摘要: 为了探索重离子射线局部照射使昆虫体内某一特定的组织或器官失去活性这一放射线显微手术技术的有效性和可能性 ,用碳离子射线 ( 1 2 C5+,1 8 3MeV u)对家蚕Bombyxmori幼虫进行了全体照射或局部照射。研究结果表明 :与全体照射不同 ,局部照射后的个体与对照个体在存活率及茧质等性状上没有明显的差异 ,只是由于照射剂量及照射部位的不同 ,在照射部位出现局部的影响。对 4龄第 3天幼虫的造血器官进行局部照射后 ,其造血功能遭到破坏 ,血液中的游离血球数明显下降。因此利用重离子射线局部照射技术能够替代某些传统的外科手术 ,破坏昆虫体内特定的组织或器官 ,以便进行该器官或组织的机能研究

摘要: 采用RT PCR方法从家蚕Bombyxmori新疆品种新蚕三号组织中扩增天蚕素cDNA片段 ,回收并克隆至pMD18 T载体 ,进行序列分析。基因序列分析结果与已发表的天蚕素B的序列同源性为 98% ,表明所克隆的新疆家蚕天蚕素cDNA为独特的cDNA片段。将天蚕素基因与pGEX 4T 1融合表达载体中的谷胱甘肽转移酶基因融合 ,在大肠杆菌中表达 ,结果表明经IPTG诱导 30min后 ,pGEX 4T 1 天蚕素转化后的大肠杆菌生长明显受到抑制 ;当诱导 2 10min后 ,大肠杆菌数量又开始增加 ,逐渐恢复至正常水平。说明天蚕素与谷胱甘肽转移酶基因融合表达后 ,在IPTG存在的短时间内仍然对原核细胞有较强的抗菌抑杀作用。

摘要: 为了研究家蚕Bombyxmori卵中储存的母性遗传信息 ,以未受精的肾脏型和正常型蚕卵为材料构建了cDNA文库 ,并对其随机测序 ,共获得 391条表达序列标签 (EST)序列 ,经拼接后得到 374条非重复序列。生物信息学分析发现 ,172个非重复序列与国际数据库GenBank和silkbase中的已知基因具有较高的相似性。除 3个已知母性基因外 ,其余主要与DNA复制、能量代谢、信号转导、转录、蛋白质结构以及胚胎发育中个体形成等相关。该结果可为进一步研究家蚕胚胎早期发育的调控提供基础数据

摘要: 昆虫能够特异性识别同类异性。雄蚕蛾对雌蚕蛾感知定位过程中,性信息素结合蛋白PBP1、气味受体OR1和OR3起重要作用。为研究家蚕Bombyx mori和野桑蚕Bombyx mandarina杂交困难的分子机制,了解性识别相关基因的进化,本研究克隆得到了野桑蚕的性信息素结合蛋白基因pbp1(GenBank注册号:GQ246497)和气味受体基因or1(Genank注册号:GQ246496)和or3(GenBank注册号:GQ246498)。序列分析发现,家蚕与野桑蚕相比,pbp1基因存在4个SNP位点,分别为C10A,A40T,T270C和A333G,其中2个SNP位点引起氨基酸的改变,分别为Q→K和N→Y;or1基因存在5个SNP位点,分别为T910C,A1147C,A1192T,T1276C和G1282A,其中1个SNP位点引起氨基酸F→L的改变;or3基因存在4个SNP位点,分别为A507G,A513G,T605C和G672A,其中1个SNP位点引起氨基酸I→T的改变。3个基因的遗传距离很近,进化速率也很慢。氨基酸的分子量和等电点有细微差异或无差异。PHD预测的二级结构表明,变异位点对附近区域的结构没有任何影响,功能位点也没有变化。推测家蚕与野桑蚕之间,这些基因功能可能没有差异,即二者的雌雄性个体间可以相互感知、识别,这与实验观察结果一致。

摘要: 家蚕Bombyxmori丝腺具有高效合成蛋白质的特性,开发在丝腺特异表达外源蛋白质的生物反应器具有重要的意义。本研究利用piggyBac来源的两种载体pPIGA3GFP和pBac{3×P3-EGFPaf},建立了稳定的家蚕转基因技术体系;然后,利用一株黑曲霉来源的植酸酶基因,构建了在家蚕后部丝腺特异表达的融合表达载体pBac[3×P3-EGFP+FibLphyADsRed],注射蚕卵后,在53个G1蛾区中检测到3个有荧光蚕的蛾区。经Southern blot和反向PCR验证,转基因表达盒整合到家蚕染色体上。RT-PCR结果显示,植酸酶基因特异性地在后部丝腺表达,其表达模式与家蚕轻链丝素基因一致。结果表明我们成功获得了在后部丝腺特异表达植酸酶融合蛋白的转基因蚕,这为进一步开发家蚕生物反应器,利用转基因蚕生产各种重组蛋白具有积极的促进作用。