摘要: 【目的】旨在探究lncRNA17000在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂不同组织和发育阶段中的表达模式及其调控作用，为进一步的功能和机制研究提供基础。【方法】通过RT-PCR验证lncRNA17000在工蜂不同组织中的表达。采用RT-qPCR检测其不同组织和发育阶段的相对表达量。利用LncTar、Miranda、RNAhybrid和TargetScan等一系列软件分析lncRNA17000的顺式、反式和竞争性内源RNA(Competing endogenous RNA, ceRNA)调控作用。【结果】在工蜂的脑、触角、毒腺、中肠、表皮、咽下腺和脂肪体7个组织中均扩增出符合预期大小（约133bp）的目的片段。LncRNA17000在上述7个组织中差异表达，在触角中的表达量最高且显著高于（P<0.05）脂肪体中的表达量。LncRNA17000在工蜂的卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫中差异表达，在7日龄预蛹中的表达量最高且显著高于（P<0.05）3日龄幼虫、8日龄预蛹和12日龄蛹中的表达量。LncRNA17000在6、12、15和18日龄成虫体内的表达量显著低于（P<0.05）1日龄成虫体内的表达量且表达水平随日龄增长而降低。LncRNA17000潜在调控7个上下游基因的转录和2个共表达基因的表达。LncRNA17000可靶向45个miRNA进而靶向66条mRNA，这些靶mRNA涉及23个GO条目和25条KEGG通路。【结论】LncRNA17000在意大利蜜蜂工蜂的不同组织和发育阶段中动态差异表达，在触角和7日龄预蛹中特异性高表达；lncRNA17000可能通过顺式作用调控TFIID亚基11亚型X2基因转录，通过反式作用调控蜜蜂翼视蛋白基因表达，通过ceRNA网络靶向多个miRNA和mRNA进而影响胰岛素、ErbB和mTOR等信号通路。

摘要: 5-羟甲基糠醛（HMF）是一种糖类物质加热变性后极易产生的物质，是特定糖类的降解产物，在蜂群饲养过程中若不规范操作则可能从蜜蜂饲料中产生这种物质。尽管其对哺乳动物的毒理效应已有明确研究，但关于HMF对蜜蜂神经毒性的探索仍十分有限，尤其在学习认知影响方面存在研究空白。本研究通过饲喂意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂一定浓度的HMF并进行气味联想性学习测试受试蜜蜂的学习认知能力，目的在于探究HMF对蜜蜂的学习认知能力是否产生影响并在分子水平上进行验证，为此后实际养蜂生产和蜂群饲养管理中的HMF暴露提供风险评估。本试验从蜂群中抓取6日龄意大利蜜蜂并于恒温恒湿环境下笼养10 d。期间处理组工蜂自由取食含1 500 ng/μL HMF的30%(w/v)蔗糖溶液，对照组则自由取食30%蔗糖溶液。随后使用气味学习装置对16日龄工蜂进行伸吻反应（Proboscis extension response,PER）测试，并通过qRT-PCR对蜜蜂头部学习相关基因表达量进行差异分析。试验结果表明，处理组与对照组蜜蜂在10 d用药饲养过程中死亡率无显著差异（P>0.05）。PER结果则表明处理组蜜蜂伸吻率明显低于对照组，且差异显著（P<0.05）。处理组相较于对照组蜜蜂头部学习相关基因TpnCⅢa,OPN4,Obp 4和PRKACB显著下调表达；pkc则显著上调表达。综上结果表明，1 500 ng/μL HMF不会导致蜜蜂急性死亡，而蜜蜂学习能力会显著降低，同时影响蜜蜂头部学习相关基因的表达。

摘要: 【目的】本研究旨在检测ass-milR0037-3p及其关键靶基因在蜜蜂球囊菌Ascosphaera apis侵染中华蜜蜂Apis cerana cerana和意大利蜜蜂A.mellifera ligustica工蜂幼虫过程中的表达模式，为深入探究ass-milR0037-3p调控蜜蜂球囊菌侵染机制提供基础。【方法】使用相关软件预测蜜蜂球囊菌ass-milR0037-3p的靶基因并进行GO和KEGG数据库注释。中华蜜蜂和意大利蜜蜂3日龄工蜂幼虫饲喂含1×10～7孢子/mL蜜蜂球囊菌的饲料后采用stem-loop RT-PCR和RT-qPCR分别验证中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中ass-milR0037-3p的表达和检测中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中ass-milR0037-3p及其2个关键靶基因组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase)基因ESA1和黄素胺氧化还原酶(flavin containing amine oxidase)基因FAO的表达量。【结果】ass-milR0037-3p靶向225个基因，可注释到繁殖、结合和细胞等28个GO条目以及剪接体、次生代谢产物的生物合成及氨基糖和核苷酸糖代谢等105条KEGG通路。蜜蜂球囊菌接种后，中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫肠道中均扩增出ass-milR0037-3p的目的片段；相较于中华蜜蜂4日龄工蜂幼虫，5和6日龄工蜂幼虫肠道中ass-milR0037-3p的表达量均显著上调并且ESA1和FAO的表达量均显著下调；意大利蜜蜂5日龄工蜂幼虫肠道中ass-milR0037-3p的表达量比4日龄工蜂幼虫肠道中的上调，6日龄工蜂幼虫肠道中的比4日龄工蜂幼虫肠道中的显著上调；靶基因ESA1和FAO的表达量在意大利蜜蜂5日龄工蜂幼虫肠道中均比4日龄工蜂幼虫肠道中的上调，在6日龄工蜂幼虫肠道中比4日龄工蜂幼虫肠道中的显著上调。【结论】ass-milR0037-3p通过负调控FAO表达潜在调节蜜蜂球囊菌侵染中华蜜蜂工蜂幼虫的过程，通过正调控ESA1表达潜在影响蜜蜂球囊菌侵染意大利蜜蜂工蜂幼虫的过程。研究结果为阐明milRNA通过调控靶基因的表达来响应蜜蜂球囊菌侵染蜜蜂幼虫肠道的机制提供了基础。

摘要: 本研究旨在利用已获得的纳米孔长读段测序数据鉴定和分析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica体液免疫通路相关基因及全长转录本，为深入开展功能研究提供资源与基础。使用Blast工具将鉴定到的所有全长转录本比对Nr数据库以筛选出体液免疫通路相关基因和剪接体。采用gffcompare软件将全长转录本与西方蜜蜂Apis mellifera参考基因组（Amel＿HAv3.1）上注释的转录本进行比较来优化已注释基因的结构。利用TAPIS pipeline预测和分析相关基因的可变多聚腺苷酸化（Alternative polyadenylation,APA）位点，再通过TBtools软件鉴定APA位点上游的基序。使用Astalavista软件鉴定可变剪接（Alternative splicing,AS）事件，进而通过IGV浏览器进行结构可视化。通过RT-PCR验证AS事件的真实性。分别鉴定到Toll信号通路相关的26个基因和41条剪接体，Imd信号通路相关的9个基因和11条剪接体，JNK-MAPK-p38信号通路相关的18个基因和21条剪接体，JAK-STAT信号通路相关的9个基因和13条剪接体。共对西方蜜蜂参考基因组上注释到体液免疫通路的20个基因进行了结构优化，正链和负链结构优化的基因分别有5个和15个，5′端和3′端延长的基因有13个和7个，其中有两个基因(LOC724728;LOC411861)的5′端和3′端都有延长。共鉴定到体液免疫通路相关基因的69次AS事件，包括2次可变3′端剪接（Alternative 3′splice site,A3SS）、17次内含子保留（Intron retention,IR）、14次可变5′端剪接（Alternative 5′splice site,A5SS）和36次外显子跳跃（Exon skipping,ES）。RT-PCR结果显示目的片段大小符合预期，证实了随机选择的6次AS事件的真实性。共鉴定到体液免疫通路相关的40个基因含1个及以上APA位点。在APA位点上游鉴定到多个基序，一致性序列为：GGWRRWRTHAARHTWKSYGAYTTTGGTRTWTCNGSDHRMHTDRYHGMWWS。通过3′RACE证实了2个基因的APA位点真实性。鉴定到意大利蜜蜂体液免疫通路相关的62个基因和86条剪接体，优化了西方蜜蜂体液免疫通路相关的20个基因结构，发掘出体液免疫通路相关基因的69次AS事件与106个APA位点，证实了相关基因的AS事件和APA位点的真实性。

摘要: 蜜蜂Apis mellifera L.蜂群中的工蜂卵巢发育和工蜂产卵现象受多种因素控制,了解其影响因素对养蜂生产具有重要意义。本研究将意大利蜜蜂蜂群设置为囚王群(tg1)、无王有子群(tg2)、无王无子群(tg3)以及正常有王蜂群(CK)4个试验组,通过对工蜂卵巢管的显微观察,确定不同处理组工蜂在不同时间段内卵巢的发育情况。结果表明:随着时间的延长,与CK处理组相比,tg3处理组中的工蜂卵巢发育水平最高,tg2次之,tg1最低;在31d时,4个处理组两两之间差异均达到显著水平(P<0.05)。tg1、tg2和tg3处理组中工蜂产卵前期时间分别为35、22和17d,而CK蜂群在试验期内未出现工蜂产卵现象;tg2和tg3处理组的工蜂产卵的封盖前期时间分别为8和6d,而tg1和CK组在试验期内未出现子房封盖现象。蜂群失王时间过长会刺激工蜂卵巢发育,并导致其产卵;蜂群的短期失王和蜂王老化也会刺激工蜂卵巢发育,但是刺激程度较低;蜂群中的蜂子能抑制工蜂卵巢管的发育,因此在蜂群短时间失王时可以适当地补充子脾延缓工蜂卵巢发育。