摘要: 【目的】克隆中华蜜蜂Apis cerana cerana细胞色素CYP9E2基因的完整编码区序列,分析CYP9E2基因在工蜂体内的表达特征,为研究该基因的生物学功能提供理论基础。【方法】以解剖获得的中华蜜蜂采集蜂中肠组织为材料,提取总RNA。利用RT-PCR技术克隆中华蜜蜂CYP9E2基因的编码区。采用多种生物信息学软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,利用荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR)分析其在中华蜜蜂工蜂成虫期不同阶段(初生蜂、哺育蜂、守卫蜂以及采集蜂)头部和中肠组织中的相对表达量及在饲喂氟氯苯菊酯后工蜂中肠组织中的表达变化。【结果】克隆获得中华蜜蜂CYP9E2基因(命名为Ac CYP9E2)mRNA序列,长度为1 600 bp(Gen Bank登录号:KX394629),编码区长1 494 bp,编码497个氨基酸,其蛋白质分子量为57.026k D,等电点为8.32。系统发育树显示,中华蜜蜂Ac CYP9E2与西方蜜蜂Apis mellifera、小蜜蜂Apis florea CYP9E2基因聚成一支。对中华蜜蜂工蜂成虫期不同阶段头部和中肠组织Ac CYP9E2相对表达量测定发现,该基因在中华蜜蜂工蜂成虫期不同阶段的表达量存在一定差异,其中,采集蜂头部和中肠组织中Ac CYP9E2相对表达量均显著高于初生蜂、哺育蜂以及守卫蜂(P<0.05),而且4个阶段工蜂中肠组织中的Ac CYP9E2相对表达量均显著高于其头部(P<0.05)。饲喂氟氯苯菊酯后,工蜂中肠组织中Ac CYP9E2的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。【结论】推测Ac CYP9E2可能参与了中华蜜蜂机体外源物质的代谢与解毒过程。

摘要: 【目的】评价日粮中不同水平亮氨酸对繁殖期意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica蜂群群势及工蜂发育的影响。【方法】选取重庆荣昌本地繁殖期意大利蜜蜂21群,随机分为7组,分别饲喂添加0,15.30,17.50,26.25,35.00,43.75和52.5 g/kg亮氨酸的试验日粮,每12 d测定各组蜂群群势、封盖子量、蜂群取食量和营造王台情况,24 d后测定蜂群采集行为、工蜂初生重、工蜂虫体蛋白质含量及工蜂寿命。【结果】当亮氨酸添加水平为43.75和52.50 g/kg时能够显著提高繁殖期意大利蜜蜂的蜂群群势、封盖子量、蜂群取食量及采集行为(P<0.05)。与空白对照组相比,基础日粮组及各亮氨酸添加组的新出房蜂和6日龄幼虫体蛋白质含量较高(P<0.05);各亮氨酸添加组的工蜂初生重显著高于空白组(P<0.05);不同亮氨酸添加水平对意大利蜜蜂工蜂寿命影响较小。此外,亮氨酸添加水平26.25,35.00和43.75 g/kg能够在饲喂0-24 d时促进蜂群营造自然王台,刺激蜂群分蜂。【结论】配方日粮中43.75和52.5 g/kg的亮氨酸能够显著促进繁殖期意大利蜜蜂蜂群发展,其中43.75 g/kg的亮氨酸饲喂量还能刺激蜂群营造自然王台,激发蜂群分蜂。

摘要: 西方蜜蜂Apis mellifera作为典型的社会性昆虫,最重要的特征是生殖劳动分工。蜂王垄断蜂群的生殖权利,工蜂生殖功能受到抑制,从事除产卵和交配以外的所有职能。而在无政府主义蜂群中,即使蜂王存在,也有较多工蜂的卵巢激活并产卵,蜂群中大多数雄蜂是工蜂的后代。这些特殊蜂群为正常蜂群工蜂不育机制研究提供了绝佳的反例材料。本文对无政府主义蜂群的行为特征、产生条件、遗传基础等研究进行了综述。无政府主义蜂群中有较多的工蜂产卵,且工蜂所产卵能够逃避工蜂监督,这种行为的产生受环境、遗传组成、基因表达等多种因素的影响,并且遗传结构体系复杂,参与调控的基因数量多。无政府主义蜂群行为机制的研究为工蜂不育机制的揭示及其他社会性昆虫工职不育基因的筛选和功能研究提供借鉴。

摘要: 从意蜂Apismellifera工蜂体内分离提纯酸性磷酸酶 (ACPase,EC3 1 3 2 ) ,并对其性质进行了研究。将工蜂酸性磷酸酶的初提物经分段盐析、DEAE SepharoseFF离子交换层析及SephadexG 2 0 0凝胶过滤等纯化步骤 ,得到经聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一蛋白区带的酶液。提纯倍数为 77 2 4 ,酶液比活力为 16 2 2U mg(对硝基苯磷酸二钠作底物 )。利用凝胶过滤法测定酶的相对分子质量为 135kD ,SDS PAGE测定酶的亚基相对分子质量为 6 3 1kD。酶的等电点为 4 4 6和 4 79。非还原 还原 (NR R)单向、双向SDS PAGE显示酶分子含有链内二硫键。对二级结构圆二色谱分析显示 ,酶分子中α 螺旋占 13 84 % ,β 折叠占2 5 6 8% ,无规则卷曲占 5 6 34%。氨基酸组成分析结果表明 ,酸性磷酸酶约含有 5 0 7个氨基酸残基 ,富含门冬氨酸残基。

摘要: 为认识蜜蜂的工蜂监督机制,利用扫描电镜分别观察了中华蜜蜂Apis cerana cerana不同类型卵(蜂王产的受精卵、未受精卵以及工蜂产的未受精卵)的表面超微结构,同时用气-质联用技术测定了各类型卵新产卵(0h)和5h卵的表面化学信息素成分。结果表明:中华蜜蜂3种卵表面均覆有六边形的结构,结构内充满小突起,3种卵的大小及表面超微结构无显著差异。受精卵表面化学信息素种类比未受精卵更为丰富,C27∶2和C27∶1可能是卵带有的标记化学信息素。