摘要: 目的研究不同剂量禽流感H5N1病毒对小鼠体温体重的影响。方法小鼠鼻腔接种不同剂量的禽流感H5N1病毒,观察不同组雌雄小鼠体重和体温的变化。结果感染小鼠的体重体温出现明显的降低,各组小鼠随接毒剂量的不同,其体重和体温的降低程度分别是150μ1组＞100μ1组＞75μ1组＞50μ1组。其中,雌性小鼠和雄性小鼠相比,体重和体温降低的持续时间长。结论禽流感病毒感染后小鼠体温和体重明显降低,有明显的剂量效应,禽流感病毒在小鼠体内致病的持续时间雌性长于雄性。

摘要: 目的研究记录小鼠生精细胞上表皮钠通道电流。方法应用机械分离获得小鼠单个生精细胞,采用全细胞膜片钳技术记录上皮钠离子通道电流。结果当钳制电位在-50mV、指令电压-100～+40mV、步阶电压10mV,测试脉冲为200ms时,可记录到一快速激活并且不失活的电流。细胞外液中加入1μmol/L的阿米诺利能显著性抑制该电流,并呈现出两类不同的作用(抑制率分别为58.49±9.82%,31.44±5.69%)。结论电流特性和阿米诺利敏感性特征表明,生精细胞上所记录到的电流是上皮钠通道电流。

摘要: 目的采用体内筛选的方法建立小鼠结肠癌高转移模型,为系统研究结肠癌转移机制和临床结肠癌治疗提供动物模型。方法先将C26小鼠结肠癌移植于T、B、NK免疫细胞缺陷的NOD-SCID小鼠皮下,并在首代筛选过程中切除皮下瘤,延长小鼠寿命以获得明显转移灶,然后通过皮下移植→肺转移→皮下移植→肺转移的体内循环筛选方法建立高转移模型。以建立成功的高转移模型为瘤源,在BALB/c小鼠体内以相同的方法继续筛选,同时进行肿瘤的生长和转移情况观察、病理组织学、超微结构、细胞增殖周期和异倍体的观察。结果NOD-SCID小鼠筛选5代后肺转移达100%。但筛选后的肿瘤组织皮下移植到BALB/c小鼠体内时,肿瘤的转移程度有所下降,又经BALB/c小鼠体内4代筛选,肿瘤的移植成瘤率、肺转移率均为100%。病理组织学、超微结构观察、细胞增殖周期和异倍体等结果表明与原结肠癌生物学特性相似。结论作者建立的肺转移率100%、转移特性稳定、直观性好、操作简便的小鼠结肠癌高移植模型,为探讨结肠癌转移的生物学机制和抗转移治疗提供了理想的动物模型。

摘要: 目的观察肿瘤坏死因子α(TNFα)对KM小鼠骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力的影响。方法80只清洁级KM小鼠随机分为TNFα高剂量连续注射组(TH组,n=20)、TNFα低剂量连续注射组(TL组,n=20)、TNFα高剂量一次注射组(T1组,n=20)和正常对照组(C组,n=20)。密度梯度离心分离组织细胞膜,麦胚凝集素(WGA)亲和柱层析纯化膜胰岛素受体,外源聚谷-酪多肽底物同位素32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(TPK)活力,观察各组胰岛素刺激前后的离体骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化。结果1)TH和TL组基础(无胰岛素刺激)骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力均明显低于C组,且TH组明显低于TL组(P均<0.01);2)TH组和TL组胰岛素刺激的骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化值均明显低于C组,且TH组明显低于TL组,(P均<0.01);3)T1组无论基础还是胰岛素刺激的骨骼肌和肝细胞膜胰岛素受体TPK活力变化值均与C组无显著差别(P>0.05)。结论TNFα可抑制组织细胞膜胰岛素受体TPK活力,在组织细胞膜胰岛素受体信号转导障碍中发挥重要作用。TNFα抑制组织细胞膜胰岛素受体TPK活力,需连续刺激,一次刺激作用效果不明显。

摘要: 目的构建小鼠白血病抑制因子的真核表达载体,有助于开展高其他实验动物的胚胎干细胞的定向分化研究。方法运用RT-PCR技术,克隆含信号肽和不含信号肽的小鼠分泌型白血病抑制因子,通过pMD18-Tsimple载体和pBS-T载体过渡,酶切进行初步鉴定。结果分别经过酶切鉴定,成功构建了小鼠LIF基因真核表达载体pSecTag-LIF(sp+)和pSecTag-LIF(sp-)。结论构建小鼠白血病抑制因子的真核表达载体有效可行,不仅为进一步研究LIF细胞因子所诱导的维持胚胎干细胞未分化状态的分子机制奠定了基础,而且为各种转基因实验动物的研究提供了一种新的方法。