摘要: 目的探讨CD137-CD137L信号(简称CD137信号)是否通过调控内皮细胞间质转化(endothelium-mesenchymal transition,End-MT)促进心脑血管新生。方法将小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)或小鼠胸主动脉环分为3组,即对照组[10 ng/mL的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]、CD137刺激组(10 ng/mL的TNF-α和5 mg/L的CD137L激动型抗体)和CD137抑制组(200 nmol/L的IWR-1预处理细胞30 min后,再加入10 ng/mL的TNF-α和5 mg/L的CD137L激动型抗体),以CD137L重组蛋白激动CD137信号。采用荧光定量PCR及蛋白质印迹法分别检测脑微血管内皮细胞中CD31、血管内皮细胞钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-Cadherin)、肌动蛋白α(α-smooth muscle actin,α-SMA)、成纤维细胞特异性蛋白-1(fibroblast specific protein-1,FSP-1)和Wnt蛋白的表达;采用Transwell迁移实验检测穿膜细胞数目,比较细胞迁移能力;内皮细胞管腔形成实验检测各组小鼠脑微血管内皮细胞的管腔形成能力。动脉环血管新生实验检测各组小鼠胸主动脉环新生微血管的形成能力。结果小鼠脑微血管内皮细胞CD137刺激组的CD31、VE-Cadherin mRNA及蛋白表达水平均低于对照组(P<0.05),FSP-1、Wnt和α-SMA mRNA及蛋白表达表达水平均高于对照组(P<0.05);CD137抑制组的CD31、VE-Cadherin m RNA及蛋白表达水平均高于CD137刺激组(P<0.05),FSP-1、Wnt和α-SMA mRNA及蛋白表达水平均低于CD137刺激组(P<0.05)。CD137刺激组的小鼠脑微血管内皮细胞迁移数量多于对照组(P<0.05),CD137抑制组的细胞迁移数量少于CD137刺激组(P<0.05)。CD137刺激组的小鼠脑微血管内皮细胞小管长度及分支数量均大于对照组(P<0.05),CD137抑制组的细胞小管长度及分支数均小于CD137刺激组(P<0.05)。CD137刺激组小鼠胸主动脉环的新生微血管数量多于对照组(P<0.05),CD137抑制组的新生微血管数量少于CD137刺激组(P<0.05)。结论 CD137信号可能通过调控End-MT促进小鼠血管新生。

摘要: 目的探讨脊髓损伤小鼠除运动功能障碍外,在自主运动、探索行为和自我照顾行为等家笼(homecage)内精细行为方面的异常表现。方法 8周龄雌性C57BL/6小鼠10只,接受T10脊髓打击造模。另选11只小鼠为假手术组。术后1～5周,每日固定时间将小鼠置于家笼中记录其精细行为,使用HomeCageScan软件分析动物32种日常行为所占时间百分比。结果与假手术组动物相比,早期脊髓损伤小鼠的探索行为、自主运动和自我照顾行为中多数行为活动均存在显著异常(P<0.01),部分行为在损伤后1～5周出现恢复。脊髓损伤后1～5周小鼠以直立和嗅为代表的探索行为与假手术组相比明显减少(P<0.01),分别于术后第4周与第3周恢复至与术后第1周有明显差异(P<0.05);脊髓损伤组小鼠以缓慢行走和跳跃为代表的自主运动与假手术组相比明显减少(P<0.05),分别于术后第2周和第5周恢复至与术后第1周有明显差异(P<0.05);以抽搐和理毛行为为代表的自我照顾行为与假手术组相比明显增加(P<0.01),且在术后1～5周无明显改善。结论脊髓损伤小鼠除双下肢运动功能障碍外,还存在探索行为、自主运动和自我照顾行为等方面的异常。损伤后1～5周,探索行为和自主运动行为出现不同程度的恢复,而自我照顾行为持续异常。自动化高通量家笼内精细行为检测系统可对数十种动物行为进行精确分类和全面记录,是针对脊髓损伤行为障碍的一种更全面和敏感的评价工具。

摘要: 目的探究槲皮素对镉致小鼠肝损伤的保护效应及机制。方法 C57BL/6J小鼠分为对照组、镉组(灌胃氯化镉)、槲皮素组(灌胃槲皮素)、镉与槲皮素共处理组(灌胃氯化镉+槲皮素)。给药结束后,测定小鼠体质量、血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性及血清与肝组织中总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量;HE染色观察肝组织病理学变化,油红O染色观察肝组织脂滴变化;免疫印迹法检测脂质合成关键酶脂肪酸合成酶(FAS)与分解关键酶脂蛋白脂酶(LPL)变化。结果与对照组相比,镉染毒小鼠体质量显著下降(P<0.01),血清ALT与AST活性显著升高(P<0.01),肝组织发生明显肝损伤病理学变化,血清与肝脏中TC和TG含量明显上升(P<0.01),且肝组织内脂肪滴大量沉积(P<0.01),肝脏中FAS蛋白水平显著上调(P<0.01),而LPL蛋白水平显著下调(P<0.01)。槲皮素干预可显著改善以上各项指标的异常变化(P<0.05或P<0.01)。结论槲皮素可通过调节肝脏脂质代谢紊乱,对镉导致的小鼠肝损伤起到保护效应。

摘要: 目的探讨一种构建小鼠主动脉夹层模型的改良方法。方法β-氨基丙腈（β-aminopropionitrile,BAPN）联合血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,Ang-Ⅱ）建立小鼠主动脉夹层模型。100只6周龄雄性C57BL/6J小鼠随机取20只作为对照组,另80只用于造模,其中单纯BAPN组40只和BAPN+Ang-Ⅱ组40只。BAPN组小鼠给予0.1 g·kg^-1·d^-1BAPN饮水;BAPN+Ang-Ⅱ组小鼠除给予BAPN 0.1g·kg^-1·d^-1饮水外,皮下注射Ang-Ⅱ(根据时间调整注射剂量:1～7 d Ang-Ⅱ剂量为1.5 mg·kg^-1·d^-1,8～14 d Ang-Ⅱ为0.75 mg·kg^-1·d^-1,15～16 d Ang-Ⅱ为0.375 mg·kg^-1·d^-1),BAPN组注射等体积生理盐水。药物干预16 d后取材。记录小鼠体质量及饮水量,实验进程中小鼠如有死亡立即解剖,分析死因。实验17 d,将未死亡的小鼠颈部脱臼处死,留取组织备用;HE染色判断主动脉夹层形成情况。结果 BAPN+Ang-Ⅱ组及BAPN组分别与对照组相比,动物饮水量均减少、体质量增加趋势减慢（P<0.05）。对照组夹层发生率及死亡率均为0;BAPN组夹层发生率为7.5%,死亡率为2.5%,BAPN+Ang-Ⅱ组夹层发生率为80%,死亡率为30%。BAPN+Ang-Ⅱ组小鼠均死于调整Ang-Ⅱ剂量后1～3 d,83.3%小鼠死于注射药物后数分钟。结论给于C57BL/6J小鼠持续BANP饮水联合Ang-Ⅱ皮下注射成功构建主动脉夹层模型,具有周期短、模拟效果确切、死亡时间有一定规律、经济、稳定可重复等优点。

摘要: 目的研究KM、BALB/c、NIH、C57BL/6J及BALB/c-nu共5个品系小鼠感染小鼠诺如病毒(murine norovirus,MNV)后总IgG抗体及中和抗体的变化规律。方法收集KM、BALB/c、NIH、C57BL/6J及BALB/c-nu共5个品系小鼠,每个品系分为对照组和感染组,感染组灌胃接种MNV液,对照组灌胃同等体积的生理盐水(即0.9%NaCl溶液)。分别在感染后第1～9周采血分离血清,ELISA法测定总IgG抗体水平(即吸光度值),RAW264.7细胞病变法测定中和抗体滴度(即半数保护剂量,PD50)。t检验比较感染组和对照组在每个时间点的总IgG抗体吸光度均值差异;单因素方差分析比较各品系小鼠感染组总抗体及中和抗体滴度,分析各品系小鼠的抗体变化规律。结果经t检验,KM、BALB/c、NIH、C57BL/6J及BALB/c-nu小鼠分别在第21、35、14、14及28天感染组总IgG抗体吸光度均值显著高于对照组(P<0.01)。各品系小鼠的总IgG抗体水平相比,NIH>C57BL/6J>KM>BALB/c>BALB/c-nu,且BALB/c及BALB/c-nu总抗体吸光度均值显著低于NIH和C57BL/6J小鼠(P<0.05);NIH、C57BL/6J、KM及BALB/c小鼠感染第6周时抗体水平升高较快,NIH小鼠第49天进入平台期,其余3个品系小鼠在实验周期内总IgG抗体水平仍处于上升趋势,其中BALB/c-nu小鼠总抗体水平最低。各品系小鼠的中和抗体滴度比较,C57BL/6J>NIH>KM>BALB/c>BALB/c-nu,其lgPD50均值分别为3.881、3.819、3.746、3.146及2.338;经方差分析显示,BALB/c及BALB/c-nu小鼠中和抗体滴度显著低于C57BL/6J、NIH及KM小鼠(P<0.01)。除了BALB/c-nu小鼠外,其余4个品系小鼠感染第2周时中和抗体滴度升高较快,BALB/c-nu小鼠中和抗体一直处于较低水平。结论 NIH、C57BL/6J及KM小鼠感染MNV的体液免疫应答较强,BALB/c及BALB/c-nu小鼠体液免疫应答较弱。