摘要: 目的 建立实验用犬人工感染人源强毒力型弓形虫的发病模型。方法 将3只76日龄人工哺乳、正压隔离器内生长的实验用比格犬腹腔注射1.5×10～7个RH株速殖子，每日2次检测直肠体温、采集口腔拭子、直肠拭子，感染8 d后(8 dpi)安乐死所有动物。利用PCR检测拭子和血液中的弓形虫B1基因，利用荧光定量法检测8 dpi犬主要组织脏器中弓形虫529 bp重复片段的拷贝数，并对主要脏器进行组织病理学检测。结果 结果表明3只实验犬在4～5 dpi均出现了一过性体温升高，轻微腹泻；2～6 dpi的咽拭子或肛拭子中能检测到弓形虫B1基因的核酸，且肛拭子阳性率高于咽拭子；8 dpi剖检后，均产生较多腹水；肝组织均出现明显的炎性变化；盲肠和肝中的弓形虫529 bp片段的核酸拷贝数最高。结论 利用SPF级比格犬腹腔接种弓形虫RH株，主要引起一过性体温升高和短时腹泻，可导致肝组织变性和坏死，发病模型较温和。

摘要: 目的 建立实验动物弓形虫TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法，并对其进行初步应用。方法 通过比对美国国家生物技术信息中心（NCBI）发表的弓形虫各毒株序列，选取其529 bp重复序列保守区域设计引物探针，建立弓形虫的荧光定量PCR方法。随后对方法的特异性和敏感性进行检验；取浓度为10～6～10²copies/μL 10倍系列稀释的质粒标准品，每个浓度做3个平行，重复检测3次，计算组内和组间变异系数，评估方法的重复性和稳定性；用建立的荧光定量PCR方法及国标推荐的PCR方法检测14份犬组织样品和66份猪全血样品，以评估此方法在实际应用中的检测能力。结果 建立的弓形虫荧光定量PCR方法在10～8～10¹copies/μL范围Ct值与质粒浓度呈线性关系，标准曲线Slope为-3.285,R²值为1,扩增效率为101.663%。可检测到的弓形虫最低浓度为10¹copies/μL;与其他14种实验猪常见病原不发生交叉反应；重复检测10～6～10²copies/μL质粒标准品，组内变异系数小于1.21%,组间变异系数小于0.62%。用建立的弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法对14份犬组织样品和66份猪全血样品进行检测，结果显示，弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法检测的阳性率分别为10%（8/80）和7.5%（6/80）,阳性符合率达到100%。结论 建立的弓形虫荧光定量PCR方法可以有效地检测弓形虫，为实验动物弓形虫日常监测提供良好的方法。