摘要: 目的 通过实施全国范围的小鼠DNA核酸样品单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP标记检测能力验证计划，检测各实验室小鼠遗传质控SNP检测技术水平，推动核酸样品及SNP检测技术的应用。方法 按照中国食品药品检定研究院2022年组织实施的“NIFDC-PT-365实验小鼠DNA样品SNP标记检测能力验证计划”方案要求，各参加实验室均获得BALB/c和C57BL/6来源的随机编号DNA盲样2份、作业指导书、rs3023177和rs3023382 SNP位点引物2对。参与者在规定时限内提交报告和原始记录，突变位点扩增测序结果与方案预设一致时判为满意，否则判为不满意。同时，对各实验室的PCR扩增体系及测序比对方式进行比较，分析可能影响小鼠核酸标准样品SNP检测结果的相关因素。结果 10个参加实验室在2个SNP位点的盲样测序分型上皆与预设一致，均获得满意结果。不同扩增体积（20μL、25μL、30μL）、不同Taq酶体系（单组分与PCR MIX），以及不同的测序公司、测序方向、比对软件均未影响结果准确性。结论 各参加实验室在小鼠DNA核酸样品SNP标记检测项目上均具有较强的检测能力。SNP检测技术在小鼠遗传质量评价中简便易行，值得推广。

摘要: 目的 利用小鼠对2株大肠埃希菌工程菌Nissle1917和BW25113在肠道的定植能力与定植效率进行评价，以筛选出肠道定植效率高的菌株，为后续利用成簇的规律性间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspersed short palindromic repeats,CRISPR）及其相关蛋白（CRISPR associated protein,Cas）系统的工程菌消减体内耐药菌的研究奠定基础。方法 每株工程菌的实验共取70只18～20 g的ICR小鼠，雌雄各半，操作时小鼠区分性别并随机分为7个处理组，每组10只（6只实验，4只对照）。实验组灌胃2×10¹⁰个工程菌共200μL，对照组灌胃等体积的PBS。灌胃后1、3、6、12、24、48、72 h分别取小鼠的肠系膜淋巴结、胃、回盲部、结肠组织及内容物，分别采用平板划线、荧光镜检和PCR法检测工程菌，比较Nissle1917和BW25113这2菌株在小鼠体内的定植能力与效率。结果 灌胃后前6个时段（1、3、6、12、24、48 h）中，3种方法检测到2株菌在胃、回盲部、结肠组织有定植，淋巴结未检到目标菌株；而72 h有且仅有Nissle1917菌定植于回盲部和结肠组织，Nissle1917和BW25113两株菌的定植效率分别为100%和0。结论 Nissle1917菌定植效率高于BW25113菌，且能较长时间定植于回盲部和结肠组织，提示其可作为防控耐药基因传播用CRISPR系统的备选载体菌。

摘要: 阿尔茨海默病是一种常见的神经退行性疾病，临床主要表现为进行性记忆能力丧失和整体认知能力下降。两种典型的病理特征为在脑内检测到的老年斑和神经纤维缠结，分别由大量沉淀的淀粉样蛋白肽和过度磷酸化的Tau蛋白组成。除此之外还有神经炎性反应以及神经元广泛丢失等其他病理特征。在过去的几十年间虽然人们已经对阿尔茨海默病进行了大量的研究，但是其病因和发病机制仍不明确，至今也没有理想的治疗药物和根治方法。本综述介绍在临床前研究中使用的各种转基因动物模型的各自特点，及其目前在临床前研究中的应用情况，为未来的实验研究提供理论依据。

摘要: 目的 探讨在普通环境设施内用微屏障笼具饲养和维持清洁级小鼠的可行性。方法 在普通环境内采用正压微屏障笼具饲养和维持清洁级小鼠，其间以每个季度一次对微屏障内动物的微生物状况进行第三方抽样检测。结果 自2020年6月开始用微屏障笼具饲养清洁级小鼠，至2022年7月文章成稿时，在连续两年的抽样检测中没有检出国家标准中要求清洁级小鼠必须排除的微生物。结论 微屏障笼具可以在普通环境设施内实现清洁级小鼠的饲养和维持。

摘要: 目的 利用成簇的规律间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR）/CRISPR相关蛋白核酸酶9 （CRISPR-associated nuclease 9,Cas9）基因编辑技术构建稳定遗传的脂多糖结合蛋白（lipopolysaccaride binding protein,Lbp）基因敲除小鼠。方法 根据C57BL/6J小鼠的Lbp基因序列特征，设计sgRNA靶点，删除Lbp基因5’-端蛋白编码保守序列并引入移码突变，使编码LBP失活。提取F0、F1、F2、F3代小鼠基因组，PCR鉴定并测序验证Lbp基因敲除效果，RT-PCR测序验证Lbp基因转录水平，蛋白质印迹法验证F2代LBP蛋白表达水平。结果 F0代获得5只杂合子敲除小鼠(Lbp^+/-)、F1代获得3只Lbp^+/-小鼠，F2代获得4只Lbp纯合子敲除小鼠(Lbp^-/-)，F3代获得30只Lbp^-/-小鼠。RT-PCR测序表明，Lbp^-/-小鼠mRNA缺失244 bp且发生移码突变，导致翻译提前终止。蛋白质印迹证明Lbp^-/-小鼠肝脏组织中无LBP蛋白表达。结论 通过CRISPR/Cas9技术成功构建可以稳定遗传的Lbp基因敲除小鼠，为后续进一步研究LBP的免疫及其生理作用提供基础。