摘要: 斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus, CCV)属于大DNA病毒,是一种能引起斑点叉尾鮰(Letalurus punetaus)病毒性疾病的重要病原。研究以编码产物为磷酸激酶的CCV ORF77基因为靶标,设计了能识别靶基因上的8个独立区域的6条特异引物,利用基于环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)建立了用于CCV的实时荧光LAMP快速检测方法。结果显示,建立的实时荧光LAMP检测方法在63℃恒温反应45min条件下,反应大约12min后出现明显的峰值,最低检测限度为100个拷贝的病毒质粒DNA,检出时间为35min;并且具有良好的特异性,与白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、真鲷虹彩病毒(RSIV)、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)和新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)等常见水生动物病原DNA均没有交叉反应;同一样品于试验内及试验间重复性试验发现,20个平行样品的扩增曲线基本重合,表现出良好的重复性。通过对实际样品的检测结果显示,实时荧光LAMP检测方法能够特异性的检出CCV。因此,研究建立的CCV实时荧光LAMP检测方法操作简单、检测快速、特异性好、灵敏度高、结果可靠,能为斑点叉尾鮰养殖现场和实验室的斑点叉尾鮰疱疹病毒病病原的快速诊断和实时监测方面提供技术支撑。

摘要: 研究旨在建立准确、高效且经济的斑点叉尾鮰(Ictalures punctatus)家系亲缘鉴定体系,以期为斑点叉尾鮰的遗传评估及家系育种提供科学依据。选用10对具有较高多态性SSR标记,建立两个5重PCR反应体系。应用建立的斑点叉尾鮰家系亲缘鉴定体系对来源于13个全同胞家系和8个半同胞家系的333尾个体进行亲权鉴定。结果表明:10个位点平均等位基因数为9.8、平均观测杂合度0.8591、平均期望杂合度0.8092、平均多态信息含量0.7845; 3种情况下的累积排除概率分别为:0.99996806、0.99833267和0.99999998;验证群体的鉴定结果与系谱高度一致,真实鉴定率达到99.1%,子代与父母本三者之间配对平均LOD值介于13.30—24.70,且置信度均达到95%。研究选择的微卫星位点等位基因数目较多,多态性较高,可以快速、准确地对斑点叉尾鮰混养群体进行家系鉴定。

摘要: 采用铁锅炼制提取斑点叉尾鮰内脏鱼油,然后加酸使其甲酯化,以气相色谱/质谱法分析鱼油中的脂肪酸。结果斑点叉尾鮰内脏纯油脂中鱼油达到99%。从鱼油中共鉴定出15种成分,有饱和脂肪酸及不饱和脂肪酸,还有少量烷烃类物质。不饱和脂肪酸含量为76.40%,其中多不饱和脂肪酸为18.03%,以C18∶2(16.23%)为主,单不饱和脂肪酸为58.37%,以C18∶1(54.88%)为主。饱和脂肪酸含量为20.91%,主要有C16∶0(15.84%)和C18∶0(4.29%),多是低于C18以上的中长链脂肪酸。因此斑点叉尾鮰油脂可作功能性脂肪酸的重要膳食来源。

摘要: 测定了不同浓度及不同药浴时间条件下丁香酚对斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus幼鱼的麻醉效果。实验结果表明,随着丁香酚浓度从12.00mg/L升高至60.75mg/L,麻醉时间从119.34min±1.83min减少至4.01min±0.28min,复苏时间从1.52min±0.01min延长至8.15min±0.04min,各浓度组之间存在极显著差异。不同药浴时间试验结果显示:12.00mg/L、18.00mg/L和27.00mg/L的丁香酚分别药浴60min、50min和20min,复苏率均为100%;40.50mg/L和60.75mg/L的丁香酚分别药浴45min和5min,复苏率为50%;60.75mg/L的丁香酚药浴10min时,其死亡率达60%。结果提示,丁香酚用于斑点叉尾鮰的人工操作时,应准确掌握好麻醉剂量和麻醉时间,避免麻醉过度造成损失。