摘要: 【目的】解析中华豆芫菁Epicauta chinensis短链脱氢酶家族成员4 (dehydrogenase/reductase SDR family member 4,DHRS4)基因EcDHRS4的分子特征，明确其表达模式，并探究其对中华豆芫菁体内斑蝥素合成的影响。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆中华豆芫菁EcDHRS4全长cDNA序列并分析其序列特征；通过同源建模构建EcDHRS4的三维结构模型。采用RT-qPCR检测EcDHRS4在中华豆芫菁成虫交尾后第1,3和5天时的表达量。向刚结束交尾的中华豆芫菁雄成虫体内注射dsEcDHRS4进行RNAi,并于注射后第1,3,5和7天时利用气相色谱检测斑蝥素相对含量。【结果】中华豆芫菁EcDHRS4 (GenBank登录号：MW282959)开放阅读框长807 bp,编码268个氨基酸，预测蛋白分子量为28.71 kD,等电点(pI)为9.30,EcDHRS4为亲水性稳定蛋白，无信号肽及跨膜结构域，其二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主，EcDHRS4属于经典型SDR家族蛋白，且同一物种内不同SDR家族成员间序列相似性较低。EcDHRS4的表达量在中华豆芫菁不同性别间存在显著差异，且在雄成虫交尾后第3天时达到峰值。注射dsEcDHRS4后第1,3,5和7天时，EcDHRS4表达量较dsGFP对照组分别下调了98.30%,99.09%,84.15%和91.79%,且在注射dsEcDHRS4后第7天斑蝥素相对含量降低至dsGFP对照组的56.81%。【结论】EcDHRS4属于C1-SDR家族蛋白，EcDHRS4在中华豆芫菁成虫交尾后不同时期的表达量具有显著的性别差异，且在交尾后雄成虫中高表达。EcDHRS4表达被抑制后影响了斑蝥素的合成，表明该基因参与斑蝥素的生物合成。本研究结果丰富了昆虫SDR基因的功能认知，为深入解析EcDHRS4在斑蝥素生物合成中的作用奠定基础。