摘要: 【目的】复眼作为大多数昆虫最重要的视觉器官，其小眼数量和体积大小一定程度上反映了昆虫视觉能力的强弱。视蛋白作为视觉感知中的功能性分子，在光信号转导过程中具有重要作用，基因的表达受到外源和内源等多种因素的影响。本研究旨在探讨蜂王和工蜂复眼形态发育及视蛋白基因的时间表达模式。【方法】选取3群群势相当的意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica蜂群进行人工育王，采集蜂王与工蜂蛹期各日龄蜂蛹及新蜂样品，采用扫描电镜技术观察蜂王和工蜂复眼的外部形态结构，利用Image J软件测量复眼短长轴、面积、小眼个数、小眼面积和小眼直径；采用实时定量PCR技术检测蜂王和工蜂蛹期紫外光视蛋白基因（UV-sensitiveopsin,UVop）、绿光视蛋白基因（Greenopsin,Lop1）和蓝光视蛋白基因（Blue-sensitive opsin,BLop）3种视蛋白基因的mRNA表达水平。【结果】蜂王和工蜂均是在蛹期末龄（出房前）分化出小眼；出房后，蜂王和工蜂复眼面积均变小（P＜0.001），蜂王复眼短轴（P＜0.05）、面积（P＜0.001）、小眼个数（P＜0.001）均显著小于工蜂，但蜂王单个小眼面积（P＜0.001）、小眼直径（P＜0.001）显著大于工蜂。蜂王和工蜂3种视蛋白基因的m RNA表达水平出房后比出房前显著增加（P＜0.05）；在蜂蛹前期，UVop的mRNA表达水平高于Lop1和BLop的表达水平，蜂王视蛋白基因UVop已经表达工蜂在蛹中后期才表达；在化蛹中后期Lop1mRNA表达水平显著增加并超过UVop和BLop的表达，成为表达量最高的视蛋白。【结论】蜂王小眼个数低于工蜂，推测工蜂视觉能力优于蜂王。蜂王和工蜂视蛋白表达模式存在级型特异性，主要表现在蛹期UVop的mRNA表达水平上。视蛋白的表达模式与体内视觉细胞的发育存在一定的联系，研究结果可为进一步探索意大利蜜蜂蜂王与工蜂的复眼发育规律和感光系统的规律提供一定的理论基础。

摘要: 【目的】杀虫剂甲氰菊酯广泛应用于农业生产中，但有关该杀虫剂对蜜蜂健康影响的研究较少。本研究旨在探究甲氰菊酯对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica生存、取食、免疫和解毒相关基因表达以及肠道菌群的影响。【方法】利用亚致死浓度的甲氰菊酯饲喂意大利蜜蜂7 d后，统计各组意大利蜜蜂的生存率和取食量；采用荧光定量PCR技术检测蜜蜂解毒和免疫相关基因表达的变化；利用16SrDNA测序技术检测蜜蜂肠道菌群组成结构的变化。【结果】甲氰菊酯能显著降低蜜蜂的生存率和糖水取食量（P<0.05）；甲氰菊酯显著抑制了蜜蜂Hymenoptaecin、Apidaecin和Cyp9q1的表达（P<0.05）,5 mg/L剂量的甲氰菊酯显著诱导了Defensin的上调表达（P<0.05）。与对照相比，5 mg/L和1 mg/L剂量的甲氰菊酯对Abaecin表达的影响虽无显著性差异，但是5 mg/L处理组Abaecin的表达水平显著高于1 mg/L处理组的（P<0.05）；甲氰菊酯对意大利蜜蜂肠道菌群的Alpha多样性和Beta多样性无显著影响，但对特定肠道菌的丰度造成了影响。【结论】甲氰菊酯的曝露可能对意大利蜜蜂的免疫、解毒系统以及肠道菌群的组成产生了一定的影响。

摘要: 【目的】本文旨在探究意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫饲粮中添加叶酸对雌性蜜蜂DNA甲基化及发育的影响。【方法】从姊妹蜂群中选用2日龄意大利蜜蜂雌性幼虫，平均分为6组，任选一组以饲喂不添加叶酸的基础日粮为对照组（CK），其余5组为试验组，分别饲喂添加0.02%、0.04%、0.06%、0.08%和0.10%叶酸的基础日粮。在室内温度（34.5±0.5）℃，相对湿度为90%±5%的条件下，按照饲养流程饲养意大利蜜蜂至出房。取3-5日龄的幼虫，测定叶酸代谢指标及DNA甲基化相关指标，计算新蜂发育历期，称量新蜂重。【结果】（1）添加叶酸（FA）水平为0.04%的试验组，3、4和5日龄幼虫蜂体内叶酸（FA）和5-甲基四氢叶酸（5-MTHF）含量显著高于对照组（P <0.05），并且显著提高了幼虫时期蜂体的二氢叶酸还原酶（DHFR）基因、丝氨酸羟甲基转移酶（SHMT）基因和亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因的表达量（P <0.05），显著提高了MTHFR酶活性（P <0.05）。（2）与对照组相比，添加叶酸为0.04%的试验组显著提高了3日龄幼虫DNA甲基转移酶1a(Dnmt1a)基因的表达量（P <0.05），且显著提高了3日龄和4日龄幼虫的DNA甲基转移酶1(DNMT1)酶活性（P <0.05）。添加0.04%的叶酸试验组相较于对照组显著降低了3日龄幼虫DNA甲基转移酶3(DNMT3)的酶活性（P <0.05），显著降低了4日龄幼虫Dnmt3基因的表达量和DNMT3酶活性（P <0.05）。叶酸添加剂量为0.04%时，4日龄蜂体DNA甲基化水平显著降低（P <0.05）。（3）与对照组相比，添加0.04%的叶酸试验组的意大利蜜蜂平均发育历期（19.95 d）显著小于对照组（P <0.05），平均新蜂重（0.17 g）显著大于对照组（P <0.05）。【结论】在基础日粮中添加适量叶酸能够降低4日龄意大利蜜蜂幼虫的DNA甲基化水平，并能缩短发育历期和增加新蜂重。在饲粮中添加0.04%的叶酸有助于雌性意大利蜜蜂幼虫向蜂王方向发育。

摘要: 【目的】本研究分析意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica中细胞色素P450基因CYP6BD1和CYP49A1在不同日龄工蜂及相同日龄不同职能工蜂的附肢中的表达模式,旨在更好了解细胞色素P450基因在不同职能工蜂处理外源物质过程中的作用。【方法】通过组建蜂群收取3日龄工蜂、10日龄哺育蜂、21日龄采集蜂和21日龄哺育蜂样本,利用荧光定量PCR技术分别检测细胞色素P450基因CYP6BD1和CYP49A1在附肢(触角、前足、中足、后足)中表达情况。【结果】基因CYP6BD1在3日龄工蜂、10日龄哺育蜂、21日龄采集蜂各附肢中的表达量均依次显著增加,且该基因在21日采集蜂各附肢中的表达量显著高于21日哺育蜂;与CYP6BD1基因相比,基因CYP49A1在不同职能工蜂附肢中的表达量均较低,但在3日龄工蜂各附肢中表达相对较高。【结论】基因CYP6BD1和CYP49A1分别在采集蜂和3日龄工蜂各附肢中高量表达,2个基因在降解蜂群外和蜂群内部外源性物质中发挥重要作用,为进一步研究膜翅目昆虫的职能分工提供新的视角。

摘要: 【目的】雄蜂对蜂群繁衍有着非常重要的作用。本研究旨在探究吡虫啉对意大利蜜蜂Apis mellifera Ligustica雄蜂生长发育和基因表达产生的影响。【方法】以意大利蜜蜂雄蜂为研究对象,分别以0.00001、0.0001和0.001μg/μL浓度的吡虫啉对雄蜂幼虫进行连续饲喂处理。每天观察并记录幼虫的发育形态及死亡率,在雄蜂幼虫后期(移虫后6d)测量幼虫体重。利用Illumina HiSeq测序技术对经吡虫啉处理的雄蜂进行转录组测序,进而对差异表达基因进行深入分析。【结果】取食吡虫啉后的雄蜂幼虫,体重低于正常雄蜂,当浓度高于0.0001μg/μL时差异显著;雄蜂幼虫取食吡虫啉后出现死亡现象,且死亡率随吡虫啉浓度的升高而增大;差异表达基因分析结果上调与下调基因数量分别为390个和130个。GO富集分析结果上调基因共分布于55个GO条目,富集基因数量最多的是细胞进程、细胞、细胞组件、细胞膜、细胞膜组件、结合,下调基因共分布于48个GO条目,富集基因数量最多的是细胞进程、细胞、细胞组件。富集在有关生殖功能的差异表达基因中,上调基因数量为21个,下调基因数量为5个。KEGG代谢通路富集分析结果上调基因富集在159个通路上,其中富集基因数最多的是蛋白质消化吸收和神经活性配体-受体相互作用通路。下调基因富集在71个通路上,其中富集基因数最多的是溶酶体、胰液分泌、神经活性配体-受体相互作用通路。【结论】吡虫啉能抑制意大利蜜蜂雄蜂的生长发育,甚至造成幼虫死亡,同时,可以影响雄蜂的神经系统、代谢系统和生殖系统等。本研究结果为蜜蜂资源保护提供理论依据。