摘要: 目的 研究db/db小鼠口腔菌群的改变，为探寻2型糖尿病与口腔微生态的联系提供实验基础。方法 选取8只10周龄雄性db/db小鼠为糖尿病实验组，8只10周龄雄性db/m小鼠为正常对照组。适应性喂养5 d后，在相同饲料饲养的第6天和第37天行尾静脉采血，测定两组小鼠的空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）水平和口服葡萄糖耐量（oral glucose tolerance test,OGTT），以验证糖尿病模型的可靠性。在相同饲料饲养的第15天采集两组小鼠两侧颊黏膜、舌背与舌腹、口底黏膜、上腭硬区黏膜、上下颌牙龈的龈上区域的口腔菌群样本，提取口腔微生物的基因组DNA后，使用GeneAmp 9700热循环仪对其中16S核糖体RNA（16S ribosomal RNA,16S rRNA）基因的V3^V4区进行扩增，然后在Illumina MiSeq平台上通过双标引扩增和测序对口腔菌群结构进行评估，然后应用QIIME（version 1.6.0）软件进行生物信息学分析。结果 实验开始后第6天和第37天的FBG水平和OGTT检测结果均显示db/db小鼠比db/m小鼠表现出明显的2型糖尿病症状。α多样性分析显示两组小鼠的口腔菌群在多样性上无显著差异（P>0.05），而在丰富度上差异显著（P<0.05）。主坐标分析显示db/db小鼠的口腔菌群结构与db/m小鼠存在显著差异（P<0.05），物种组成分析以及LEfSe分析显示db/db小鼠口腔菌群在门水平以变形菌门（p_Proteobacteria）为主的相对丰度显著上升（P<0.05），而在属水平上变形杆菌属（g_Proteus）和肠球菌属（g_Enterococcus）的相对丰度极显著上升（P<0.001）。结论 2型糖尿病db/db小鼠的口腔菌群结构和丰富度均较血糖正常的对照小鼠出现了显著变化。

摘要: 目的 探讨自发性早衰SHJH^hr小鼠心脏的衰老现象。方法 对不同周龄（10周龄和24周龄）的SHJH^hr小鼠(SHJH^hr组)和野生型ICR小鼠[用作野生组（wild-type,WT组）]进行对比研究。用小动物活体超声影像系统分析心脏功能，安死术后采集各脏器并称重，了解心脏萎缩情况；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色后观察心脏病理损伤情况；Masson染色后分析心脏纤维化情况；麦胚凝集素（wheat-germ agglutinin,WGA）染色后分析心脏心肌细胞面积；酶联免疫吸附法检测心肌组织中氧化损伤指标包括超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPX）和过氧化氢酶（catalase,CAT）的活性以及8-羟基-2'-脱氧鸟苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG）含量；实时荧光定量PCR法检测炎症、纤维化、氧化应激相关标志因子的mRNA表达水平；比色法检测丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。结果 与同周龄的WT组小鼠相比，10周龄SHJH^hr组小鼠的每搏输出量（stroke volume,SV）、射血分数（ejection fraction,EF）、缩短分数（fractional shortening,FS）和心肺重量无明显差异；但是当小鼠达到24周龄时，SHJH^hr组小鼠的SV、EF和FS值明显低于同周龄WT组小鼠（均P<0.05），肺脏重量无显著变化，但是心脏重量显著降低（P<0.05）。选取24周龄小鼠心脏组织进行组织学分析发现：与WT组小鼠相比，SHJH^hr组小鼠的心脏纤维化水平无明显差异，但WGA染色显示心肌细胞面积显著减少（P<0.05）。PCR检测发现氧化应激标志因子Sod2、Gpx1和Cat基因的mRNA水平显著下调（均P<0.05）。生化检测发现心肌组织中氧化损伤相关酶SOD、GPX和CAT活性显著降低（均P<0.05），而氧化应激标志物8-OHdG和MDA水平显著增加（均P<0.05）。结论 SHJH^hr小鼠心脏出现早衰现象，可能与心肌组织氧化应激损伤有关。

摘要: 目的 应用长链酰基辅酶A合成酶1 (acyl-CoA synthetase long-chain family member 1,ACSL1)抑制剂Triacsin C联合高脂饮食建立新的高血糖肥胖小鼠心功能减退模型，以模拟肥胖相关2型糖尿病患者脂肪组织和心功能的变化。方法 将20只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为2组：Con组（对照组，腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液）和TC组（实验组，腹腔注射Triacsin C）。连续注射4周后，2组小鼠均给予高脂饲料喂养，自实验开始每8周监测小鼠体重及糖耐量。以空腹血糖>8 mmol/L或餐后2 h血糖>15 mmol/L视为造模成功。观测2组小鼠左心室舒张末期内径（left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD）、左心室收缩末期内径（left ventricular endsystolic diameter,LVESD）、舒张末期室间隔厚度（end-diastolic interventricular septal thickness,EDIVS）、左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）和左心室短轴缩短分数（left ventricular short-axis fractional shortening,FS）等心功能指标的变化。HE染色后观测小鼠附睾白色脂肪组织（white adipose tissue,WAT）及背部棕色脂肪组织（brown adipose tissue,BAT）形态和面积的变化；采用免疫荧光法分析棕色脂肪组织血管内皮标志蛋白CD31和棕色脂肪组织标志蛋白UCP1的变化；采用蛋白质印迹法检测小鼠心肌组织中ACSL1表达的变化。结果 Con组和TC组小鼠空腹血糖分别为（8.14±1.43） mmol/L和（8.18±0.85） mmol/L (P>0.05)，餐后2 h血糖浓度分别为（19.8±4.01） mmol/L和（22.60±3.97） mmol/L (P<0.05)，表明本研究中两组糖尿病小鼠模型均造模成功。与Con组相比，TC组小鼠葡萄糖耐量较差，LVEDD、LVEF和FS下降明显（P<0.05）,WAT及BAT面积明显增大（P<0.05）,CD31、UCP1的表达量明显减少（P<0.05），心肌组织ACSL1表达明显减少（P<0.05）。结论 Triacsin C联合高脂饮食制备新型高血糖肥胖小鼠心功能减退模型是可行的，较单纯高脂饮食诱导2型糖尿病模型出现明显的棕色脂肪组织白色化、胰岛素抵抗及心功能减退现象。

摘要: 目的 研究不同光照时长对发育期NIH小鼠体重和学习记忆能力的影响。方法 实验选取体重相近的发育期NIH小鼠40只，雌雄各半。小鼠经每天12 h光照时长适应性饲养1周后，被随机分为每天0、6、12、18、24 h光照时长组，每组8只，实验周期为7周，其中前5周为不同光照时长条件下的饲养阶段，后2周为行为学实验阶段。通过体重监测以及T型迷宫、新位置识别和八臂迷宫等行为学实验，分析光照时长对小鼠体重和学习记忆能力的影响。结果 在光照处理期间，各组小鼠间的体重变化无显著差异（P>0.05）；在光照处理第2周和第3周，每天24 h光照时长组小鼠的体重增长量显著高于每天0 h和6 h光照时长组（P<0.05）。在光照处理5周后，T型迷宫实验中，每天0 h光照时长组小鼠的潜伏期时间极显著长于每天12 h光照时长组（P<0.01）；每天24 h光照时长组小鼠的潜伏期时间显著长于每天12 h光照时长组（P<0.05）。新位置识别实验中，每天12 h光照时长组小鼠的辨别指数和新位置观察时间均长于其他组，且与每天18 h光照时长组差异极显著（P<0.01），与每天24 h光照时长组差异显著（P<0.05）；八臂迷宫实验中，每天12 h光照时长组小鼠找到饲料的时间、参考记忆错误比率和工作记忆错误比率均短于每天0 h光照时长组，且差异显著（P<0.05）；而每天24 h光照时长组小鼠的工作记忆错误比率高于每天12 h光照时长组，且差异显著（P<0.05）。结论 每天24 h光照会影响NIH小鼠的体重增长，而每天光照时长超过18 h或低于6 h会减弱NIH小鼠的学习记忆能力。

摘要: 目的 优化通过注射人肝肿瘤细胞株构建原位癌裸小鼠模型的条件，并探索适宜的给药治疗时间。方法 选用稳定表达萤光素酶报告基因（LUC）的人肝细胞癌Hep3B与肝母细胞瘤HepG2细胞株，使用小动物活体成像系统分析萤光素酶发光强度与肝肿瘤细胞数量之间的线性相关性，验证人源肝肿瘤细胞的发光效率。在5周龄雌性BALB/c裸小鼠的肝叶原位接种不同浓度（8×10～6、2.4×10～7、7.2×10～7个/mL）、不同重悬介质（PBS、Matrigel）的人肝肿瘤细胞悬液HepG2-LUC和Hep3B-LUC（共12组，每组7只），分别构建人肝肿瘤裸小鼠原位癌模型。每7 d为1个周期记录各组小鼠体重，用小动物活体成像系统定期监测原位肿瘤的生长过程，观察肿瘤生长趋势。接种肿瘤细胞后第35天剖取小鼠肝脏，制备病理切片，进行苏木精-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色观察组织病理学变化。结果 两种人肝肿瘤细胞株的发光强度均与细胞数量呈正相关（R²=0.983 1,R²=0.970 5），适宜用于原位癌模型的构建。HepG2-LUC高浓度组，HepG2-LUC+Matrigel低、中、高浓度组，Hep3B-LUC中、高浓度组与Hep3B-LUC+Matrigel低、中、高浓度组均成功造模。HepG2-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重显著下降（P<0.05）,Hep3B-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重也显著下降（P<0.05）。成功造模组小鼠的荧光发光强度随时间呈指数型增长（R²>0.950 0），且在移植后14 d发光强度至少可达到1.0×10～7 p/（s·cm²·sr）。HepG2-LUC低、中浓度组和Hep3B-LUC低浓度组小鼠肝脏未见明显的病理学变化，其余组肝脏肿瘤和肝细胞病变明显。结论 对于HepG2-LUC细胞株，推荐肝叶原位注射2.4×10～7个/mL （50μL）且与Matrigel重悬的混合细胞液体造模，并于造模后第7天给药或采取预后措施；而对于Hep3B-LUC细胞株，推荐肝叶原位注射7.2×10～7个/mL （50μL）(不与Matrigel重悬混合)造模，并于造模后的第14天给药或采取预后措施。