摘要: 利用形态学观察方法、分子生物学检测方法以及20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone)和放线菌酮(cycloheximide)体外培养方法,研究了家蚕Bombyxmori蛹变态期丝腺组织的退化与细胞凋亡特征。显微镜的观察显示家蚕丝腺的逐渐退化发生在吐丝期间。DNA梯度电泳的分析表明程序性细胞死亡(programmedcelldeath)可能伴随发生在丝腺的退化过程中。在离体培养条件下,用20_羟基蜕皮酮处理5龄第6天幼虫的丝腺,导致的细胞凋亡提前于对照,提示在进入蛹变态期前,20-羟基蜕皮酮提早激发了介导家蚕丝腺细胞凋亡与水解机制的遗传调控级联系统。上述结果表明,20-羟基蜕皮酮能够诱导家蚕丝腺组织在蛹变态期发生程序性细胞死亡。

摘要: 通过荧光差异显示技术,分析了家蚕Bombyxmori对BmNPV抗性品系NB、感性品系306和近等基因系306NNZZ添毒和未添毒处理区的基因表达的差异。根据差异显示的结果克隆了一条702bp长度的cDNA片段,并用Northernblot进行了验证。该序列经过NCBIEST库的同源性比较获得了电子延伸。延伸后的序列用特异引物进行RT_PCR扩增获得了一条782bp的序列,拼接后基因cDNA序列全长为827bp,推导的氨基酸序列与草地夜蛾SpodopterafrugiperdaS3A同源性最高达97.7%;其次是烟芽夜蛾HeliothisvirescensS3A,同源性为94.0%;与黑腹果蝇DrosophilamelanogasterS3A同源性为75.3%。比较结果显示这是一个新的家蚕基因,定名为家蚕s3a基因。本实验获得的s3a基因在家蚕感性和抗性品系以及添毒处理和未添毒处理中都具有差异表达,其中在抗性品系和近等基因系中的表达高于感性品系,在添毒处理中的表达高于未添毒组。因此推测它是一个与家蚕抗BmNPV相关的新基因。

摘要: 为了探讨家蚕 Bombyx mori胚胎蛋白质整体变化, 以多化性品种P50为材料, 采用蛋白质双向电泳技术及图像分析技术分析了催青前期胚胎 (戊3 以前) 各个时期蛋白质图谱及其变化情况。研究发现: 从临界Ⅱ期 (丙2 ) 胚胎到缩短期(戊2) 胚胎蛋白质双向电泳图谱基本稳定, 存在于临界Ⅱ期胚胎的蛋白斑点在催青前期的4个胚胎中消失的个数较少, 仅占22 80%, 而在催青的最后2个胚胎中消失的蛋白质斑点却占 48 18%; 在神经沟出现 (丁1)、腹肢突起 (丁2)、上唇突起 (戊1) 和缩短期 (戊2) 胚胎的双向电泳图谱中能够检测到 100 个特异蛋白质斑点, 这些特异蛋白质斑点大多在随后邻近的胚胎发育中消失, 暗示了这些特异蛋白可能与相应胚胎的形体特征发育有关。

摘要: 昆虫 重组杆状病毒表达系统是有效的真核表达系统之一 ,广泛应用于重组蛋白的生产。目前常采用将重组病毒直接注射入家蚕体内的方法进行感染表达 ,在实际操作过程中很容易造成病毒对环境的污染 ,具有潜在的危险性。为了严格控制作业环境重组病毒的扩散和潜在污染 ,开发安全、有效的感染方法显得非常必要。本研究直接将病毒基因组DNA导入家蚕体内取得同样的感染效果 ,探讨了利用阳离子脂质体介导下的避免病毒污染和提高感染效果的感染方法。

摘要: 研究了取食不同水分含量桑叶对二化性家蚕 (CSR3×CSR6 ) 5龄幼虫的影响。实验设嫩叶 (水分含量 80 % 85 % )、半成熟叶 (水分含量 6 5 % 70 % )和成熟叶 (水分含量 5 5 % 6 0 % ) 3个不同处理。采用标准重量分析法分析和计算各种生长、营养和营养效率指数。结果表明 ,在取食较高水分含量桑叶的处理中 ,营养指数 (包括取食量、消化量和近似消化率等 )和营养效率指数 (包括食物利用率和转化率等 )均显著较高 ,但不同处理中消化食物向茧壳的转化率及产生每克茧壳所需食物消化量差异不明显。结论是取食水分含量高的桑树嫩叶有助于提高家蚕的取食和营养