摘要: 为了探索家蝇幼虫抗菌物质的提取方法,本文采用醋酸提取蝇蛆的抗菌物质,通过加热去除其中不稳定的蛋白成分,再通过切向流超滤和直接冻干法获得复合抗菌物质,测定其中可溶蛋白的含量、抗菌组分的抗菌活性及组成的差异。结果表明,和冻干法相比,利用切向流超滤法可以显著提高抗菌复合物质中可溶蛋白的含量。利用切向流超滤浓缩制备的抗菌物质和直接冻干制备的抗菌物质经过凝胶过滤层析及抗菌活性分析表明,非蛋白组分(A20-A21和B6-B12)比蛋白组分(A1-A2、A10-A13、B1-B2)抗菌谱广。电泳分析蛋白组分表明,其抗菌蛋白组分处在6 k Da-35 k Da的某些蛋白组分中。

摘要: 为评价利用球孢白僵菌F08菌株的分生孢子粉和奋斗呐5%可湿性粉剂制成的双效毒蝇绳对家蝇的控制效果,本研究对其在室内笼中、室外猪舍和垃圾处理场环境条件下对家蝇的控制效果进行了测试。结果表明:1室内和室外试验条件下,双效毒蝇绳对家蝇的控制效果都优于奋斗呐毒蝇绳和球孢白僵菌毒蝇绳。3种试验条件下,双效毒蝇绳对家蝇的校正防治效果与球孢白僵菌毒蝇绳间有极显著差异(P<0.01);且在猪舍试验条件下,其校正防治效果与奋斗呐毒蝇绳组1周时有显著差异(P<0.05),2周时有极显著差异(P<0.01)。2球孢白僵菌对家蝇的感病率仅在室内笼中狭小空间时在球孢白僵菌毒蝇绳组和双效毒蝇绳组有显著差异(P<0.01),而在猪舍或垃圾处理场试验条件下无显著差异(P<0.05)。说明双效毒蝇绳中的球孢白僵菌F08菌株与奋斗呐具有较好的兼容性,一起对家蝇发挥很好的控制作用。

摘要: 在实验室条件下研究了三叶蔓荆Vitex trifolia L.叶片提取物对甘蓝蚜Brevicoryne brassicae L.的拒食、对菜粉蝶Pieris rapae L.幼虫的生长发育抑制以及对家蝇Musca domestica的毒杀活性。试验结果表明:10 mg/mL的乙酸乙酯提取物在24 h和48 h对蚜虫的拒食率分别为88.89%和86.36%,拒食效果明显。几种溶剂提取物对5龄菜粉蝶幼虫的生长发育均有不同程度的影响,其中乙酸乙酯提取物的体重增长抑制率第1天达75.35%。各溶剂提取物在高浓度下对家蝇2龄幼虫均有一定的毒杀作用,低浓度下效果较差。乙酸乙酯提取物48 h的LC50为22.78 mg/mL,远高于拒食和生长发育抑制试验设定的浓度。结果表明乙酸乙酯提取物拒食活性和生长发育抑制活性显著。

摘要: 对家蝇3种丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin基因SP2、SP13和SP16进行克隆、序列分析和时空表达模式检测。运用瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(Ex PASy)和美国国家生物技术信息中心(NCBI)等有关的生物信息学分析工具,预测和分析3条Serpin基因编码蛋白质的结构与生物学功能。以RPS18(核糖体S18蛋白)为内参基因,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术检测3条Serpin基因在家蝇不同发育时期,以及家蝇3龄幼虫中脂肪体、唾液腺、中肠、马氏管和体壁的表达特征。SP2、SP13、SP16基因序列的开放阅读框ORF全长分别为1191 bp、1137 bp和1212 bp,分别编码含396、378和403个氨基酸残基的蛋白质,其理论分子量分别为45315.3 Da、43701.5 Da和45011.5 Da,等电点分别为9.01、5.98和6.04,蛋白质的N端都含有一段信号肽,并具有Serpin基因的保守结构域,属于Serpin家族。SP2和SP16在蛋白质的C端含反应中心环(Reactive center loop,RCL),而SP13 C端不含RCL。时空表达模式分析结果显示,SP2基因在2龄幼虫中的表达量最高,而雄蝇的表达量与卵期相比有所下调;SP13基因在蛹中的表达量最高,1龄幼虫和雌蝇中的表达量与卵期相近;SP16基因在2龄幼虫和3龄幼虫中的表达量最高,雄蝇与雌蝇的表达量与卵期相比有所下调。在家蝇3龄幼虫的各主要组织中,以体壁为参照,SP2基因在唾液腺表达水平最高,其次是脂肪体,中肠和马氏管均低于体壁;SP13基因在马氏管和脂肪体中的表达水平最高,中肠和唾液腺的表达量低于体壁;SP16基因在唾液腺、中肠、脂肪体和马氏管的表达量均低于体壁。推测Serpin基因在家蝇个体发育和免疫调节中起不同作用。

摘要: 克隆家蝇内源性β-葡萄糖苷酶(beta-glucosidase,BG)基因并建立原核表达体系,检测其表达产物的活性,了解家蝇内源性BG酶特点,为进一步解释家蝇极强环境适应能力和发现新的种群控制措施提供分子生物学基础。以草地贪夜蛾等结构信息相对完整且研究较为透彻的6种代表性昆虫的BG酶基因序列为参照对象,利用同源克隆结合RACE-PCR的方法,从家蝇cDNA中克隆得到BG酶基因的全长cDNA序列并对其进行生物信息学分析。分别采用原核表达载体pET-28a(+)构建原核表达体系并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中诱导表达BG酶基因的融合蛋白。采用七叶苷平板显色法和DNS法检测表达体系融合蛋白的酶活性,并对其性质进行初步的分析。家蝇体内克隆得到了长度为1933 bp的家蝇BG酶基因全长cDNA序列,推导其为562个氨基酸残基组成的蛋白多肽。重组原核质粒经诱导表达后,在65 kDa附近均出现特异性蛋白条带,证实重组质粒成功表达。重组表达的家蝇BG酶兼具内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶和BG的酶活性。家蝇BG酶是一种新的多功能纤维素酶,是昆虫纤维素酶研究的重要补充。