摘要: CD4作为TCR的共受体可以提高TCR/抗原-MHC复合体的稳定性,辅助TCR识别抗原,并且参与T细胞活化。本研究从斜带石斑鱼Epinepheluscoioides头肾中克隆得到全长2240bp的CD4cDNA序列,该序列包含长1410bp的ORF,编码469个氨基酸,预测蛋白分子包含一段信号肽,4个Ig样区(D1～D4),一个疏水跨膜区和一段胞浆区,具有鱼类CD4典型的结构特征。同源比对显示,其推测的氨基酸序列与其他鱼类CD4氨基酸序列相似性为25%～51%,与人Homo sapiens和鼠Mus musculus的CD4氨基酸序列相似性为13%～15%。RT-PCR分析显示,斜带石斑鱼CD4在脾脏中表达量最高,其次是胸腺和头肾。受刺激隐核虫Cryptocaryon irritans感染后,斜带石斑鱼鳃和皮肤中CD4表达量并没有显著变化(P<0.05),头肾和脾脏CD4表达量在感染5d后显著升高(P<0.05),第7d再次回落。说明刺激隐核虫感染可引起头肾和脾脏CD4+T细胞的增殖,预示头肾和脾脏CD4+T细胞在宿主对刺激隐核虫感染的抗力机制中可能发挥着重要作用。

摘要: 从斜带石斑鱼垂体提取总RNA ,再取其 5 0ng合成SMARTcDNA。从所构建的垂体SMARTcDNA质粒文库中筛选到生长激素 /催乳素基因家族的 2个成员的全长cDNA片段 :生长激素 (GH )基因全长为 938bp ,编码 2 0 4个氨基酸 ;催乳素基因 (PRL)全长为 14 2 9bp ,编码 2 12个氨基酸。采用计算机软件Mega 2和CLUSTALW1 6 4b对 9种鱼的生长激素 /催乳素基因家族的 3个成员 (GH、PRL和生长催乳素SL)的氨基酸序列进行系统分析 ,构建NJ分支系统树 ,对于序列中的插入 /缺失位点则采用PairaiseDeletion ,10 0 0次自展(Bootstrap)分析计算各节点支持率。根据 3个基因的氨基酸序列构建的系统树表明 ,石斑鱼与金头鲷、金鲈和牙鲆聚成一类 ,虹鳟与大马哈鱼聚成一类 ,鲫鱼与鲶鱼聚成一类 ,鳗鲡成另外一类。根据石斑鱼全长cDNA推断的氨基酸序列比较表明 ,SL相对GH和PRL有较高的保守性。石斑鱼的GH、PRL和SL的氨基酸同源性在2 4 %～ 31% ,但其C -端的氨基酸同源性较高 ,尤其是C -端的 3个Cys是严格保守的。其中SL与GH的同源性 (30 8% )高于与PRL的同源性 (2 5 6 % ) ,GH和PRL的同源性最低 (2 4 1% )。

摘要: 斜带石斑鱼是重要的海产经济鱼类,在其个体发育过程中存在先雌后雄的天然性反转现象。垂体是调节生长和生殖等生理过程的重要内分泌器官。构建了斜带石斑鱼分别处于卵巢发育起始和性反转后期的垂体SMARTcDNA的质粒文库,并通过测序分别筛选到232个和258个表达序列标签(expressed sequence tags,EST)。将所得EST与GenBank数据库中的序列进行比对,结果表明,处于卵巢发育起始和性反转后期斜带石斑鱼垂体EST中,激素所占比例均为最高,分别为40.5%和34.9%。进一步比较分析了这两个性腺发育时期斜带石斑鱼垂体EST中各种激素相对表达丰度,表明生长/催乳激素家族(GH、PRL和SL)和阿黑皮素原(POMC)表达水平下降;促性腺激素α亚基(GTHα)表达水平急剧上升,促滤泡激素β亚基(FSHβ)、促黄体激素β亚基(LHβ)表达水平上升。