摘要: 以常规PCR技术扩增警用拉布拉多犬(Canis familiaris)的嗅觉受体CfOLF4基因长879bp的目的片段,构建pMD-CfOLF4载体进行T-A克隆。重组质粒测序后与GenBank公布的犬CfOLF4基因进行序列分析比较,旨在了解拉布拉多犬嗅觉受体CfOLF4基因遗传的同源性和变异特性。

摘要: 母性行为是动物以维持幼崽的生存及生理健康为主要目的的一种基本行为，母性行为作为重要的早期经历对动物的个体发展有深远影响。动物的行为在时间和环境中具有一致性，多个行为特征的一致性加权被称为气质特征，气质特征的差异是犬（Canis lupus familiaris）能否顺利通过培训成为导盲犬的决定性因素。其中，胆量是决定导盲犬培训成功与否的重要气质特征。本研究以中国导盲犬大连培训基地的拉布拉多种犬及幼犬为研究对象，探究母性行为水平对幼犬胆量的影响。本研究通过视频观察记录拉布拉多犬哺乳期前21d的母性行为变量时长，对在哺乳区内、身体接触、哺乳和舔舐幼犬4项变量进行主成分分析后将7只实验犬分为母性行为高水平与低水平两组。对两组犬生产的共54只幼犬于6～8周龄时进行幼犬胆量行为测试，根据胆量行为测试的评分标准对幼犬的行为表现进行评分，统计分析母性行为高水平组与低水平组其幼犬的胆量是否存在差异。本研究结果表明，母性行为低水平组的幼犬在胆量测试中面对陌生环境、突然出现的响声刺激、突然打开的雨伞刺激以及陌生人的游戏邀请时均表现出更大的胆量。在被动测试中，母性行为低水平组幼犬的探索潜伏时长显著短于母性行为高水平组幼犬（P <0.05），探索范围显著大于母性行为高水平组幼犬（P <0.05），紧张程度极显著低于母性行为高水平组幼犬（P <0.01）；在金属响声测试中，母性行为低水平组幼犬的惊吓反应（P <0.01）和紧张程度（P<0.01）均极显著低于母性行为高水平组幼犬；在雨伞测试中，母性行为低水平组幼犬的紧张程度显著低于母性行为高水平组幼犬（P <0.05）；在玩具测试中，母性行为低水平组幼犬的玩耍兴趣显著高于母性行为高水平组幼犬（P <0.05），紧张程度显著低于母性行为高水平组幼犬（P <0.05）；在斜坡隧道测试中，母性行为低水平组幼犬的紧张程度显著低于母性行为高水平组幼犬（P <0.05），通过斜坡的用时短于母性行为高水平组幼犬，但经统计检验无显著差异（P>0.05）。本研究的结论为低母性行为水平带给幼犬强度适当的早期生活压力，使幼犬面对新环境刺激时表现出更好的适应能力和较大的胆量。本研究为工作犬种犬的筛选提出新的建议：母性行为水平低的种犬对幼犬胆量的发展有更好的影响。

摘要: 目的 探讨流式细胞分选技术在分离拉布拉多犬X、Y精子方面的应用，并研究拉布拉多犬性别控制(性控)冷冻精液的制备方法。方法 人工按摩刺激法采集8只拉布拉多种公犬精液,利用SX＿MOFLO流式细胞仪展开X、Y精子分离实验，并对分离后的X/Y精子冷冻、解冻后进行精液重分析和品质鉴定。结果 流式细胞仪分选的X/Y精子纯度达到89%以上(89%～91%),X精子平均分离速度(4 260个/s)极显著高于Y精子分离速度(3 930个/s)(P<0.01);常规冷冻精液和X、Y型冷冻精液性别比差异显著(P<0.05);冻融后活率则无明显差异(P>0.05);常规冷冻精液与X、Y型冷冻精液解冻后1 h存活指数差异明显(P<0.05),分别为0.251±0.006、0.054±0.007和0.048±0.006;冻融后顶体完整率差异显著(P<0.05),分别为77.00%±0.98%、84.66%±1.22%和84.01%±1.23%。结论 用流式细胞分选技术可以获得高纯度的拉布拉多犬X/Y冷冻精液,性别比和精液品质达到低剂量人工授精的要求。

摘要: 目的检测拉布拉多犬基因组DNA中与髋关节发育不良密切相关的5个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬的选育提供有效的遗传学诊断方法。方法经影像学诊断,筛选出典型的6只髋关节发育不良和11只正常拉布拉多犬作为实验对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法对17个样本的5个基因中的6个SNP位点:LAMA2(CFA1:70997779),LRR1(CFA8:29247021),SCR(CFA24:28944481),COL6A3(CFA25:51031100,51040259)和FN1(CFA37:25095511)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与髋关节发育不良犬关联度。结果 LAMA2(CFA1:70997779),LRR1(CFA8:29247021),SCR(CFA24:28944481),COL6A3(CFA25:51031100)和FN1(CFA37:25095511)SNP位点的变异型与拉布拉多犬的髋关节发育不良没有显著相关性(P>0.05)。COL6A3(CFA25:51040259)SNP位点的A/A型与拉布拉多犬的髋关节发育不良存在极显著相关性(P=0.007)。结论 COL6A3(CFA25:51040259)SNP位点的A/A型可能成为拉布拉多犬髋关节发育不良的实用性遗传学诊断指标,但尚需大样本确认。

摘要: 目的检测拉布拉多犬基因组DNA中与神经类型密切相关的4个基因中的6个SNP位点,以期为拉布拉多犬神经类型的早期鉴定提供分子遗传学鉴定指标。方法依据中国导盲犬大连培训基地成熟的导盲犬神经类型行为学评估标准,选取典型的安静、活泼、胆小型(弱型)三种神经类型的犬各4只为研究对象,采取静脉血,提取血细胞的基因组DNA样本,采用PCR/测序方法和PCR-RFLP分析法对12个样本4个基因的6个SNP位点:COMT(G482A)、MOAB(T199C)、ABCB1(A985T、T3442C、377-378 ins C)、GNB1L(961-962 ins G)进行变异型检测,并统计分析SNP位点的变异型与神经类型的关联度。结果 COMT基因G482A SNP位点的G/A型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼型和安静型中所占比例(P=0.014;P=0.014),A/A型在活泼型犬中所占比例显著高于安静型和胆小型中所占比例(P=0.025;P=0.025);MAOB基因T199C SNP位点的T/C型在安静型犬中所占比例显著高于其在活泼和胆小型犬中所占比例(P=0.025;P=0.025);ABCB1基因A985T SNP位点的T/A型在活泼型犬中所占比例显著低于其在安静和胆小犬中所占比例(P=0.014;P=0.014);ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型在胆小型犬中所占比例显著高于其在活泼和安静型犬中所占比例(P=0.025;P=0.025);ABCB1基因的377-378 ins C和GNB1L基因的961-962 ins G均没有发现显著性差异(P>0.05)。结论 COMT基因G482A SNP位点的G/A型和A/A型,MAOB基因T199C SNP位点的T/C型,ABCB1基因A985T SNP位点的T/A和ABCB1基因T3442C SNP位点的T/C型与拉布拉多犬神经类型具有显著相关性,可做为拉布拉多犬神经类型早期鉴定的分子遗传诊断指标,但尚需大样本确认。