摘要: 目的 比较利用BALB/c和Big-BALB/c（简称B-BALB/c）两种亚系小鼠制备鼠痘及鼠肝炎单克隆抗体的效率，为今后通过杂交瘤进行体内诱导单克隆抗体制备时实验动物的选择提供参考。方法 从常规繁育的BALB/c小鼠群体中选择4周龄体重超过正常动物5%（后期选种标准为超过10%）的个体进行选种并单独繁育，经10代选育制备B-BALB/c小鼠亚系。选择10～11周龄、雌雄各半的BALB/c小鼠和B-BALB/c小鼠各40只，分别接种用液体石蜡预处理后的鼠痘单克隆抗体杂交瘤细胞株G23或鼠肝炎单克隆抗体杂交瘤细胞株Y15，然后通过体内诱生法获取含单克隆抗体的小鼠腹水，利用间接ELISA法检验抗体效价，按照品系、性别和接种杂交瘤类型对小鼠进行分组，分析腹水产量、抗体效价和抗体产量以评估两种亚系小鼠的抗体制备效率。结果 经10代选育后获得的10周龄雄性和雌性B-BALB/c小鼠体重分别比同周龄BALB/c小鼠增加了22.3%和12.8%。抗体制备过程中，B-BALB/c小鼠的耐受力比BALB/c小鼠更好，能够适应二次腹水采集；与BALB/c小鼠相比，B-BALB/c小鼠腹水产量和抗体效价均显著提高，尤以杂交瘤细胞株G23接种组更明显（均P<0.000 1）。接种杂交瘤细胞株G23或Y15后，B-BALB/c小鼠的平均抗体产量(14.99×10⁴U和33.22×10⁴U)高于BALB/c小鼠(5.33×10⁴U和19.31×10⁴U)（均P<0.01）。接种杂交瘤细胞株G23后，B-BALB/c小鼠的平均单位体重的抗体产量（0.55×10～4 U/g）高于BALB/c小鼠（0.23×10～4 U/g）(P<0.000 1)。接种杂交瘤细胞株Y15后，雌性B-BALB/c和BALB/c小鼠的单位体重抗体产量高于同亚系的雄性B-BALB/c小鼠（均P<0.01）。结论 B-BALB/c小鼠在单克隆抗体体内诱导制备中可作为BALB/c小鼠的替代选择，能够达到减少实验动物使用数量、降低人力成本并提高抗体制备效率的目的。

摘要: 基因编辑小鼠模型优势显著，是人类基因功能研究、疾病机制探索和新药研发等理想的实验动物。基因编辑小鼠因自身生育力低下、年老、疾病等因素导致的品系断代会对科学研究造成不可挽回的损失。相关从业人员需针对不同情况采用相应的技术手段进行品系拯救，同时要综合考虑技术选择和成本控制，尽可能降低小鼠品系拯救的实验成本。首先，当仅存的处于生育年龄的基因编辑小鼠突然死亡时，对死亡雄鼠可以通过体外受精（in vitro fertilization,IVF）、单精子卵胞质显微注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI），对雌鼠可通过卵巢移植等技术进行品系拯救。其次，由于年老或疾病因素具有断代风险的小鼠，可以通过IVF-胚胎移植（embryo transfer,ET）、单侧附睾尾活体辅助生殖等技术进行品系拯救。再者，生命状态差的性成熟前小鼠，可以采用圆形精子注射（round spermatid injection,ROSI）或卵巢移植等技术进行品系拯救。本文对常用濒危小鼠品系拯救技术及其应用进行了探讨，以期为相关从业人员更好地做好基因编辑小鼠品系维护提供参考。

摘要: 目的 建立一种快速灵敏的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）检测方法。方法 选择金黄色葡萄球菌特异性基因nuc作为靶基因，设计并合成一对特异性引物和一条TaqMan探针，利用荧光定量PCR技术建立nuc基因的核酸检测方法，并在大鼠、小鼠粪便样本检测中进行应用。结果 对金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株中提取的DNA进行荧光定量PCR检测，结果显示金黄色葡萄球菌出现特异性扩增曲线，而其他非金黄色葡萄球菌未出现，表明设计的引物和探针对金黄色葡萄球菌检测具有特异性。将提取的金黄色葡萄球菌DNA进行10倍梯度稀释后测定其灵敏度，结果显示最低检出限是10 fg的DNA量，比普通PCR方法高2个数量级。本研究共检测91份样品，有4份来自同一设施的大鼠样品，扩增曲线为典型的S曲线；将该PCR产物测序并进行BLAST比对，该样本的基因序列与金黄色葡萄球菌的基因序列相似度为100%，表明该样本为金黄色葡萄球菌nuc基因核酸阳性，阳性率为4.40%，与细菌培养法的检测结果一致。核酸提取采用全自动核酸纯化仪，从核酸提取到检测结果判定快速，所需时间小于1.5 h。结论 建立的以nuc为靶基因鉴定金黄色葡萄球菌的qPCR方法，具有快速、灵敏度高和特异性强的优点，可用于实验动物大鼠、小鼠粪便中金黄色葡萄球菌的检测。

摘要: 目的 优化乳胶灌注技术，并将该技术应用于小鼠头面部静脉血管模型制作。方法 将9只8周龄、体质量（25.0±1.3） g的雄性C57BL/6小鼠随机分成60%乳胶生理盐水组、60%乳胶肝素组和30%乳胶肝素组，相应试剂灌注完成后将标本浸泡于4℃甲醛固定液中，24 h后解剖观察并测量颈外血管直径。结果 于小鼠颈外静脉灌注乳胶灌注液200μL后，各组小鼠的眶上静脉、眶下静脉、颞静脉、面后静脉、咬肌静脉、颈外静脉等均得到灌注，通过对灌注后面部血管末端分支、舌下静脉及舌尖小静脉的灌注程度比较后发现，30%乳胶肝素组的灌注效果最佳，其次为60%乳胶肝素组，而60%乳胶生理盐水组的灌注效果最差。结论 优化后的乳胶灌注技术可有效灌注小鼠头面部的静脉血管，该技术可为小鼠面部静脉血管的走向及形态研究提供很好的参考。

摘要: 目的 对供应商来源的实验大鼠、小鼠进行常规微生物监测，为实验动物设施科学管理提供重要依据，确保相关实验结果的可靠性。方法 以复旦大学实验动物科学部为例，在2021年4月到2023年4月间，按照单纯随机抽样原则，对来自7家供应商的大鼠、小鼠进行微生物质量抽检。具体参照国家标准中SPF级实验动物必须排除的微生物指标及其检测方法进行。结果 抽检动物的检测总合格率为80.36%。其中SPF级大鼠抽检合格率为52.63%,SPF级近交系小鼠抽检合格率为82.76%,SPF级远交系小鼠抽检合格率为86.67%,SPF级免疫缺陷小鼠抽检合格率为86.36%。检测不合格的细菌学指标集中在金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆菌和啮齿杆菌H型，检出率分别为10.76%、3.16%、2.53%和0.63%。不合格的血清学指标为仙台病毒，发生率为2.53%。此外，除国家标准规定SPF级小鼠必须排除的微生物指标外，还在近交系小鼠中检测到阿米巴原虫和肠杆菌属菌株；在免疫缺陷小鼠中检测到产酸性克雷伯杆菌，检出率分别为1.15%、2.30%和4.55%。结论 供应商来源的大小鼠动物中存在一定的病原体感染发生率，相关动物设施有必要强化实验动物微生物监测，确保接收和饲养动物的质量，这对提高实验结果准确性和保护实验动物从业人员的职业健康具有重要意义。