摘要: 用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＳａｌＩ将恶性疟原虫复合抗原基因ＰｆＣＭＲ从质粒ｐＷＲ４５０－１／ＰｆＣＭＲ中切下，插入质粒ｐＢＶ２２０／ＩＬ－２中人白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因的ＥｃｏＲＩ位点。重组质粒转化大肠杆菌ＤＨ５ａ，通过ＰＣＲ扩增和酶切鉴定，筛选出正向插入的重组载体ｐＢＶ２２０／ＰｆＣＭＲ－ＩＬ－２。为表达ＰｆＣＭＲ－ＩＬ－２融合蛋白打下基础。

摘要: 本文设计并化学合成一条含有恶性疟原虫裂殖子表面抗原（ＭＳＡ１、ＭＳＡ２）、环子孢子蛋白（ＣＳＰ）、环状体感染红细胞表面抗原（ＲＥＳＡ）等不同生活史期的４种抗原，共６个表位的复合基因（ＰｆＣＭＲ）。该基因含２个粘性未端，共分８个片段，采用“缺口填补法”接成双链ＤＮＡ，再与噬菌体Ｍ１３ｍｐ１８分别经ＢａｍＨＩ、ＥｃｏＲＩ双酶切后回收、纯化、重组，并转化ＥｃｏｌｉＪｍ１０９，经ＰＣＲ和酶切鉴定，ＤＮＡ序列分析测定，证实阳性克隆子Ｍ１３ｍｐ１８－Ａ４与预设计基因顺序完全一致。

摘要: 恶性疟原虫裂殖子表面主要蛋白－１（ＭＳＡ１），又称Ｐ１９５，与人红细胞具有结合作用，这种结合是裂殖子识别红细胞的基础。为了确定Ｐ１９５蛋白与识别有关的位点，本研究在大肠杆菌中分８段表达了ＭＡＤ２０株恶性疟原虫的Ｐ１９５蛋白。各段蛋白用镍亲和层析柱分离，然后复性。在体外培养疟原虫至成熟裂殖体期，将各段蛋白分别加入到培养基上清中，继续培养２４小时，检查红细胞感染率，通过感染率了解各段蛋白对裂殖子入侵红细胞的影响。结果发现Ｐ１９５蛋白中氨基酸序列为３８４－５９５的一段蛋白（Ｍ６），呈剂量依赖性抑制恶性疟原虫裂殖子入侵人红细胞，且Ｍ６对疟原虫生长无细胞毒性作用。这表明Ｍ６可能含红细胞结合位点，该位点与裂殖子竞争性结合红细胞，而使感染率下降

摘要: 设计３对针对恶性疟原虫裂殖子表面蛋白２（ＭＳＰ２）基因特异的引物，采用套式聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术，扩增ＭＳＰ２基因的中间多态区目的基因，并应用于泰国Ｂｏｒａｉ疟区恶性疟患者血标本分析。结果表明：自然感染的恶性疟原虫株群中，ＭＳＰ２基因存在着多态性。在１５２份恶性疟感染血样中，发现１７种不同的ＭＳＰ２等位基因。其中１２种属于Ｉｎｄｏｃｈｉｎａ（ＩＣ）等位基因家族，５种属于ＦＣ２７等位基因家族。ＩＣ等位基因型较为常见。在９个月的流行季节，ＩＣ和ＦＣ２７等位基因型的频率保持相对稳定。较高程度的两种等位基因型混合感染的现象也被发现。因此提示，套式ＰＣＲ方法不仅提高了疟疾诊断水平，更重要的是，为疟疾的流行病学研究开辟了新的途径

摘要: 巢式ＰＣＲ方法被应用于泰国疟区（Ｂｏｒａｉ）恶性疟原虫的基因分型。应用特异的等位基因引物扩增了恶性疟原虫裂殖子表面蛋白１（ＭＳＰ１）基因的１、４变异多态区。以凝胶电泳分析扩增的目的基因片段。结果表明：共分别检测出恶性疟原虫６个ＭＡＤ２０等位基因型、４个Ｋ１和１个ＲＯ３３等位基因型。在９个月的流行季节，上述虫株的等位基因频率没有明显的改变，关存在较高程度的恶性疟原虫不同等位基因株的混合感染。本文进一步阐明了巢式ＰＣＲ技术在疟疾流行病学上的应用前景及优点。