摘要: 目的测定芫菁体内斑蝥素的含量及其存在形式。方法利用气相色谱法测定了8种芫菁和作为对照的黑翅红蝉体内总斑蝥素和游离斑蝥素的含量,总斑蝥素含量是通过酸水解法测得的,游离斑蝥素含量是通过直接浸提法测得的,以总斑蝥素与游离斑蝥素含量之差作为结合斑蝥素含量;并比较了结合斑蝥素与钙、镁含量之间的相关性。结果芫菁体内总斑蝥素的含量为游离斑蝥素含量的19倍,总斑蝥素的含量一般多于虫体干重的2.0%,而游离斑蝥素的含量均低于虫体干重的1.7%。黑翅红蝉体内不含任何形式的斑蝥素。斑芫菁属和豆芫菁属昆虫中的结合斑蝥素含量与钙元素呈正相关,斑芫菁属中结合斑蝥素含量与镁元素呈正相关,而豆芫菁属中结合斑蝥素含量与镁元素呈负相关。斑芫菁属昆虫体内钙元素的摩尔量要低于结合斑蝥素的摩尔量。结论芫菁体内总斑蝥素含量远高于游离斑蝥素的含量;结合斑蝥素可能是以斑蝥素酸钙和斑蝥素酸镁形式存在。

摘要: 为进一步探讨斑蝥素的杀虫作用机理,本研究采用叶碟饲喂法处理粘虫Mythimna separata(Walker)5龄幼虫,测定了饲喂处理后6,12,24,36和48h试虫体内羧酸酯酶(CarE)、酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和细胞色素P450Ο-脱甲基酶及多酚氧化酶(PPO)的活性。结果表明:斑蝥素可显著激活羧酸酯酶,处理后48h酶比活力最大,为同期对照的1.68倍;酸性磷酸酯酶在处理后6和12h活性变化不明显,处理24h后逐渐被激活,且与对照差异显著(P<0.05);明显抑制碱性磷酸酯酶,且随着处理时间的延长,抑制作用增强;对Ο-脱甲基酶表现为先抑制后激活的趋势;谷胱甘肽S-转移酶表现出先激活后抑制的影响;离体活体条件下均可显著抑制PPO活性。可见,斑蝥素可明显影响昆虫的代谢酶系,且其对碱性磷酸酶和多酚氧化酶的抑制作用可能与其毒杀作用有关。

摘要: 【目的】研究提取自眼斑芫菁Mylabris cichorii(Linnaeus)体内的斑蝥素对人喉癌HEP-2细胞和人胃癌BGC-823细胞的抑制、以及对细胞周期分布的影响。【方法】将斑蝥素作用于经体外培养的人喉癌HEP-2细胞和人胃癌BGC-823细胞,采用MTT法进行体外细胞抑制实验,测定斑蝥素对这2种癌细胞生长的抑制率与剂量效应;采用流式细胞术测定斑蝥素处理的人喉癌HEP-2细胞的细胞周期;并通过光学显微镜观察其细胞形态学改变。【结果】斑蝥素浓度为1.28μmol/L时,对HEP-2细胞有显著抑制作用,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系,抑制中浓度为2.88μmol/L;斑蝥素浓度为20.4μmol/L时,对BGC-823细胞有显著抑制作用,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系,抑制中浓度为54.85μmol/L。用浓度1.44和2.88μmol/L的斑蝥素处理HEP-2细胞24h后,G2-M期分布从8.21%增加到22.29%,S期细胞分布从14.33%增加到21.61%,且随药物浓度升高其阻滞作用增加,呈剂量效应关系。G0-G1期细胞分布都有所降低,从77.45%降低到56.10%,G0-G1期峰前无显著的亚二倍体峰出现,说明斑蝥素未能够诱导HEP-2细胞发生凋亡。光镜检查显示:HEP-2细胞可出现细胞收缩、胞膜突出、核碎裂等现象。【结论】斑蝥素对治疗喉癌的效果可能较为理想,而对胃癌的作用则不明显。

摘要: 体外培养的小鼠卵母细胞在１２ｈ内可完成第一次减数分裂，排出第一极体。将卵母细胞培养在含２５０μｇ／ｍｌ去甲斑蝥酸钠的培养液中，生发泡破裂（ＧＶＢＤ）过程不受影响，但卵母细胞不能完成减数分裂过程，卵母细胞中没有减数分裂器的形成，染色体紧密凝缩在一起；去甲斑蝥酸钠对小鼠卵母细胞减数分裂的影响在６ｈ内具有可逆性：卵母细胞ＧＶ破裂后用去甲斑蝥酸钠处理２ｈ换正常培养液培养，整个减数分裂过程不受影响；ＧＶ期卵母细胞用去甲斑蝥酸钠连续处理６ｈ，洗去药物继续培养，减数分裂可继续进行，但第一极体的排放时间推迟。去甲斑蝥酸钠对分裂期细胞特异性磷蛋白的出现影响不显著，在连续处理的卵母细胞中分裂期细胞特异性磷蛋白仍然存在。

摘要: 用大鼠单克隆抗体３Ａ５与去甲斑蝥素（ＮＣＴＤ）制备偶联物。ＥＬＩＳＡ检测结果表明：３Ａ５ＮＣＴＤ偶联物保持对人肝癌ＢＥＬ７４０２细胞和小鼠肝癌Ｈ２２细胞的免疫反应性。克隆生成法测定结果显示：３Ａ５ＮＣＴＤ具有比ＮＣＴＤ更强的细胞毒性。小鼠腹腔内移植肿瘤，ｉｐ给药，３Ａ５ＮＣＴＤ（３ｍｇ／ｋｇ）和ＮＣＴＤ的ＩＬＳ值分别为１１１％和３７％。结果说明在对腹腔肿瘤的治疗方面３Ａ５ＮＣＴＤ具有比游离ＮＣＴＤ更强的治疗作用。裸鼠移植ＢＥＬ７４０２人肝癌，ｉｖ给药，ＮＣＴＤ肿瘤抑制率为１５％（Ｐ＞００５），３Ａ５ＮＣＴＤ为６２％（Ｐ＜００１）；ｐｔ给药，ＮＣＴＤ肿瘤抑制率为４７％（Ｐ＜００５），３Ａ５ＮＣＴＤ为７８％（Ｐ＜００１）。与ＮＣＴＤ相比３Ａ５ＮＣＴＤ对裸鼠移植人肝癌具有更强的治疗作用。在给药途径方面，治疗效果ｐｔ强于ｉｖ。以上结果提示单克隆抗体与ＮＣＴＤ偶联物在肿瘤的导向治疗中有较好的疗效。