摘要: 目的建立同时检测小鼠微小病毒（MVM）和小鼠细小病毒（MPV）的荧光定量PCR方法,并进行初步应用。方法比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV。考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为10～9¹0～4拷贝/μL,标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μL,特异性强。应用MVM-MPV探针对178份小鼠粪便DNA检测,结果为2份阳性样本,经MVM、MPV特异性探针鉴定,2份阳性样本均为MPV感染。阳性样本经全基因组测序后与NCBI网站上MPV（NC₀01630.1）序列比对,一致率为96%。结论建立的MVM-MPV荧光定量PCR方法,能够有效快速地同时检出小鼠细小病毒和小鼠微小病毒。

摘要: 目的了解国内小鼠采血方法使用的情况。方法万方数据库中检索2012至2016年间正文中含有检索词"小鼠"和"采血"的文献,对符合条件的文章进行统计分析。结果检索到448篇文献,其中符合条件的文献444篇。使用比例最高的3种采血方法依次是眼眶后静脉丛采血(33.3%)、摘眼球采血(22.6%)和尾静脉采血(15.4%)。心脏采血使用麻醉的占60%,眼眶静脉丛采血使用麻醉的占3.2%。结论摘眼球采血法的使用率很高,但鉴于其会给小鼠带来巨大痛苦,故建议用下颌静脉丛采血等其他方法替代。心脏采血、眼眶后静脉丛采血过程中实施麻醉的比例不高,应加以重视和规范。

摘要: 目的考察不同给药方式、不同剂量氢化可的松肾阳虚造模方法的优劣。方法采用灌胃、腹腔注射及皮下注射的方式给予小鼠不同剂量(12.5、25、50 mg/kg体质量)氢化可的松注射液9 d,考察小鼠的死亡率、一般状态、体质量、肛温、自主活动、脏器指数及游泳时间的变化。结果造模9 d后,小鼠懒动,消瘦,拱背蜷曲,体毛枯萎无光泽,精神萎靡,反应迟钝,肛周污染,便溏等,以25、50 mg/kg剂量组较为明显。除皮下注射25 mg/kg组外,其他各组体质量均较造模前明显下降;除灌胃及腹腔注射12.5 mg/kg、皮下注射25 mg/kg组外,小鼠自主活动次数均有不同程度的减少;除各方式的12.5 mg/kg组外,小鼠游泳时间均较空白组明显缩短;腹腔注射和皮下注射25 mg/kg组脾指数、各方式的12.5 mg/kg组的肾上腺指数与空白组相比无明显变化,其余各组的脾、胸腺及肾上腺指数均明显减轻,各剂量组的精囊腺和包皮腺无明显变化。结论综合各考察指标,灌胃给药25 mg/kg剂量组成模率较高,且各项指标均可呈现出肾阳虚的症状和体征,是比较可靠的肾阳虚造模方法。

摘要: 目的基于TaqMan建立小鼠腺病毒(MAdV)特异的荧光定量PCR检测方法,用于调查长爪沙鼠和小鼠等实验动物中MAdV感染情况。方法从NCBI下载小鼠腺病毒(MAdV-A和MAdV-3)基因组序列,比对分析后选择保守性较好的基因设计引物和探针。筛选最佳引物对和探针,对其特异性、敏感性、重复性和稳定性进行验证,运用所建立的方法对长爪沙鼠和野鼠的共41份样本进行检测。结果经特异性和灵敏度鉴定,在设计的3对引物探针中确定一对最佳引物探针MAD-3,可区分小鼠腺病毒与猴腺病毒、禽腺病毒和树鼩腺病毒等24种病原,MAdV质粒DNA最低检测限为4.5 copies/reaction;MAdV纯病毒液和病毒/组织模拟样本的最低检测限均为440 copies/reaction。结论建立的Taq Man荧光定量PCR检测方法特异、灵敏和稳定,可用于大鼠、小鼠、长爪沙鼠等实验动物及鼠源性生物制品MAdV的检测。

摘要: 目的建立及鉴定Pumilio1/Pumilio2(Pum1和Pum2)双基因条件性敲除的小鼠模型,为进一步研究PUF家族在哺乳动物精子发生中的生物学功能奠定基础。方法将构建的Pum1条件性敲除和Pum2条件性敲除的两个品系小鼠进行交配并繁殖,最终繁殖成功的子代小仔Pum1和Pum2两个基因均为纯合子。对子代以剪趾方式进行编号,提取子代小鼠脚趾或鼠尾基因组DNA,用PCR法和琼脂糖凝胶电泳鉴定基因型。结果 Pum1和Pum2双基因条件性敲除的小鼠模型繁殖成功,同时获得更多PUF家族双基因条件性敲除的小鼠。结论成功建立了Pum1和Pum2双基因条件性敲除的小鼠模型;正确的交配繁殖策略和鉴定方法是获得PUF家族双基因条件性敲除小鼠的有效途径。