摘要: 目的克隆广西巴马小型猪载脂蛋白E(ApoE)基因外显子2片段并分析该片段的多态性,为建立广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型奠定基础。方法以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,PCR扩增ApoE基因片段,应用PCR-SSCP方法分析其多态性。结果克隆获得长237 bp的ApoE基因外显子2片段,测序结果比对参考序列同源性为100%。PCR-SSCP分析发现在该片段的229位点存在多态性,表现为AA型、AT型和TT型3种基因型。结论成功克隆广西巴马小型猪ApoE基因外显子2片段,该片段存在多态性,有AA、AT和TT 3种基因型,基因型频率分别为0.302、0.489和0.209。

摘要: 目的 比较巴马小型猪、SD大鼠、C57BL/6小鼠三种动物胰腺组织单细胞解离的效率和效果。方法 分别将巴马小型猪、SD大鼠、C57BL/6小鼠麻醉后取新鲜胰腺组织，进行单细胞解离制备单细胞悬液。然后采用吖啶橙/碘化丙啶染色分别标记所有细胞核酸及死细胞核酸，应用全自动细胞荧光分析仪采集图像，观察细胞形态，计算细胞平均直径及平均圆度；根据吖啶橙/碘化丙啶染色情况，计算细胞活率、总细胞浓度和活细胞浓度。并对三种动物胰腺组织单细胞悬液各参数进行比较。结果 三种动物胰腺组织单细胞悬液细胞形态完整、边界清楚，均有一定程度的结团。SD大鼠胰腺细胞的平均直径最大，C57BL/6小鼠细胞平均圆度最大。巴马小型猪和SD大鼠细胞活率较高，巴马小型猪总细胞浓度和活细胞浓度最高。结论 成功制备了巴马小型猪、SD大鼠、C57BL/6小鼠三种动物胰腺组织单细胞悬液，为后续单细胞测序的开展奠定了基础。

摘要: 胰腺是重要的消化器官。以往关于猪胰腺的解剖组织学研究,主要侧重于血管和导管的分布。本研究利用本课题和其他课题中的24头对照组动物,观察和测定巴马小型猪胰腺的组织形态学数据。结果表明:巴马小型猪的胰腺形态变异较大,大体结构可分为3个叶,即脾叶、十二指肠叶和连接叶;初步分为3种类型,即标准型、纤细型和粗壮型; 24头猪中,3种类型分别占比16/24、6/24和2/24。胰腺占比体质量的0.09%～0.15%。巴马小型猪的胰岛普遍较小,以超小胰岛居多。胰岛占比胰腺的1.52%～4.98%。胰岛β细胞占比体质量的0.012‰～0.024‰。

摘要: 目的探讨高脂高糖饲料对巴马小型猪脂肪分布与血液生化指标的影响。方法巴马小型猪14头,实验组8头,为本实验室培育的2型糖尿病易感小型猪,饲喂高脂高糖饲料30周;对照组6头饲喂正常饲料。30周后测定体型系数、CT扫描脂肪含量、采集血液检测生化指标,比较实验组与对照组的差异。结果高脂高糖饲料饲喂30周后实验组动物与对照组动物在体质量、体质指数(BMI)、脂肪总含量差异显著(P<0. 05),内脏脂肪含量差异极显著(P<0. 01);血液生化指标中胰岛素、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三脂与对照组相比差异极为显著(P<0. 01),低密脂蛋白胆固醇与对照组相比差异显著(P<0. 05)。此外,实验组巴马小型猪血清蛋白、肌酸酐与对照组差异显著(P<0. 05);尿酸、尿素与对照组差异极显著(P<0. 01),显示实验组小型猪呈现肾损伤。结论高脂高糖饮食能够引起巴马小型猪脂肪堆积,内脏脂肪堆积尤为明显,血液生化指标呈高脂血症伴有肾功能的损伤。

摘要: 目的探讨全身麻醉对高糖高脂饲料诱导的2型糖尿病巴马小型猪空腹血糖的影响。方法巴马小型猪16头随机分为2组每组8头,对照组为正常饲料组,实验组为高糖高脂饲料诱导组。对16头巴马小型猪分别在全身麻醉前后测定空腹血糖,麻醉前后的血糖值进行组内、组间统计分析。结果两组小型猪在麻醉前后空腹血糖值差异显著,高糖高脂饲料组麻醉后空腹血糖值升高与对照组差异极显著。结论全身麻醉后巴马小型猪空腹血糖值明显升高,高糖高脂诱导的巴马小型猪2型糖尿病动物模型空腹血糖升高更为显著。