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  • 伍妙梨; 朱余军; 饶丹; 袁文; 王静; 丛锋; 黄韧; 陈梅丽; 郭鹏举
    实验动物与比较医学 2017年第37卷第5期 DOI:
    关键词: 小家鼠螺杆菌;;TaqMan-qPCR
    摘要: 目的建立敏感性高、特异好的小家鼠螺杆菌(Helicobacter muridarum)TaqMan-qPCR检测方法。方法选择小家鼠螺杆菌保守基因GyrB设计特异性引物进行PCR扩增,并构建质粒标准品GyrB-19T。通过反应体系及条件的优化,建立小家鼠螺杆菌TaqMan-qPCR检测方法,并对GyrB-19T标准品进行定性及定量分析,评估该方法的灵敏度、特异性及重复性。结果所建立的qPCR检测方法,质粒标准品浓度在2×10~2~2×10~8拷贝/μL范围内表现出较好的线性相关性,所得标准曲线的斜率为-3.57,相关系数为0.996,检测灵敏度达到200拷贝/μL。结论所建立的小家鼠螺杆菌TaqMan-qPCR方法具有特异性好、敏感性高、稳定性强等特点,适用于小家鼠螺杆菌的定量及定性分析。