摘要: 研究获得了斑马鱼nr1d4a和nr1d4b基因的cDNA,进行了序列比对和系统进化分析,并采用实时定量RT-PCR(qPCR)方法研究了其表达模式及对不同环境刺激的转录反应。研究发现,斑马鱼nr1d4a和nr1d4b是由基因复制产生的旁系同源基因,具有高度保守的DNA结合结构域和配体结合结构域。斑马鱼nr1d4a和nr1d4b的表达模式具有明显的差别。nr1d4a在胚胎发育早期的表达量很低,72 hpf时开始显著升高;而nr1d4b具有较高水平的母源性表达,6 hpf时的表达量明显降低,但也在72 hpf显著回升。nr1d4a在脑和肾脏中表达量最高,其次是鳃、卵巢、精巢和眼,在肝脏中的表达量最低;nr1d4b在卵巢中表达量最高,其次是精巢和脑,在肠道和心脏中表达量最低。斑马鱼nr1d4a和nr1d4b都能被多种环境刺激瞬时诱导表达。16℃低温处理0.5h就能显著诱导斑马鱼nr1d4a和nr1d4b基因的表达,但处理6h后其诱导效应开始下降并逐渐消失。除低温外,重金属(2μmol/L镉)、缺氧(5%氧气)和盐度(5‰)处理均能瞬时诱导nr1d4a和nr1d4b的表达,说明nr1d4a和nr1d4b基因可能参与斑马鱼对多种环境刺激的适应性反应。研究为深入揭示鱼类nr1d4a和nr1d4b基因的生物学功能及其表达调控机制奠定了基础。

摘要: 高保真PCR克隆获得了ca15b基因的全长,利用胚胎整体原位杂交等技术研究了ca15b基因在斑马鱼早期发育过程中的动态表达。结果发现,ca15b在斑马鱼早期发育过程中存在显著的原始生殖细胞(Primordial germ cell,PGC)特异表达模式。ca15b是一个母源性表达的基因:在分裂期的胚胎中,其mRNA集中分布于位于分裂沟的生殖质(Germ plasm);从囊胚期开始,可以观察到其在PGC中的特异表达;在原肠胚中,其mRNA在体细胞中急剧降解,仅特异表达于PGC,这一表达特征一直持续到受精后1d的胚胎。将体外合成的包含5′UTR和3′UTR的ca15b全长mRNA注射到斑马鱼胚胎后,仅能增强原肠期之前胚胎中ca15b的整体杂交信号;在原肠胚期之后,注射的mRNA在体细胞中快速降解。这提示在ca15b mRNA上可能存在某种转录后调控其在早期胚胎体细胞中降解而在PGC中稳定存在的机制。

摘要: 鱼类的无氧运动是一种以白肌无氧糖酵解供能为主的高强度运动。鱼类的捕食、逃逸、繁殖洄游等活动极度依赖其运动能力[1],尤其是鱼类在捕食、逃跑、逆流洄游过程中,无氧运动能力可以决定其是否能够生存。短时间无氧运动就会导致鱼肌肉内糖原、ATP等能源物质的迅速消耗和乳酸等代谢产物的大量积累[1—4]。由于鱼类白肌为单一类型肌纤维,鱼类无氧运动后恢复较哺乳动物缓慢,使得鱼类成为研究无氧运动后代谢恢复和运动性适应的极佳模型[1,5]。因此无氧运动尤其是力竭性的无氧运动后机体的恢复代谢成为鱼类运动生理学研究的热点领域。由于鱼类混合型肌纤维含量极少,其也是研究运动训练适应性的理想模型[6]。有氧游泳运动训练可以提高鱼类的生长率和食物转化效率[7]、增加最大耗氧量[8]、促使红肌的肥大增粗[9]、肌糖原和代谢酶活性增加[10]、肌肉毛

摘要: 将体质健壮的4月龄斑马鱼(Danio rerio)亲鱼[雄鱼(0.36±0.05)g/尾,雌鱼(0.59±0.06)g/尾]雌雄各180尾,随机平均分配在室内斑马鱼循环系统的18个养殖缸中。在斑马鱼基础饲料(对照组)中分别添加7 g/kg n-3HUFA(高不饱和脂肪酸,Highly unsaturated fatty acid)(HUFA组)及10 g/kg MCFA(中链脂肪酸,Medium chain fatty acid)(MCFA组),制成3组等氮等脂饲料,饲养90d后,探究不同链长脂肪酸对斑马鱼的性腺脂肪酸组成、繁殖力和仔鱼成活率的影响。结果表明:(1)3组雌鱼性腺的脂肪酸组成均受到所饲喂饲料脂肪酸组成的影响,其相关系数均在0.8以上。HUFA组雌鱼性腺中EPA和DHA的相对含量显著高于MCFA组及对照组(P<0.05),而MCFA组与对照组之间无显著差异;HUFA组油酸的相对含量显著低于MCFA组及对照组(P<0.05),而MCFA组与对照组之间无显著差异;HUFA组及MCFA组亚麻酸的相对含量与对照组之间均无显著差异,但MCFA组显著高于HUFA组(P<0.05)。(2)HUFA组及MCFA组雌鱼的成熟系数、绝对繁殖力、体重与体长的相对繁殖力均显著高于对照组(P<0.05),同时在雌鱼绝对繁殖力、相对繁殖力上,HUFA组显著高于MCFA组(P<0.05)。(3)将对照组雄鱼与各组雌鱼配对繁殖的结果显示,分别与HUFA组及MCFA组雌鱼配对繁殖后的雌鱼的绝对产卵量、相对产卵量和仔鱼成活率均显著高于与对照组雌鱼的配对,同时以上指标HUFA组雌鱼均显著高于MCFA组雌鱼(P<0.05)。将对照组雌鱼与各组雄鱼配对繁殖的结果表明,与HUFA组雄鱼配对后其受精率均显著高于与MCFA组及对照组雄鱼的配对(P<0.05)。综上所述,试验饲料显著影响斑马鱼雌鱼性腺的脂肪酸组成,HUFA及MCFA均可以促进斑马鱼雌鱼的繁殖性能和仔鱼成活率的提高,在试验条件下,HUFA的效果更好。

摘要: 早期的研究表明IRF11是鱼类特有的IRF家族成员。查询最近解析的斑马鱼第九版基因组时,发现斑马鱼IRF1和IRF11命名出现了混乱。通过对脊椎动物IRF1和IRF11基因位点进行同线型分析表明,IRF11与IRF1是两个不同的基因,不宜命名为IRF1b和IRF1a。系统进化树分析发现,在脊椎动物中IRF11基因比IRF1起源更早;两栖类以后的脊椎动物基因组只有IRF1,没有IRF11,其中原因可能是因为基因丢失。斑马鱼IRF11与脊椎动物IRF1一样,其表达蛋白定位在细胞核中。缺失分析揭示斑马鱼IRF11的DBD有一个能引导蛋白定位进入细胞核的序列。表达分析发现poly(I:C)能诱导斑马鱼IRF11的表达,但其表达水平低于IRF1。