摘要: OTUB1是哺乳动物雌激素信号通路中的一个关键因子,它可以使雌激素受体α(ERα)去泛素化并抑制其转录活性。本研究从实验室拟穴青蟹(Scylla paramamosain)转录组测序数据库中筛选出OTUB基因片段,利用SMART RACE技术克隆得到Sp-OTUB的cDNA全长。该序列全长1 261 bp,包括5'非编码区(5'-UTR)40 bp,开放阅读框(ORF)804 bp和3'非编码区(3'-UTR)417 bp。其ORF编码267个氨基酸,预测其分子量为31 ku。该蛋白序列中包含一个OTU样的半胱氨酸蛋白酶催化结构域和一个由半胱氨酸(C)、天冬氨酸(D)和组氨酸(H)组成的催化三联体。实时定量PCR结果显示,Sp-OTUB在成熟拟穴青蟹各组织器官中均有表达,其中在血淋巴中的表达量最大,精巢中表达量最低。在卵巢发育过程中,Sp-OTUB的表达量在卵巢增值期为最大,与其他各时期具有显著差异;在精巢发育各阶段,Sp-OTUB表达量在精子细胞期达到最大,显著高于精母细胞期和成熟精子期。同源系统进化分析Sp-OTUB与大多数物种的OTUB1聚为一支,与肩突硬蜱(Ixodes scapularis)和紫海胆(Strongylocentrotuspurpuratus)亲缘关系最近。实验结果初步显示Sp-OTUB在拟穴青蟹生殖调控方面可能发挥重要作用。

摘要: 用碳水化合物水平分别为20.34%、25.59%、30.17%、35.30%和39.95%的5种等氮等脂饲料,对初始体质量为(38.11±0.55) mg的拟穴青蟹(Scylla paramamosain)稚蟹进行3周的饲养试验,探讨饲料不同碳水化合物水平对稚蟹生长、体成分和消化酶活性的影响,以期确定拟穴青蟹稚蟹饲料碳水化合物的适宜需要量。结果表明,不同碳水化合物水平饲料对拟穴青蟹稚蟹的成活率、生长均有显著影响(P<0.05),均随碳水化合物水平的升高先显著增大(P<0.05)后显著减小(P<0.05),均在碳水化合物水平为30.17%时达到最大值;随着饲料碳水化合物水平的升高,拟穴青蟹稚蟹的蛋白质和灰分含量也呈先显著升高(P<0.05)后显著降低(P<0.05)的趋势,均在碳水化合物水平为35.30%时达到最大值,而稚蟹的水分和脂肪含量没有显著变化(P>0.05);不同碳水化合物水平饲料组拟穴青蟹稚蟹的蛋白酶和脂肪酶活性的变化不显著(P>0.05),而淀粉酶活性有显著变化(P<0.05),高碳水化合物水平饲料组(35.30%—39.95%)稚蟹的淀粉酶活性显著高于低碳水化合物水平饲料组(20.34%—25.59%,P<0.05)。在研究条件下,饲料碳水化合物水平在25.59%—35.30%内,拟穴青蟹稚蟹均表现出较好的生长率,增重率和碳水化合物水平的回归分析表明,稚蟹饲料碳水化合物的最适添加水平为29.93%。

摘要: 为研究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)不同形态群体对温度变化的适应差异,以Sp1群体(腕节外缘中部都不具有发达的刺)和Sp2群体(至少一只螯足腕节外缘中部具有发达的刺)为研究对象,选用低温胁迫组(8℃)和对照组(20℃)拟穴青蟹肝胰腺为实验材料,进行转录组测序。结果显示,测序共获得81853个Unigene,平均长度为420 bp, N_(50)为1460 bp,其中22.33%为已知基因。差异表达基因筛选发现Sp1群体在低温胁迫下共有15773个Unigene显著差异表达,其中15628个Unigene表达下调, 145个Unigene表达上调,这些Unigene显著富集于细胞质基质等生物学过程和RNA结合、核糖体结构组分等分子功能,并进一步富集在核糖体、剪接体和内质网蛋白质加工等信号通路。Sp2群体在低温胁迫下共有323个Unigene显著差异表达,其中上调114个,下调209个。这些Unigene显著富集于DNA整合等生物学过程和甾体羟化酶活性、碳酸氢盐跨膜转运体活性等分子功能,并进一步富集在赖氨酸降解、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢、精氨酸和脯氨酸的代谢等代谢通路。以上结果表明,水温从20℃骤降至8℃, Sp1群体大量基因表达下调,生理活动大幅度降低,这可能与寒冷的冬季青蟹停止摄食、穴居不动等行为相对应;而Sp2群体仅调整了物质代谢,表明Sp2群体可能对温度骤降的响应较为迟缓。利用RT-qPCR验证了转录组数据,结果证明基于转录组分析比较两种形态群体拟穴青蟹对低温胁迫的响应是可行的,研究结果将应用于拟穴青蟹耐寒优质品种的选育。

摘要: 采用毒性实验方法研究水体中铬离子Cr6+(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mgL-1)胁迫1、3、5、7、9d后对拟穴青蟹组织器官中ATPase、SOD活性的影响,以未添加Cr6+的自然海水组为对照组.结果表明,拟穴青蟹鳃中Ca2+-ATPase、Na+,K+-ATPase活性在Cr6+暴露1d后即被显著抑制(P<0.05),随胁迫时间延长,Cr6+又可诱导拟穴青蟹鳃中Ca2+-ATPase、Na+,K+-ATPase活性升高.Cr6+胁迫下拟穴青蟹鳃、肝胰腺、肌肉中SOD活性均可被显著诱导升高(P<0.05),其中尤以鳃中SOD活性受影响更大.可见铬胁迫对拟穴青蟹生理生化影响显著.