摘要: 家蚕微粒子病是家蚕Bombyx mori的重要病害，探索其消毒杀灭方法对蚕业生产具有重要意义。本研究采用微粒子染色法和添食家蚕侵染法测试了温度、紫外线和消毒剂处理10~8个/mL家蚕微粒子后对家蚕微粒子的消杀作用，结果表明：温度对家蚕微粒子虫灭活温度为60℃处理30 min以上；使用20 wx功率紫外灯距离50 cm照射12 min及以上时，微粒子死亡率为47.70%,对家蚕侵染率为0;三氯异氰脲酸800 mg/L及以上浓度处理6 min以上家蚕微粒子死亡率为100%,对家蚕的侵染率为0;戊二醛癸甲溴铵200 mg/L及以上浓度处理6 min以上家蚕微粒子死亡率为100%,对家蚕的侵染率为0。3种消毒方法中温度法主要用于小型蚕具消杀微粒子；紫外线用于蚕业辅助设施的表面微粒子的消杀；三氯异氰脲酸和戊二醛癸甲溴铵均表现出较好的消杀效果，其中戊二醛癸甲溴铵较含氯的消毒剂三氯异氰脲酸稳定性强，刺激性小，对养蚕的金属腐蚀性小，可作为含氯消毒剂的部分替代使用。本研究结果可为蚕业生产中消杀微粒子提供参考。

摘要: BmSQD(Bombyx mori SQUID)是一种具有RRM结构域(RNA recognition motif, RRM)的核内不均一核糖核蛋白(heterogeneous nuclear ribonucleoproteins, hnRNPs)。为探究SQD在家蚕中的表达定位和功能，在生物信息学分析和克隆表达与抗体制备的基础上，本文通过对变态发育和胚胎发育时期部分组织的BmSQD蛋白水平和mRNA水平表达量进行分析，辅以组织细胞定位的免疫组化分析，对SQD蛋白的基本特性和在家蚕Bombyx mori中的表达定位及功能进行了研究。生物信息学分析显示，昆虫中的SQD同源基因相似性高，尤其是SQD蛋白二级结构的α螺旋和β折叠按照β1-α1-β2-β3-α2-β4的空间顺序组合形成的两个RRM结构域在昆虫中高度保守；BmSQD是一种亲水性且具有特定空间结构的hnRNPs蛋白，存在潜在的磷酸化位点；BmSQD在家蚕中的大部分组织中都有表达，尤其在卵巢与精巢等重要组织，且主要在家蚕发育的重要时期如胚胎发育与变态发育时期高表达，主要定位在细胞核内，对基因转录后调节起到剪接调控作用。本文为研究SQD蛋白在昆虫变态发育和胚胎发育中的剪接调控机制提供数据参考的意义。

摘要: 为克隆家蚕Bombyx mori Piwi亚家族蛋白基因cDNA全长序列，分析其分子特征和表达模式，探究Piwi亚家族蛋白在家蚕中的生理功能，本研究利用已知物种的Piwi亚家族蛋白搜索家蚕基因组，预测获得家蚕Piwi亚家族蛋白基因siwi1和siwi2,采用RACE技术克隆siwi1和siwi2的全长cDNA序列，利用ORFfinder、Gene-Explorer、InterPro等分析其分子特征；其次，利用已知的所有物种Piwi蛋白及其类似物Piwil构建系统发育树；最后，通过荧光定量PCR技术检测了siwi1和siwi2在丝腺、马氏管、中肠、头部、卵巢和精巢以及不同发育时期(卵、1～5龄幼虫、蛹、成虫)的表达水平，结果显示，克隆获得了siwi1 cDNA全长3 277 bp,包含部分5′UTR、完整的开放阅读框ORF和3′UTR,获得了siwi2的部分序列，其中siwi1对应BmPiwi,siwi2对应BmAgo3。系统发育结果显示，家蚕Piwi亚家族蛋白与乳草长蝽Oncopeltus fasciatus、黑腹果蝇Drosophila melanogaster、橘小实蝇Bactrocera dorsalis、优雅蝈螽Gampsocleis gratiosa、斯氏按蚊Anopheles stephensi、褐飞虱Nilaparvata lugens的PIWI蛋白以及东亚飞蝗Locusta migratoria的PIWI2和PIWI3蛋白亲缘关系最近，和三疣梭子蟹Portunus trituberculatus的PIWI2和PIWI3同为一支。家蚕AGO3蛋白与小菜蛾Plutella xylostella的AGO3亲缘关系最近，与西方玉米根虫Diabrotica virgifera virgifera、白蜡窄吉丁Agrilus planipennis的AGO3及东亚飞蝗Locusta migratoria的PIWI1同属一支，与橘小实蝇Bactrocera dorsalis的AGO3同属一总支。组织表达结果表明BmPiwi在精巢表达水平显著高于其他组织，其次是卵巢及头部，而BmAgo3在头部表达水平显著高于其他组织。BmPiwi和BmAgo3在卵期表达量最高，但在初孵幼虫中表达量迅速下降，并在整个幼虫时期都维持低表达状态，直至蛹期开始表达量出现大幅回升，并维持高水平表达至成虫期。本研究发现BmPiwi和BmAgo3在家蚕中的表达具有明显的时空特异性，在生殖组织以及需要进行大量细胞活动的时期，家蚕Piwi亚家族蛋白基因的表达均发生了明显的变化，为进一步探测家蚕Piwi亚家族的生理功能提供了研究方向和理论基础。

摘要: Chd64是含有钙结合蛋白同源(Calponin homology, CH)结构域的蛋白，在果蝇蜕皮激素与保幼激素信号通路中发挥重要作用。本研究以家蚕Bombyx mori为研究对象，利用PCR克隆了与果蝇Drosophila melanogasterDmChd64同源的BmChd64基因，与表达载体pET-28a连接后，成功获得体外原核表达的BmChd64蛋白，并对其进行了亚细胞定位分析。家蚕BmChd64基因开放阅读框(ORF)的序列为567 bp,编码188个氨基酸，预测分子量大小为20.9 kDa,理论等电点为8.41,编码的蛋白在第27～130个氨基酸处存在CH结构域。同源性比对与进化分析显示，BmChd64与赤拟谷盗Tribolium castaneum和果蝇的Chd亲缘关系较近。qRT-PCR结果显示，BmChd64在家蚕5龄游走期的不同组织中均有表达，且在翅原基中的表达趋势与家蚕体内蜕皮激素(20-hydroxyecdysone, 20E)滴度变化规律一致。亚细胞定位结果显示，BmChd64在细胞核与细胞质中均有分布，细胞核内荧光信号较强，且在细胞核外围较弱，推测细胞质中BmChd64也可入核，最终定位在细胞核中。研究结果表明BmChd64可能主要通过20E信号通路调控翅原基等的变态发育，这为进一步完善20E调控昆虫变态发育的分子机制提供了实验基础。

摘要: Fox家族蛋白广泛存在于植物以外的物种中，是一类与发育相关的重要转录因子。但是不同Fox基因在鳞翅目昆虫家蚕Bombyx mori精巢中的表达特征，以及BmFoxL2亚家族蛋白在精巢发育中的功能未知。本文检测了家蚕12个BmFox基因在家蚕精巢中的表达量，发现BmFoxL2-2的表达量最高，BmFoxL2-1次之。BmFoxL2-1和BmFoxL2-2在精巢中的表达量显著高于卵巢。亚细胞定位分析显示BmFoxL2-1在细胞核中表达，BmFoxL2-2在细胞核和细胞质中都有表达。生物信息学分析显示BmFoxL2-1和BmFoxL2-2都有保守的Fox结构域，但N端结构以及理化性质存在差异。BmFoxL2-1在家蚕精巢中的表达随着发育时间逐渐升高，BmFoxL2-2的表达在幼虫末期和蛹期达到高峰；BmFoxL2-1和BmFoxL2-2在精巢内容物中的表达均高于精巢膜。在Bm12细胞中分别过表达BmFoxL2-1和BmFoxL2-2蛋白后，BmNanos、BmVasa和BmCyclin A等发育相关基因的表达均显著上调，暗示这些基因受BmFoxL2亚族蛋白的调控。由此，本文推测家蚕FoxL2亚族蛋白可能通过调节精巢细胞周期或生殖细胞的功能来调节家蚕精巢的发育。