摘要: 目的构建syncytinA(合胞素A)条件敲除小鼠,为进一步研究syncytinA在胎盘形成过程中发挥的融合及非融合作用及研究子痫前期病理模型提供基础。方法在用ES细胞打靶完成syncytinA外显子上游loxp同源重组基础上,利用CRISPR-Cas9得到syncytinA-loxp小鼠。构建syncytinA-loxp转基因载体及sg RNA,通过原核显微注射方法将构建好的doner、Cas9及sg RNA一并注射到C57小鼠受精卵中,并移植入同期受孕代孕受体ICR输卵管中获得子代小鼠。用PCR方法检测子代鼠尾基因型,loxp阳性小鼠与WT交配获得syncytinA-loxp小鼠。为了检测syncytinA-loxp能否被敲除,通过与prime1cre及zp3cre交配获得syncytinA-/-,PCR及q-PCR检测syncytinA是否被敲掉。结果经PCR及q-PCR方法检测,我们成功得到syncytinA-/-胚胎。结论 syncytinA条件敲除小鼠构建成功,为更好的研究它在胎盘及子痫前期中的功能提供了基础。

摘要: 目的建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)PCR检测方法,并进行初步应用。方法根据NCBI公布的巨细胞病毒设计引物,进行PCR体系优化、敏感性、特异性测试;运用优化后的方法,对87份小鼠血清进行检测,对阳性样本进行测序分析。结果建立的小鼠巨细胞病毒PCR方法灵敏度高,特异性好,初步检测4个屏障设施的87份小鼠血清,13份为阳性,通过测序证实为小鼠巨细胞病毒,验证了此方法的可行性。结论为小鼠巨细胞病毒的快速检测提供了方法。

摘要: 目的检测绿色荧光蛋白(Green Fluorescence Protein,简称GFP)转基因裸鼠的部分免疫学指标,分析GFP转基因裸鼠与其他小鼠在免疫学方面的优缺点,为将来的研究提供基础参考值。方法 1实验选用6～8周GFP转基因裸鼠、BALB/c裸鼠和BALB/c小鼠,活体称体质量,剖取脾脏称其质量,之后进行脾淋巴细胞增殖能力的测定。2取外周血,测定部分血常规指标及免疫球蛋白指标。结果 1 GFP转基因裸鼠脾脏质量、脾脏系数以及T、B淋巴细胞增殖反应与BALB/c裸鼠相近,但与BALB/c小鼠差异显著。2 GFP转基因裸鼠、BALB/c裸鼠两种裸鼠品系外周血白细胞水平、淋巴细胞以比例及免疫球蛋白IgG、IgM都远低于BALB/c小鼠,差异显著。结论从脏器系数、白细胞水平,免疫球蛋白水平等角度发现,GFP转基因裸鼠和BALB/c裸鼠的免疫系统水平较BALB/c小鼠相弱,其中GFP转基因裸鼠的免疫系统水平最为低下。

摘要: 目的建立小鼠微小病毒（MVM）荧光定量PCR方法,并初步应用于实验小鼠中。方法根据NCBI上发表的MVM（NC₀01510）基因组序列,设计引物和探针,建立MVM荧光定量PCR方法。考察引物探针的最佳线形范围,特异性及灵敏度,并使用该方法对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM荧光定量PCR方法最佳线性范围为10～9¹0～4拷贝/μL,标准曲线的线性关系良好,R²值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μL,特异性强,与大鼠细小病毒H-1株和KRV株、猪细小病毒均无交叉反应。应用荧光定量PCR方法对178份小鼠粪便DNA进行检测,结果均为阴性。结论建立的MVM荧光定量PCR方法具有特异、灵敏的特点,为MVM的流行病学调查、检测提供了有效的技术支持。

摘要: 介绍人体肿瘤移植(patient-derived tumor xenograft model,PDX)模型的基本特征和在生物医学研究中的应用;比较该类模型应用于肿瘤研究的优点和存在的问题。目的是正确应用PDX模型开展研究工作,分析相应的实验结果,加快肿瘤药物研发进程。