摘要: 目的改进剖宫产手术,提高剖宫产生物净化效率,获得SPF级基因工程小鼠。方法结合小鼠妊娠时间,触诊判断胎鼠发育情况推测剖宫产手术时间,优化剖宫产手术流程,缩短手术时间以提高手术效率;改进剖出仔鼠由SPF级ICR小鼠代乳以提高成活率;采用统计学方法对剖宫产净化数据进行分析。结果以触摸胎鼠四肢清晰,头部与躯干长度相似,且胎位朝下为剖宫产手术最佳时间,改进手术细节使成功率达(97.9±8.25)%;选择分娩时间和手术时间间隔最小的ICR母鼠代乳,间隔时间<24 h,可提高仔鼠的离乳率,平均窝离乳率为91.2%;经剖宫产净化技术成功获得的仔鼠检测微生物级别符合SPF级。结论剖宫产净化技术的优化可显著提高实验小鼠的净化效率,为基因工程小鼠的生物净化奠定基础。

摘要: 目的本研究拟对比小鼠肝炎病毒(MHV)抗体ELISA检测试剂盒的敏感性、特异性、精密性和可信度,以筛选出既经济又可靠的检测试剂盒。方法选择两种国产与一种进口的ELISA试剂盒检测MHV抗体和以下5种病毒阳性血清:小鼠仙台病毒(SV)、小鼠肺炎病毒(PVM)、小鼠细小病毒(MVM)、小鼠鼠痘病毒(MPV)及小鼠呼肠孤Ⅲ型病毒(Reo-3),并进行敏感性、特异性、精密性及可信度实验比较。结果 ELISA国产B试剂盒的敏感性是国产A试剂盒的400倍,进口试剂盒的敏感性是国产B试剂盒的4倍;特异性实验显示国产A试剂盒与MPV无交叉反应,但与其他4种病毒阳性血清均有交叉反应,国产B试剂盒和进口试剂盒与MPV以外的5种病毒阳性血清均无交叉反应;精密性实验显示进口试剂盒批内平均变异系数为5.667%,国产A和国产B试剂盒批内平均变异系数分别为13.825%和13.827%;可信度实验显示国产B试剂盒和进口试剂盒的阳性和阴性检测符合率均为100%,国产A试剂盒的阳性和阴性检测符合率分别为40%和80%。结论 ELISA检测国产B试剂盒除敏感性和精密度低于检测的进口试剂盒外,其特异性和可信度均良好,国产A试剂盒的敏感性、特异性、精密性和可信度均低于检测的进口试剂盒。

摘要: 目的探讨短期热应激对小鼠超数排卵和卵泡发育的影响。方法取超数排卵处理后体质量近似的7～8周龄ICR雌性小鼠20只,随机分为对照组和热应激组,每组10只,饲养于屏障环境内。热应激组小鼠放入38℃的生化培养箱中,热应激处理10 h,期间自由采食和饮水。热应激结束后,将小鼠放回屏障设施内饲养,持续6 d,6 d后,进行超数排卵处理并处死小鼠,获取小鼠输卵管内卵子以及卵巢。结果热应激组小鼠超排卵数高于对照组(P <0.05)。对卵巢切片进行苏木素-伊红(HE)染色后,观察发现热应激组小鼠的总卵泡数和黄体数均明显高于对照组(P <0.01)。热应激组小鼠的卵泡闭锁率高于对照组,但无明显差异(P> 0.05)。结论热应激严重影响小鼠的繁殖机能,尤其是卵泡的发育过程。

摘要: 目的为提高小鼠电激怒模型制备成功率,研制了智能化电刺激系统以满足电激怒实验要求。方法电刺激系统由计算机窗口界面输入用户的控制参数,通过计算机系统与STM32F103单片机之间的RS232通讯,将用户输入的控制参数传入STM32F103单片机中,控制高压输出电路输出用户所需高压脉冲到鼠笼电极装置,以此激怒小鼠,并在动物实验中应用。结果制备小鼠激怒模型,通过采用计算机设定电刺激参数,使小鼠激怒模型制备的成功率达90%,并符合实验动物福利的"3R"原则要求,可以满足氯丙嗪对小鼠抗电激怒实验效果观察。结论研制的电刺激系统实现了计算机对刺激参数的智能化控制,技术性能可满足小鼠电激怒实验教学的要求。

摘要: 2013年CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)/Cas(CRISPR-associated)系统证实能够对人的细胞和其他真核细胞进行基因组编辑,现已广泛应用于生物医学领域。本文对CRISPR在点突变小鼠构建中的应用进行概述,为单向导RNA(single guide RNA,sgRNA)和修复模板单链寡聚核苷酸(single-strand oligonucleotide,ss ODN)的设计及体外转录、受精卵显微注射、子代鼠的鉴定等提供理论参考。