摘要: 云南６个地区恒河猴蛋白多态及遗传多样性研究＊ＧＥＮＥＴＩＣＤＩＶＥＲＳＩＴＹＡＭＯＮＧＭａｃａｃａｍｕｌａｔａＦＲＯＭＳＩＸＲＥＧＩＯＮＳＩＮＹＵＮＮＡＮＰＲＯＶＩＮＣＥＢＡＳＥＤＯＮＰＲＯＴＥＩＮＥＬＥＣＴＲＯＰＨＯＲＥＳＩＳ关键词恒河猴，蛋白电泳...

摘要: 本实验用５只恒河猴人工造成眼角膜创伤，基本一致地除去双眼角膜上皮细胞层，仅边缘部分残留有少量的角膜细胞。均以猴的右眼作实验处理，每日滴３次表皮生长因子（ＥＧＦ）溶液（生理盐水配制，浓度１３０μｇ／ｍｌ）；均以猴的左眼作对照，每日仅滴３次生理盐水。每日用荧光素钠溶液滴眼，检查眼角膜创面的恢复进展情况。结果实验眼的创面在第３－４天完全恢复，对照眼则在第５－６天恢复，实验眼比对照眼约提前２－３天恢复，表明表皮生长因子对恒河猴创伤眼角膜的恢复具有明显的促进作用。

摘要: 利用序列特异引物聚合酶链反应(polymerase chain reactionsequence-specific primers,PCR-SSP)方法扩增中国恒河猴的主要组织相容性复合体II类基因Mamu-DRB*W101、-DRB*W201,初步了解中国恒河猴中Mamu-DRB*W101、-DRB*W201基因的阳性率。采集中国恒河猴静脉血,用DNA提取试剂盒提取全血DNA,分别用Mamu-DRB*W101、-DRB*W201特异引物PCR扩增Mamu-DRB*W101、-DRB*W201基因的第二外显子区域,并对扩增出的阳性条带进行测序,与已知序列对比验证序列是否正确。共检测了来自136只中国恒河猴的样本,PCR检测出Mamu-DRB*W101阳性个体10只,Mamu-DRB*W201阳性个体也是10只,其阳性个体所占比率均为7.35%。测序结果表明,PCR扩增产物的核苷酸序列与基因库中的序列完全一致。本研究表明中国恒河猴中存在Mamu-DRB*W101、-DRB*W201基因阳性个体,为中国恒河猴在AIDS研究中的应用及进一步分析中国恒河猴MHC II类基因提供了基础。

摘要: 探索恒河猴骨髓间质干细胞(MSC)的体外分离培养方法,为其应用提供实验基础。取恒河猴骨髓细胞悬液,经梯度离心去除大部分血细胞,取含有MSC的中间单核细胞层,在含10%胎牛血清及1ng/mL碱性成纤维细胞生长因子的L-DMEM中培养扩增,并不断换液去除杂细胞,经过18d的原代培养,获得呈致密单层生长的MSC,其形态为较规则的长梭形细胞,排列有方向性,呈现一定的漩涡状、辐射状生长趋势。将原代细胞以1∶2传代,传代培养后期,细胞增殖速度逐渐变缓,细胞形态逐渐出现三角形、多边形及扁平宽大形等不规则形态。结果显示,恒河猴骨髓间质干细胞可在体外进行传代培养,但需进一步优化其培养条件。

摘要: 为筛选出与认知、记忆相关的脑部表达基因及基因家族,利用TRIzol试剂从恒河猴大脑前额叶组织抽提总RNA,再用纯化试剂盒从总RNA中成功纯化出mRNA。按照Stratagene公司的cDNASynthesisKit(200401)、ZAP-cDNASynthesisKit(200400)和ZAP-cDNAGigapackⅢGoldCloningKit(200450)三个试剂盒的操作说明,构建了恒河猴大脑前额叶组织的cDNA文库。文库总库容为2·0×106克隆;绝大多数的cDNA插入片段≥0·5kb,平均长度≈1·0kb;cDNA片段与噬菌体载体重组率为97·3%。文库各项指标均达要求,为克隆大脑PFC区表达基因、测定基因编码区序列、揭示具有多种剪切组合模式等提供了可靠资源,也为相关基因表达调控的研究提供了方便。