBank登录号分别为EF555567和EF555568)。2个基因编码同一个天蚕素D蛋白,该蛋白的成熟肽与天蚕素B存在2个氨基酸残基差异。序列分析发现cecD1和cecD2中分别包含568bp和377bp的内含子序列,它们有相同的5′和3′拼接位点,A+T含量分别为59.7%和69.8%,符合大多数真核生物内含子高A+T含量的特征。

摘要: 以MTT法筛选了19种杀菌剂对斜纹夜蛾Spodoptera litura SL细胞的毒杀活性,并以该方法研究了三唑类杀菌剂对SL细胞的毒力。结果表明:福美双、烯唑醇、己唑醇、氟硅唑、苯霜灵、苯醚甲环唑、戊唑醇和腈菌唑等杀菌剂对SL细胞具有优异的毒杀活性。三唑类杀菌剂腈菌唑、烯唑醇、己唑醇和戊唑醇处理SL细胞48h后,LC50值分别为21.94μg/mL、23.80μg/mL、33.16μg/mL和47.63μg/mL。以考马斯亮蓝G250法研究了腈菌唑对SL细胞中蛋白质含量和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率的影响,20μg/mL腈菌唑处理12h、24h、48h和72h后,SL细胞中蛋白质含量分别降低8.55%、25.95%、42.95%和67.05%;处理24h和48h后,SL细胞的LDH漏出率分别为30.66%和32.05%。以浸叶喂食法处理斜纹夜蛾3龄幼虫,三唑类杀菌剂可显著抑制试虫体重增长。以0.5μg/头、1.0μg/头和2.0μg/头剂量的腈菌唑注射处理72h后,斜纹夜蛾4龄幼虫血细胞数量分别降低12.31%、25.96%和25.73%;腈菌唑注射处理48h和72h后,对斜纹夜蛾幼虫的LD50值分别为1.59μg/头和1.53μg/头。结果显示以离体培养细胞为对象,从现有杀菌剂中寻找新的杀虫剂先导化合物具有良好的研究潜力。

摘要: 通过研究保幼激素类似物(juvenile hormone analogues,JHA)methoprene对斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litur anucleopolyhedrovirus,SpltNPV)在宿主血淋巴中增殖的影响,以探明JHA促进SpltNPV增殖的初步机制,为阐明JHA促进病毒增殖提供更全面的理论依据。应用SDS-PAGE及Western blot法,分析了methoprene对SpltNPV多角体蛋白(polyhedron,POLH)在宿主斜纹夜蛾6龄幼虫血淋巴中合成的影响。结果表明:经methoprene处理后23天可明显促进幼虫血淋巴液中POLH的合成。在此基础上,通过荧光定量PCR检测,发现methoprene对SpltNPV在幼虫血淋巴液复制的影响主要发生在处理后的第4和第5天,该期间polh基因的拷贝数比对照显著增加,拷贝数的峰值达1.22×1010/mL。