摘要: 肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是一种不可逆的致死性神经退行性疾病，其发病率与人口老龄化进程呈正相关。ALS以运动神经元的渐进性丧失为特征，导致患者肌肉无力、萎缩直至呼吸衰竭。ALS的致病机制涉及遗传和环境等多种因素，其中遗传因素尤为重要。目前已发现多个与ALS相关的致病基因，如铜锌超氧化物歧化酶1编码基因（Cu/Zn superoxide dismutase,Cu/Zn SOD1，又称SOD1）、转录反应DNA结合蛋白43编码基因（transactive response DNA-binding protein 43,TDP-43）、肉瘤融合蛋白基因（fused in sarcoma,FUS）、9号染色体开放阅读框72基因（chromosome open reading frame 72,C9orf72）等，这些基因的突变不仅见于家族性ALS中，也在散发性ALS中被发现。基于发现的ALS风险基因，通过多种方式建立了ALS动物模型，如转基因模型、基因敲入或敲除模型和腺相关病毒过表达模型，这些模型模拟了包括运动神经元丢失、泛素化包涵体形成及神经肌肉接头退变等人类ALS部分典型病理特征，但这些模型仍存在局限性：（1）单一基因突变模型难以全面模拟临床上散发性ALS的复杂多因子致病特征；（2）模式动物与人类在神经退行性疾病的微环境调节机制和病变速率上存在明显差异，这可能影响疾病表型的准确重现和药物效果的评估。为更全面地研究ALS的病理机制并推动有效药物的研发，构建和优化ALS疾病动物模型显得尤为关键。本综述归纳常用的ALS基因突变小鼠模型，分析各类基因修饰小鼠模型的表型和病理特征，包括常见转基因、基因点突变敲入、基因敲除以及通过腺相关病毒载体介导的过表达小鼠模型等；通过对比上述模型的优缺点，进一步讨论了其在ALS病理机制研究和药物开发中的具体应用情况，以期为ALS研究的模型选择提供参考。

摘要: 目的 拟从鳞状皮屑裸小鼠的皮肤上分离病原菌，并进行病原鉴定、溯源分析和致病性研究，以期为鳞状皮屑裸小鼠的病原体诊断提供新的思路。方法 对1只患鳞状皮屑皮肤病的裸小鼠的皮肤进行拭子采样，通过核酸检测、细菌分离培养、生化鉴定、16S rDNA基因扩增测序、全基因组测序构建系统进化树等方法鉴定菌株。然后取15只BALB/c裸小鼠，随机分为涂擦生理盐水的对照组、涂擦1.8×10～8 CFU/mL分离病菌液的高浓度组和涂擦1.8×10～7 CFU/mL分离病菌液的低浓度组，通过动物感染试验及HE染色观察皮肤组织病理学变化，进行该菌株的致病性分析。结果 送检裸小鼠的皮肤拭子样本中牛棒状杆菌核酸阴性，排除了牛棒状杆菌的感染。进一步分离培养的病原菌经高盐甘露醇琼脂平板和血琼脂平板培养以及革兰染色提示为革兰阳性葡萄球菌。16S rDNA测序和全自动微生物鉴定系统鉴定结果显示，该菌株为木糖葡萄球菌。全基因组测序后的系统进化树分析显示，该菌株与韩国叶菜分离株（GenBank GCA＿00207825.1）的亲缘关系最近。动物感染试验显示，高浓度和低浓度分离菌液分别感染17 d和20 d时裸小鼠头颈部和背部开始出现鳞状皮屑，之后逐渐扩散至其他部位；而且两组的皮屑症状均表现为一过性，分别持续7 d和3 d皮屑消失；高浓度组和低浓度组的感染率均为33.33%。与对照组相比，感染后的裸小鼠皮肤组织病理学观察未发现明显异常，提示该菌株对裸小鼠的致病力存在明显的个体差异。结论 从患鳞状皮屑裸小鼠皮肤上分离鉴定出1株木糖葡萄球菌菌株。该菌株是一种机会性感染病原体，临床表现为一过性的鳞状皮屑症状，组织病理学并未发生明显改变，并且裸小鼠对该菌株的敏感性存在个体差异。本研究结果为免疫缺陷小鼠或基因敲除小鼠的病原体诊断提供了数据支撑。

摘要: 目的 通过对青春期前小鼠进行来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理，构建小鼠多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）模型，比较模型小鼠与安慰剂对照小鼠的肝脏转录组差异，以探索PCOS发病过程中肝脏的作用机制。方法 定制剂量为2 mg的来曲唑缓释片，缓释周期为40 d。分别将对照安慰剂缓释片和来曲唑缓释片包埋在3～4周龄的C57BL/6J小鼠颈后皮下，每组8只，构建对照组及来曲唑诱导的PCOS模型，并在包埋次日给予小鼠高脂饮食处理。造模周期5周，每周监测每组小鼠的体重和24 h进食量。收样时记录小鼠肝脏重量，通过HE染色观察小鼠卵巢和肝脏组织病理变化，通过油红O染色观察肝脏脂质沉积水平，通过F4/80免疫组织化学染色观察肝脏巨噬细胞浸润程度，通过Masson染色观察肝脏纤维化水平；通过转录组学测序技术分析对照组和模型组小鼠肝脏组织中基因表达的差异，并对显著差异表达的基因进行富集分析；通过实时荧光定量PCR验证两组小鼠肝脏组织中显著差异表达的基因。结果 与对照组相比，来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理后的模型组小鼠体重显著增加（P<0.001），卵巢的多囊样表型显著，肝重比显著下降（P<0.05），但小鼠的肝脏重量、肝组织形态和脂质沉积没有显著影响（P>0.05）。转录组学测序发现，来曲唑处理后小鼠肝脏中有119个上调、217个下调的差异表达基因，广泛参与胆固醇和类固醇合成、类固醇激素合成及炎症反应相关通路。荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，模型组小鼠肝脏的HSD3B2和HMGCR基因的mRNA表达上调（P<0.01）,IL4、CCL2和COL1A1基因的mRNA表达下调（P<0.05）。但Masson染色与F4/80免疫组织化学染色未见肝脏纤维化水平与巨噬细胞浸润程度的显著改变。结论 来曲唑缓释片皮下给药和高脂饮食处理可以成功构建小鼠PCOS模型。模型小鼠肝脏中基因表达变化显著，可能通过调控胆固醇和类固醇代谢，参与PCOS的发病机制。

摘要: 目的 利用肝螺杆菌（Helicobacter hepaticus,H.hepaticus）致维生素D受体（vitamin D receptor,VDR）缺陷小鼠肠纤维化，构建炎性肠病模型，初步探究其病理特征及发病机制。方法 用2×10～8 CFU的H.hepaticus菌液灌胃野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只(分别命名为WT和VDR^-/-小鼠感染组)，隔天1次，连续3次；同时设立未感染对照组，即野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只，灌胃等体积PBS。最后一次灌胃后第7天检测小鼠感染情况，确认感染后每周称量1次小鼠体重。于确认感染后第16周时剖检小鼠，采集并测量结肠组织长度，取粪便检测含水量；将结肠组织分成4份，一份做石蜡切片用于HE、阿尔辛蓝-过碘酸希夫（alcian blue-periodic acid Schiff,AB-PAS）、Masson和免疫组织化学染色，一份提取DNA后使用实时荧光定量PCR （real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RFQ-PCR）检测H.hepaticus定植水平以判断感染效果，一份提取RNA后采用反转录PCR （reverse transcription-PCR,RT-PCR）法检测细胞因子表达情况，另一份提取蛋白后采用蛋白质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α-SMA）和白细胞介素（interleukin,IL）-33表达水平。结果 所有感染组小鼠经灌胃3次后均成功感染H.hepaticus。与VDR^-/-小鼠未感染对照组相比，VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus 16周后体重明显减轻（P<0.05），并出现肠道出血情况，粪便含水量显著多于未感染对照组和WT小鼠感染组（P<0.05）。与WT小鼠感染组相比，VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织经HE染色显示炎性细胞浸润，AB-PAS染色显示肠腺萎缩不规则、腺泡减少，Masson染色显示胶原面积增多。RT-PCR显示VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织中IL-6、IL-33、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和α-SMA等炎症及纤维化相关基因的转录水平比WT小鼠感染组明显升高（P<0.000 1）；免疫组织化学法和蛋白质印迹结果显示IL-33和α-SMA蛋白表达水平也明显增多（P<0.001）。结论 VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus后表现为更严重的炎症反应，出现黏膜炎性浸润、黏膜组织功能受损、胶原沉积等病变，提示炎性肠病模型构建成功。进一步研究发现VDR缺陷可能通过影响IL-33表达加剧了炎性肠病相关的肠纤维化进程。

摘要: 目的 利用辅助生殖技术挽救生殖障碍的基因修饰小鼠品系，为完善珍贵实验小鼠品系的拯救技术更新提供参考。方法 对28种不同品系的9～18月龄不育雄性小鼠实施体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）技术，即通过观察不育雄性小鼠的精子密度、精子活动等指标，选择活力较强的精子用于IVFET实验，在仔鼠出生后统计受精率、异形卵率和仔鼠出生率。对12种不同品系的8～18月龄不孕雌性小鼠实施优化的卵巢移植技术，即选取相同背景的6周龄雌性小鼠作为受体小鼠，摘除受体小鼠一侧完整的卵巢并结扎其另一侧输卵管，然后分离出供体小鼠一侧卵巢，将其原位植入受体小鼠摘除卵巢的一侧。术后21 d将受体小鼠与相同背景的8周龄野生型雄性小鼠合笼繁育，待仔鼠出生后，统计卵巢移植受体妊娠率、受体活产率等数据。结果 利用IVF-ET技术成功挽救28种小鼠品系，雄性小鼠最大年龄为18月龄。首轮IVF-ET实验成功率为89.29%(25/28)。生殖障碍雄性小鼠IVF的平均受精率为（51.01±14.97）%，异形卵率为（9.03±5.28）%，仔鼠出生率（18.60±7.03）%。40只卵巢移植受体小鼠中39只存活，卵巢移植受体妊娠率为33.33%(13/39)，卵巢移植后受体活产率为17.95%(7/39)。采用卵巢移植技术成功挽救4种小鼠品系，其中雌性小鼠最大年龄为18月龄；另外，8种品系因最终未获得存活至性成熟的子代小鼠而未被挽救。结论 针对不同原因引起的生殖障碍雄性小鼠，特别是对于错过最佳繁育年龄的小鼠，IVF-ET技术可有效进行品系挽救，获得子代小鼠。针对老龄雌性小鼠的品系挽救，卵巢移植技术可作为重要备选方案，但成功率相对IVF-ET技术较低，存在一定实验风险。