摘要: 目的 研究顺铂（又名顺式-二氯二氨合铂，cis-dichlorodiamineplatinum,DDP）抑制小鼠类固醇激素合成的作用途径，并观察脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）的干预效应。方法 将60只成年ICR小鼠随机分为3组：对照组、DDP建模组、DHEA治疗组，每组10只雄性和10只雌性小鼠。DDP建模组小鼠按2.5 mg·kg^-1·d^-1剂量腹腔注射DDP溶液，每3 d注射1次，共7次；造模同日，对照组小鼠腹腔注射等量的生理盐水；而DEHA治疗组小鼠在予以DDP处理的同时，按8.3 mg·kg^-1·d^-1剂量给予DHEA灌胃，连续给药21 d。通过旷场、抓力和转棒试验观察小鼠疲劳指标的变化，采用常规组织切片的HE染色法观察肾上腺、睾丸与卵巢组织形态的变化，运用高效液相色谱串联质谱方法检测小鼠血清类固醇激素的含量，运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹技术检测下丘脑、垂体、肾上腺、睾丸和卵巢组织中相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 与对照组比较，DDP建模组雄性与雌性小鼠的体重以及旷场运动能力均显著下降（P<0.05），同时雌性小鼠的抓力和转棒时间也均显著下降（P<0.05）；而DHEA治疗组小鼠的上述疲劳指标均显著改善（P<0.05）。DDP建模组雄性小鼠睾丸组织中各级生精细胞排列紊乱且睾丸间质水肿，雌性小鼠卵巢组织中大量原始卵泡被激活，闭锁卵泡增多，卵泡颗粒细胞减少；而DHEA治疗组小鼠睾丸和卵巢受损伤表型均得到显著改善。与对照组比较，DDP建模组雄性与雌性小鼠血清睾酮、二氢睾酮含量均显著降低（P<0.01），雄性小鼠血清孕烯醇酮含量下降而皮质酮含量显著升高（P<0.05），雌性小鼠血清皮质酮含量显著降低（P<0.05）；与DDP建模组比较，DHEA治疗组雄性小鼠的孕烯醇酮含量和雌性小鼠的孕酮含量均显著增高（P<0.05），而雌性小鼠的孕烯醇酮含量和雄性小鼠的孕酮含量均显著降低（P<0.05）。与对照组比较，DDP建模组雄性与雌性小鼠的肾上腺Cyp21a1、Cyp11a1基因和下丘脑Gnrh基因表达均显著下调（P<0.05）；雌性小鼠肾上腺Hsd3b2基因，卵巢Star、Cyp11a1、Lhr基因，下丘脑Crh、垂体Pomc和Lhb基因表达均显著下调（P<0.05）；雄性小鼠睾丸Star基因及StAR蛋白以及垂体Fshb和Lhb基因表达均显著下调（P<0.05）。与DDP建模组比较，补充DHEA后，雄性小鼠肾上腺Cyp17a1基因和睾丸Cyp17a1、Lhr、Fshr基因表达均显著下调（P<0.05）；雌性小鼠肾上腺Cyp11a1基因表达显著下调（P<0.05），而肾上腺Hsd3b2基因和卵巢Star、Cyp11a1、Hsd3b2、Lhr基因，以及垂体Lhb基因表达均上调（P<0.05）。结论 DDP间断给药可以抑制下丘脑-垂体-肾上腺皮质与性腺轴功能，并且雌性受抑制更显著；补充DHEA有助于调节体内类固醇激素水平的自身稳态。

摘要: 目的 探讨人参皂苷Rg1在创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）小鼠模型血脑屏障、神经炎症、行为学功能等方面的作用。方法 实验分2部分。第一部分是将27只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、假手术组、TBI模型组，每组9只；TBI模型组开颅后采用受控皮质冲击（controlled cortical impact,CCI）方式造模，假手术组只开颅不进行打击，空白组不经任何处理；手术后进行造模效果评价。第二部分是将40只雄性BALB/c小鼠随机分为假手术组、3个剂量的人参皂苷Rg1治疗组和溶剂DMSO对照组，每组8只小鼠。Rg1治疗组在TBI建模成功后6 h腹腔注射剂量分别为10、20、40 mg/kg的人参皂苷Rg1，而DMSO对照组给予等量的1%DMSO，持续给药1周，每天2次。于造模后1、3、7、14 d分别进行改良的神经损伤严重程度评分（modified neurological severity scores,mNSS）；取造模后第3天的小鼠脑组织，采用蛋白质印迹法检测血脑屏障渗漏情况；第14、16天分别采用高架十字迷宫实验、水迷宫实验检测小鼠神经行为功能；第28天麻醉、灌注后取脑，免疫荧光染色观察小胶质细胞、星形胶质细胞活化等神经炎症。结果 人参皂苷Rg1治疗组的血脑屏障标志物MMP-9表达量减少（P<0.01），小胶质细胞（Iba-1阳性表达）和星形胶质细胞（GFAP阳性表达）数量均明显减少（P<0.05），提示神经炎症得到抑制，且以20 mg/kg剂量效果最好（P<0.01）。人参皂苷Rg1治疗组小鼠的mNSS评分显著低于溶剂DMSO对照组（P<0.01），进入开放臂次数比例显著高于DMSO对照组（P<0.05）；其在水迷宫实验平台所在象限的时间比及穿越平台的次数均显著多于DMSO对照组（P<0.05），且均以20 mg/kg剂量效果最佳。结论 成功构建TBI小鼠模型并用于人参皂苷Rg1的损伤修复研究。人参皂苷Rg1能够显著改善TBI模型小鼠血脑屏障，减轻神经炎症，发挥改善神经行为功能的作用，且以20 mg/kg剂量作用效果最为显著。

摘要: 目的 分析奥氮平给药组与对照组的小鼠脑组织的转录组测序结果，筛选出差异表达基因，探索非典型抗精神病药奥氮平导致体重增加的潜在作用靶点。方法 20只雌性C57BL/6小鼠被随机分为对照组和奥氮平给药组，分别给予生理盐水和奥氮平溶液灌胃，8周后留取全脑组织进行转录组测序（transcriptome sequencing,RNA-Seq）。通过对测序结果进行基因本体论（gene ontology,GO）功能注释分析和基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and gnomes,KEGG）途径富集分析以及蛋白互作（protein-protein interaction,PPI）网络分析等，寻找奥氮平诱导体重增加的可能靶点，并通过实时荧光定量PCR法进行验证。结果 对照组和奥氮平给药组的差异表达基因共591个，其中上调基因251个，下调基因340个。GO分析显示差异基因广泛参与转录过程，其中消化系统的调节和冷诱导的产热相关基因表达属于显著富集项目。KEGG分析显示差异基因广泛参与神经活性物质与受体之间的相互作用，差异基因显著富集在催产素信号、脂肪的消化吸收以及胆固醇代谢通路。实时荧光定量PCR结果表明，富集在摄食调控、胃运动、产热、脂肪代谢等过程的基因（Oxt、Trpv1、Adipoq、Phox2b、Abcg5、Mogat2、Dbh、Plac8、Neurog1）以及PPI网络中的枢纽基因（Fos、Dusp1、Egr2）的表达改变与RNA-Seq趋势一致。结论 奥氮平给药导致小鼠中枢的摄食调控、胃肠运动、产热等生理过程发生改变，这些改变可能参与了奥氮平诱导的体重增加。

摘要: 神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）是儿童最常见的实体恶性肿瘤，居我国儿童肿瘤发病率第四位，占儿童肿瘤死亡人数的15%，高危患者存活率低。目前对于NB的发病及药物治疗机制知之甚少。NB动物模型可以表征NB发展特征，是研究预防和治疗NB的重要工具，然而尚未有一种动物模型可以模拟人类NB的所有特征。本文介绍了当前研究较多的几种NB动物模型（小鼠模型、鸡胚绒毛尿囊膜模型和斑马鱼模型），并对每种NB动物模型的种类、构建方法、特征、优缺点及研究进展做了详细阐述，同时对NB的应用方向及前景进行概括，以期为NB动物模型构建和NB治疗等提供理论依据。

摘要: 目的 通过增强血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR）人源化小鼠(hKDR^+/+)接纳不同来源的小鼠肿瘤细胞系的潜力，建立能支持多种肿瘤细胞系成瘤的、可评价针对VEGFR靶点药物的新型荷瘤小鼠模型。方法 首先建立基于hKDR^+/+人源化小鼠模型评价针对VEGFR靶点抗体体内活性的方法，同时采用CRISPR/Cas9技术构建重组激活基因1 （recombination activating gene 1,Rag1）敲除的C57BL/6N小鼠(命名为Rag1^-/-小鼠)。然后将Rag1^-/-小鼠与hKDR^+/+小鼠交配，筛选获得双基因纯合、双靶点基因修饰的hKDR^+/+/Rag1^-/-小鼠。最后在hKDR^+/+、Rag1^-/-、hKDR^+/+/Rag1^-/-和C57BL/6N小鼠上测试不同小鼠品系来源肿瘤细胞系的体内肿瘤生长差异。结果 针对VEGFR靶点设计的抗体在hKDR^+/+小鼠体内表现出明显的抗肿瘤活性，与PBS组相比，肿瘤体积明显减小（P<0.01），肿瘤质量明显减轻（P<0.05）。Rag1^-/-小鼠、hKDR^+/+/Rag1^-/-小鼠的外周血B细胞和T细胞数量均明显减少（P<0.05,P<0.001）。C57BL/6小鼠来源的MC38细胞接种7 d后，在hKDR^+/+/Rag1^-/-、Rag1^-/-、C57BL/6N和hKDR^+/+四组小鼠体内均可见肿瘤生长。BALB/c小鼠来源的CT26细胞接种10 d后，仅在hKDR^+/+/Rag1^-/-和Rag1^-/-小鼠体内见到肿瘤生长，在C57BL/6N及hKDR^+/+小鼠中均未见肿瘤生长；接种后3周，hKDR^+/+/Rag1^-/-小鼠的成瘤体积明显大于Rag1^-/-小鼠（P<0.01）。结论 获得了Rag1基因敲除小鼠，并进一步筛选获得新型hKDR^+/+/Rag1^-/-双靶点基因修饰小鼠模型；Rag1基因缺失时，不同品系小鼠来源的肿瘤细胞系更易成瘤。这提示可以通过降低hKDR^+/+人源化小鼠的免疫反应能力，增强或扩大该模型小鼠接纳肿瘤细胞系的范围，构建多种可用于评价VEGFR靶点药物的荷瘤小鼠模型。